充分分离植物组织的方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了用于快速分离适于转化或组织培养的单子叶植物胚的方法和装置。本发明专利技术包括充分分离用作可转化外植体的植物胚的机械装置。本发明专利技术还提供适于分离植物胚的培养基及其制备方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般地涉及充分分离适于遗传转化或组织培养的目标植物组织，如胚。
技术介绍
制备用于植物繁殖、再生和转化的组织耗时费工，尤其是因为它通常包括手工切除可转化或可培养的植物组织。例如，在玉米(Zea mays)中，通常手工切除单个的未成熟胚以提供可遗传转化的外植体。胚性组织(embryogenic tissue)的手工切除费力，且具有对工人造成人体工程学损伤的风险。此外，当高通量的转化和植物生产需要较大量的可转化的植物组织时，必须雇用和培训更多的工人以满足增加的需求。此外，获得的植物组织的质量可以存在明显的差异，这取决于工人个人的技术水平、小心、注意力和疲劳程度。在分离可转化的植物组织的先前技术中，组织差异和缺乏自动化的可行性造成了问题，因为质量差的组织负面影响随后的组织培养、遗传转化和植物繁殖。然而，甚至为生产适于商业开发和农业使用的单个转基因植物，也可能有必要完成单一品种的数以万计的单个转化事件。因此，在本领域中非常需要改良的制备目标植物组织的方法，其更有效，减少工人的整体劳动负担，减少处理植物材料所需的劳动量，和/或其产生比手工生产的组织具有更高、更一致的质量的植物组织。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚的方法，包括：(a)将包括种皮和植物胚的植物种子组织置于水性环境中；(b)将所述组织与选择性地附着到胚或种皮的试剂接触；和(c)根据试剂对胚或种皮的选择性附着分离至少第一胚。

【技术特征摘要】
2007.08.31 US 60/969,2871.一种用于制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚的方法，包括 (a)将包括种皮和植物胚的植物种子组织置于水性环境中； (b)将所述组织与选择性地附着到胚或种皮的试剂接触；和 (c)根据试剂对胚或种皮的选择性附着分离至少第一胚。2.如权利要求I所述的方法，其中，所述试剂包括气泡。3.如权利要求2所述的方法，其中，所述气泡具有大约100微米至大约Imm的最大平均尺寸。4.如权利要求3所述的方法，其中，所述气泡包含选自空气、氧气、氮气及其组合的气体。5.如权利要求I所述的方法，其中，所述步骤(c)包括根据胚的浮力分离第一胚。6.如权利要求3所述的方法，包括在所述水性环境中包含减少气泡彼此之间的聚并的表面活性剂。7.如权利要求6所述的方法，其中，所述表面活性剂选自聚醚、PPG(聚(丙二醇))和PEG(聚(乙二醇))。8.如权利要求7所述的方法，其中，所述PPG具有大约340至大约3500道尔顿的分子量。9.如权利要求7所述的方法，其中，所述PEG具有大约100道尔顿至大约9000道尔顿的分子量。10.如权利要求I所述的方法，其中，所述试剂包括与所述水性环境不混溶的第二液体。11.如权利要求10所述的方法，其中，所述第二液体选自与胚的存活和转化相容的植物油、矿物油或其它疏水液体。12.如权利要求I所述的方法，其中，所述植物种子组织包括按照权利要求I所述的方法产生的胚。13.如权利要求I所述的方法，其中，所述水性环境基本上由包括水和/或具有大约OmOsm/kg至大约600m0sm/kg的摩尔渗透压浓度的渗透剂的培养基组成。14.如权利要求13所述的方法，其中，所述渗透剂选自甘露醇、山梨醇、葡萄糖和蔗糖。15.如权利要求14所述的方法，其中，所述培养基基本上由水和浓度为大约O.05M至大约O. 5M的甘露醇组成。16.如权利要求14所述的方法，其中，所述培养基基本上由水和浓度为大约O.05M至大约O. 5M的蔗糖组成。17.如权利要求I所述的方法，包括将植物种子组织置于所述水性环境中而不先分离胚和非胚组织。18.如权利要求I所述的方法，其中，所述植物种子组织是玉米植物种子组织、棉花植物种子组织或大豆植物种子组织。19.一种用于制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚组织的装置，包括 (a)用于保持包括多个植物胚的植物种子组织在水性环境中的容器；和 (b)用于向所述水性环境递送选择性地附着到胚的试剂的至少第一喷嘴，...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·R·阿达姆斯，B·达维斯，L·库彻尔，B·洛韦，B·玛尔蒂内尔，J·罗宇特，
申请(专利权)人：孟山都技术公司，
类型：发明
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