一种产酯酶肠杆菌、其酯酶和基因及其在制备紫杉醇手性前体中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种产酯酶的肠杆菌，所述肠杆菌产生的酯酶的蛋白质序列，该酯酶的基因，含有该基因的重组表达子和重组表达转化体，以及重组酯酶及其制备方法。本发明专利技术还公开了利用该肠杆菌整细胞，其酯酶或其重组酯酶催化消旋(±)-苯基缩水甘油酸甲酯对映选择性水解，制备生产手性紫杉醇前体(2S，3R)-苯基缩水甘油酸甲酯的用途。所述肠杆菌（Enterobacter?sp.）ECU?1107的保藏编号为CGMCC?No.5981。采用本发明专利技术提供的肠杆菌整细胞，其酯酶或重组酯酶催化制备紫杉醇前体，工艺简单，反应条件温和，催化效率高，产物光学纯度好，对映体过量值(ee)>99%，具有很好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术具体涉及一种产立体选择性酯酶的肠杆菌，该酯酶蛋白质，编码该酯酶的基因，含有该基因的重组载体和重组表达转化体，所述酯酶及其重组酯酶的制备方法，以及所述肠杆菌整细胞，或所述酯酶，或其重组酯酶作为催化剂在制备紫杉醇手性前体(2S，3R)-苯基缩水甘油酸甲酯中的应用。
技术介绍
光学活性的苯基缩水甘油酸甲酯是一种重要的手性砌块，(2S，3R)_苯基缩水甘油酸甲酯可以用于合成抗癌药物紫杉醇的侧链，也可以作为手性药物黄皮酰胺的起始材料。紫杉醇具有良好的抗肿瘤活性，对于卵巢癌、乳腺癌、肺癌、白血病、肠胃癌等多种癌症具有良好的治疗作用，而黄皮酰胺具有促智作用，是一种抗老年痴呆药物。如何获得单一构型的光学纯苯基缩水甘油酸甲酯已成为人们所关注和研究的重要课题。目前光学纯紫杉醇手性前体苯基缩水甘油酸甲酯的制备方法主要分为化学不对称合成法和酶促拆分法。化学不对称合成法主要是α，β_不饱和酮或酯的不对称环氧化(Journal of Organic Chemistry, 2004, 69:4216-4226;Chemistry-An AsianJournal, 2007, 2:257-264 和 A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肠杆菌（Enterobacter？sp.）ECU？1107，其保藏编号为CGMCC？No.5981。

【技术特征摘要】
1.一种肠杆菌(Enterobacter sp. ) ECU 1107，其保藏编号为 CGMCC No. 5981。2.一种分离的蛋白质，其特征在于其是如下(a)或(b)的蛋白质 (a)其氨基酸序列如序列表中SEQID No:2所示的蛋白质； (b)在(a)中的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸残基且具有酯酶活性的由(a)衍生的蛋白质。3.一种分离的核酸，其特征在于，其是如下(I)或(2)的核酸 (1)其核苷酸序列如序列表中SEQID No: I所示的核酸； (2)编码如下蛋白质(a)或(b)的基因 (a)其氨基酸序列如序列表中SEQID No:2所示的蛋白质； (b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有酯酶活性的由(a)衍生的蛋白质。4.一种包含如权利要求3所述的核酸的重组表达载体。5.一种包含如权利要求4所述的重组表达载体的重组表达转化体。6.一种重组酯酶的制备方法，其特征在于，该制备方法包括培养如权利要求5所述的重组表达转化体，从培养物中获得重组表达的酯酶。7.一种酯酶的制备方法，其特征在于，其方...

【专利技术属性】
技术研发人员：许建和，周冬杰，潘江，李春秀，郁惠蕾，郑高伟，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：