从花椒叶中提取抗氧化活性植物多酚的方法技术

本发明专利技术公开了从花椒叶中提取抗氧化活性植物多酚的方法，其特点是将红花椒叶粉碎，平均粒度为300～500μm，按料液比1g∶10～30ml加入浓度50～100%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24～48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率为5～10%；将甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为1g∶20～40ml，然后按体积比1∶2～5加入正己烷震荡萃取2～3次，收集水相萃取物；?再将水相萃余物按体积比1∶2～5加入氯仿，震荡萃取2～3次，收集水相萃余物；然后将水相萃余物按体积比1∶2～5加入乙酸乙酯，震荡萃取2～3次，收集乙酸乙酯相萃取物，浓缩干燥后得到抗氧化活性植物多酚，得率为4～10%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于化学化工

技术介绍
目前有研究表明，人体组织内氧化性损伤的増加和衰老性疾病如组织老化、癌症、糖尿病、冠心病的发生密切相关。可以通过对体内自由基的清除而达到防御及治疗疾病的目的。目前，人工合成的抗氧化剂因其具有潜在毒性和致癌作用而受到人们的排斥，而天然抗氧化剂具有安全、低毒等优点，符合人们对绿色健康的需求，因此，从天然食材中筛选天然抗氧化物质一直是国际研究的热点。·花椒叶又名椒叶，为芸香科植物花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)或青椒(Zanthoxylum schinifolium Zucc.)的叶。我国花椒种植面积约21万平方米,主要分布于陕西、甘肃、山东、四川等地，花椒叶产量巨大。《中国药典》记载其性味辛、热、无毒，归脾、胃经，温中散寒；燥湿健脾；杀虫解毒。《日华子本草》中记载花椒叶可治奔豚、霍乱、转筋等疾病。此外，花椒叶是我国的传统蔬菜和香料，可做调料食用或制作椒茶。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的不足而提供一种从，其特点是从红花椒叶中分离植物多酚类物质，其中包含八种主要活性化合物，即槲皮素-3- β -D-葡萄糖苷、异槲皮苷、芦丁、茴香苷、山奈酚-7- β -D-葡萄糖苷、槲皮苷、山奈酚-3-β-D-半乳糖苷和阿福豆苷。这些混合物和分子可以用于预防和治疗体内自由基过多引起的衰老性疾病。本专利技术的目的由以下技术措施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。从包括以下步骤(I)将干红花椒叶粉碎，平均粒度为300 500μπι，按料液比Ig : 10 30ml，优选为Ig 15 25ml加入浓度50 100%，优选为60 80%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24 48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率为5 10% ；(2)将上述甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为Ig 20 40ml，优选为Ig 25 30ml，然后按体积比I : 2 5加入正己烷震荡萃取2 3次，收集水相萃取物；(3)将上述水相萃余物按体积比I : 2 5加入氯仿，震荡萃取2 3次，收集水相萃余物；(4)将上述步骤(3)中的水相萃余物按体积比I : 2 5加入こ酸こ酷，震荡萃取2 3次，收集こ酸こ酯相萃取物，浓缩干燥后得到红花椒叶中主要的植物多酚类组分，得率为4 10%ο制备得到的抗氧化活性植物多酚。抗氧化活性植物多酚用于清除活性氧自由基，激活细胞内抗氧化防御系统，预防和治疗体内自由基过多引起的衰老性疾病。性能测试通过高效液相色谱及高效液相色谱质谱仪联用对上述步骤(4)中乙酸乙酯萃取物进行成分分析及标准品的比对，结果详见表I所示。结果表明上述步骤(4)中乙酸乙酯萃取物中主要活性植物多酚成分包含槲皮素-3-β -D-葡萄糖苷、异槲皮苷、芦丁、茴香苷、山奈酚-7-β -D-葡萄糖苷、槲皮苷、山奈酚-3-β -D-半乳糖苷和阿福豆苷，高效液相色谱以及质谱的条件如下 (I)高效液相色谱分析条件0DS-2色谱柱(04. 6 X 150mm, 5 μ m);流速，O. 5ml/min ;柱温，25°C ;检测波长，280nm ;梯度洗脱液0min时，5%甲醇(含O. 1%甲酸)；IOmin时，25%甲醇(含O. 1%甲酸);20min时,30%甲醇(含O. 1%甲酸);30_50min，35%甲醇(含O. 1%甲酸)；60min 时,50% 甲醇(含 O. 1% 甲酸)；70min 时,60% 甲醇(含 O. 1% 甲酸)；80-90min, 100%甲醇(含O. 1%甲酸)。(2)质谱分析条件电喷雾离子源(ESI)，正(负)离子电离；喷雾电压5500V;结束电压350 V ;干燥气流速10 L/min，干燥温度400°C ;氮气压力60psi ;扫描范围100 800 m/ Z0本专利技术具有如下优点(I)上述的花椒叶乙酸乙酯提取物在制备植物多酚中的应用，具有工艺简单、操作方便等优点；(2)抗氧化活性强。实验证明，利用本专利技术提供的制备方法所获得的有效组分显示了很强的抗氧化活性，在浓度为4 μ g/ml时，对2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力就达到59. 9%，IC50=2. 47Pg/ml。附图说明图I:花椒叶乙酸乙酯提取物的高效液相色谱分析。分析条件如下0DS_2色谱柱(04. 6 X 150mm, 5 μ m);流速，O. 5ml/min ;柱温,25。。;检测波长，280nm ;梯度洗脱液0min时，5%甲醇(含O. 1%甲酸)；IOmin时，25%甲醇(含O. 1%甲酸)；20min时，30%甲醇(含O. 1%甲酸)；30-50min，35% 甲醇(含 O. 1% 甲酸);60min 时,50% 甲醇(含 O. 1% 甲酸)；70min 时,60%甲醇(含O. 1%甲酸)；80-90min, 100%甲醇(含O. 1%甲酸)。槲皮素_3_β -D-葡萄糖苷(保留时间为50. lmin)、异槲皮苷(保留时间为52. lmin)、芦丁(保留时间为52. lmin)、茴香苷(保留时间为57. 9min)、山奈酚_7_β -D-葡萄糖苷(保留时间为61. 5min)、槲皮苷(保留时间为62. 7min)、山奈酚_3_β -D-半乳糖苷(保留时间为63. 4min)和阿福豆苷(保留时间为68.5min)。图2:花椒叶乙酸乙酯提取物的高效液相色谱质谱仪联用分析图谱。高效液相色谱分析条件如下0DS-2色谱柱(04. 6 X 150mm, 5 μ m);流速,0. 5ml/min ;柱温，25°C ;检测波长，280nm ;梯度洗脱液=Omin时，5%甲醇(含O. 1%甲酸);IOmin时,25%甲醇(含O. 1%甲酸)；20min 时,30% 甲醇(含 O. 1% 甲酸)；30-50min, 35% 甲醇(含 O. 1% 甲酸)；60min 时,50% 甲醇(含O. 1%甲酸);70min时,60%甲醇(含O. 1%甲酸);80_90min，100%甲醇(含O. 1%甲酸)。质谱分析条件如下电喷雾离子源(ESI)，正离子电离；喷雾电压5500V;结束电压350 V ;干燥气流速10 L/min，干燥温度400°C ;氮气压力60psi ;扫描范围100 800 m/z。槲皮素-3-β -D-葡萄糖苷(离子峰时间为53. 8min)、异槲皮苷(离子峰时间为55. 6min)、芦丁(离子峰时间为55. 6min)、茴香苷(离子峰时间为59. 2min)、山奈酚_7_β -D-葡萄糖苷(离子峰时间为61. 9min)、槲皮苷(离子峰时间为62. 9min)、山奈酚-3-β-D-半乳糖苷(离子峰时间为67. 2min)和阿福豆苷(离子峰时间为68. 3min)。图3:花椒叶こ酸こ酯提取物的高效液相色谱质谱仪联用分析图谱。高效液相色谱分析条件如下0DS-2色谱柱(04. 6 X 150mm, 5 μ m);流速,O. 5ml/min ;柱温,25°C ;检测波长，280nm ;梯度洗脱液=Omin吋，5%甲醇(含O. 1%甲酸);IOmin吋,25%甲醇(含O. 1%甲酸)；20min 吋,30% 甲醇(含 O本文档来自技高网...

【技术保护点】
从花椒叶中提取抗氧化活性植物多酚的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）将干红花椒叶粉碎，平均粒度为300～500μm，按料液比1g∶10～30ml加入浓度50～100%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24～48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率为5～10%；（2）将上述甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为1g∶20～40ml，然后按体积比1∶2～5加入正己烷震荡萃取2～3次，收集水相萃取物；（3）将上述水相萃余物按体积比1∶2～5加入氯仿，震荡萃取2～3次，收集水相萃余物；（4）将上述步骤（3）中的水相萃余物按体积比1∶2～5加入乙酸乙酯，震荡萃取2～3次，收集乙酸乙酯相萃取物，浓缩干燥后得到红花椒叶中主要的植物多酚类组分，得率为4～10%。

【技术特征摘要】
1.从花椒叶中提取抗氧化活性植物多酚的方法，其特征在于该方法包括以下步骤 (1)将干红花椒叶粉碎，平均粒度为300 500μ m,按料液比Ig : 10 30ml加入浓度50 100%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24 48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率为5 10 % ； (2)将上述甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为Ig 20 40ml，然后按体积比I : 2 5加入正己烷震荡萃取2 3次，收集水相萃取物； (3)将上述水相萃余物按体...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟凯，黄毅娜，高鸿，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：