一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法技术

本发明专利技术涉及一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法,通过该筛选方法筛选出简便易行的TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂壳寡糖作为TMEM16A钙激活氯离子通道筛选实验的阳性对照物，壳寡糖可以筛选其他可作为TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的药物，为研究TMEM16A/CaCCs激活剂在治疗高血压、CF病、哮喘、胃肠动力学障碍疾病和某些类型的肿瘤等疾病中的应用提供基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法。
技术介绍
I丐激活氯离子通道(Calcium-activated Chloride Channels, CaCCs)由于被细胞内部钙离子所激活而得名，最早发现于非洲爪蟾卵母细胞中，随后相继有报道表明上皮细胞、血管内皮细胞、神经元、平滑肌与心肌细胞中都存在。钙离子介导的信号转导途径是真核生物信号转导的重要组成部分，因此CaCCs执行多种功能，包括卵细胞的受精、跨上皮离子/液体转运、心肌细胞复极化和动作电位发生、嗅觉传导及平滑肌伸缩的调节等。由于技术的原因，CaCCs的分子基础问题一直未能解决，导致相关药理学研究进程极为缓慢。直到2008年底，有三个研究小组独立报道CaCCs的分子基础是跨膜蛋白16A(transmembrane 16A,简称 TMEM16A)(Schroeder BC 等，Cell, 2008，134:1019-1029;CaputoA 等，Science, 2008，322:590-594; Yang YD 等，Nature, 2008，455:1210-1215)。这一发现本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法,其特征在于，包括如下步骤：（a）将TMEM16A质粒稳定转染入哺乳动物细胞HEK293细胞；（b）将黄色荧光蛋白YFP三突变体YFP？F46L/H148Q/I152L导入步骤（a）中的稳定转染TMEM16A钙激活氯离子通道的HEK293细胞；（c）将候选药物与步骤（b）所述的导入后的细胞进行孵育，再加入含有碘离子的溶液观察，其中若荧光强度减弱，表明所述候选药物可能为TMEM16A钙激活氯离子通道的激活剂,并采用步骤（d）进行进一步验证；（d）使用电生理学方法测定所述候选药物对步骤（a）中电流的影响，其中若加入所述候选药物后电流比对照增大，则表...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：展永，陈娅斐，郭鹏，安海龙，耿金鹏，王晖，袁宏博，赵小明，杜昱光，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：