一种快速高效获得抗原特异性B细胞的方法技术

技术编号:8128339 阅读:241 留言:0更新日期:2012-12-26 23:37
本发明专利技术涉及一种快速高效获得抗原特异性B细胞的方法。提供了特别适合于鉴别B细胞的表面标志物,并以特定的抗原筛选包含能与该抗原结合的抗体的B细胞。本发明专利技术的方法可快速、高效获得抗原特异性B细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
;更具体地,本专利技术涉及一种快速高效获得抗原特异性B细胞的方法
技术介绍
分离、培养及鉴定产生特异性结合某目标抗原的抗体的B细胞的方法在本领域研究中是非常重要的。这种B细胞可以用于制备抗原特异性抗体以及回收编码这种抗体的核酸序列,还可用于抗原结合特性分析等功能测定。抗体由B细胞产生,可以用于鉴定外源性或内源性抗原,如毒素、细菌、病毒、细胞因子、酶等。每种抗体结合于抗原的特定表位。抗体识别特异性表位且与之结合的能力使 抗体成为有用的治疗和诊断工具。目前所使用的,获得免疫系统中针对某种抗原的B细胞,并制备单克隆抗体的方法主要为杂交瘤技术。即用抗原免疫动物,诱导免疫反应,然后用该动物的脾细胞(含大量B细胞)与能无限增殖的骨髓瘤细胞系融合以形成杂交瘤,通过分泌抗体的抗原特异性检测进行杂交瘤筛选鉴定,获得分泌针对目标抗原抗体的细胞克隆。但是抗原特异性B细胞在脾脏细胞中的“丰度”使分离抗原特异性克隆变得随机性很大。当寻找具体的表位特异性或功能活性的B细胞时,人们希望这一 B细胞经过某种筛选过程,以使获得目的单克隆抗体的成功率变得更大。此外,可在筛选获得的抗原特异性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富集目标抗原特异性B细胞的方法,其特征在于,包括:从含有B细胞的群体中富集CD19+/IgG+且能够与目标抗原结合的B细胞,所获得的细胞为目标抗原特异性B细胞。

【技术特征摘要】
1.一种富集目标抗原特异性B细胞的方法,其特征在于,包括从含有B细胞的群体中富集CD19+/IgG+且能够与目标抗原结合的B细胞,所获得的细胞为目标抗原特异性B细胞。2.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述的目标抗原是病毒侵染动物体的关键蛋白。3.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述的目标抗原来源于流感病毒,负黏液病毒,疱疫病毒,狂犬病病毒,乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒,HIV病毒,手足口病毒。4.如权利要求I所述的方法,其特征在于,利用CD19结合分子和IgG结合分子来富集CD19+/IgG+的 B 细胞。5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,以不同的可识别信号来标记所述的CD19结合分子、IgG结合分子以及目标抗原,从而富集CD19+/IgG+且能够与该目标抗原结合的B细胞。6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,以荧光染料FITC标记CD19结合分子;以荧光染料APC标记IgG结合分子;以荧光染料Cy3标记目标抗原。7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的CD19结合分子是抗CD19抗体;或所述的IgG结合分子是抗IgG抗体。8.如权利要求I所述的方法,其特征在于,采用流式细胞术富集CD19+/IgG+且能够与该目标抗原结合的B细胞。9....

【专利技术属性】
技术研发人员:孙兵陈爱中边超王凌凌
申请(专利权)人:中国科学院上海生命科学研究院
类型:发明
国别省市:

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