本发明专利技术涉及一种增强TRAIL敏感性的组合物，其含有用于抑制TIP41蛋白表达或活性的抑制剂。更具体地，已发现当用TIP41siRNA和TRAIL处理具有TRAIL抗性的肝癌细胞系后，诱导了癌细胞特异性的细胞凋亡，且不仅在肝癌中而且在具有TRAIL抗性的肺癌和结肠癌中均诱导了细胞凋亡，并且通过动物实验发现肿瘤的大小减小且癌细胞的细胞凋亡被诱导，由此诱导的细胞凋亡是由于抑制TIP41表达而激活MKK7/JNK传递途径导致的。因此，本发明专利技术含有用于抑制TIP41蛋白表达或活性的抑制剂的组合物可有效地用于预防和治疗癌症或作为抗癌助剂。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及含有TIP41表达或活性抑制剂的用于增强TRAIL敏感性的组合物。2.
技术介绍
癌症是对人类社会威胁最大的疾病；其由细胞系突变产生，细胞系突变导致这些细胞失控、无限分裂和永生。癌症的原因包括外部或环境因素如化学品、病毒、细菌和电离辐射，以及内部因素如先天性基因突变(Klaunig & Kamendulis,药理学与毒理学年评(Annu Rev Pharmacol Toxicol.)，44:239-267，2004)。早期发现癌症有可能通过手术、放射疗法和化学疗法治愈；但是它们的副作用也大大显现出来，晚期癌症和转移性癌症患者最后身患任何特别治疗都无法治愈的终期病患而结束生命。随之也发展出各种与癌症及其治疗有关的生化机理，至今还没有彻底治愈癌症的办法。TRAIL(TNF 相关的细胞凋亡诱导配体(TNF Related apoptosis InducingLigand))是与TNF(肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor))家族有关的细胞因子,其通过激活死亡受体途径作为诱导细胞凋亡的配体起作用。TRAIL有4种受体。其中已知DR4/5(死亡受体4/5)在癌细胞系中过表达，据报道DcR 1/2(诱捕受体1/2)存在于正常细胞系中。与其他受体不同，诱捕受体的C-末端没有死亡域，因此，死亡信号未传导到细胞内。因此，使用TRAIL进行癌症治疗被认为是对正常细胞无副作用的下一代抗癌剂。迄今为止研发的许多抗癌剂和抑癌剂已报道有副作用，如由于其非特异性而对正常细胞的临界细胞毒性，以及由于高突变率癌细胞系产生的获得性抵抗力。然而，由于1997年已报道TRAIL可诱导癌细胞而非正常细胞的细胞凋亡，TRAIL被认为是新抗癌药，其对癌细胞系具有特异性，也对其他对于癌症药物有抗性的癌细胞有特异性。但是，一些癌症，包括乳腺癌、前列腺癌、子宫癌、肺癌、肝癌和脑瘤表现出TRAIL抗性性，也有报道连续使用TRAIL处理癌细胞系导致癌细胞对TRAIL产生获得性抵抗力，甚至对于那些对TRAIL敏感的细胞来说，也是如此。TRAIL抗性机制可能是由于细胞内细胞凋亡信号转导的抑制而产生的，而由于诱捕受体的过表达，DR 4/5、DcR I和DcR 2，尤其是由于细胞内信号系统变化导致的抵抗力获得被认为是更加合理的解释。已知信号转导变化的主要原因是抗凋亡蛋白的过表达，这抑制了促凋亡蛋白的作用。因此，当前亟需的研究领域是开发通过克服TRAIL抗性来增加癌细胞系特异性细胞凋亡的TRAIL敏化剂。已报道TRAIL-介导的细胞死亡途径在如下疾病中起着重要的作用，包括风湿性关节炎、糖尿病性肾病和退行性脑病以及癌症(韩国风湿病学会杂志(Journal ofKorean Colledge of Rheumatology) 2005 年 6 月第 2 期，第 12 卷；J AM Sco Nephrol19:904-914(2008);细胞死亡和分化(Cell Death Differ.) 2003 年 I 月，10 (I) : 134-41)。因而很多方法采用TRAIL通过诱导过表达的免疫细胞的死亡来缓解和治疗自身免疫性疾病症状包括关节炎。因此，TRAIL不仅可有效地用于治疗上述各种癌症,也可有效用于治疗T细胞介导的自身免疫性疾病包括实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)、风湿性关节炎和I型糖尿病。TIP41基因，也称为TIPRL(T0R信号转导途径调控因子样(TOR Signaling PathwayRegulator-Like))，其首先分离自酵母。已知TIP41蛋白是TOR信号转导系统的负调控因子，其通过与TAP42蛋白相互作用而与雷帕霉素(rapamycin)反应(Jacinto E等人,分子细胞(Mol cell) 8 (5) :1017-26, 2001)。人TIP41基因与酵母TIP41具有37%同源性，已知其激活MAPK和NF- K B的信号转导系统(MatsudaA等人，致癌基因(Oncogene)，22 (21) : 3307-3318，2003)。与酵母Tip41不同，预期人TIP41激活细胞的增殖，至今未见报道人TIP41基因在关于肝癌、胃癌或癌症发生方面的作用。 因此，本专利技术人通过证明使用siRNA(小干扰RNA)对抗TIP41，通过TRAIL处理和TIP41消耗使得在TRAIL抗性癌细胞中的细胞凋亡显著增加，从而完成了该研究。另外，不仅在表现出TRAIL抗性的肝癌细胞中，也在表现出TRAIL抗性的肺癌细胞和结直肠癌细胞中观察到细胞凋亡的诱导。此外，其效果也通过注射了抗TIP41siRNA以及TRAIL的小鼠中肿瘤变小而证实。专利技术概述本专利技术提供含有TIP41蛋白表达或活性抑制剂的用于增强TRAIL敏感性的组合物。为实现该目的，本专利技术提供含有TIP41蛋白表达或活性抑制剂的用于增强TRAIL敏感性的组合物。本专利技术还提供含有TIP41蛋白表达或活性抑制剂的抗癌助剂。本专利技术还提供含有本专利技术抗癌助剂、用于预防和治疗癌症的组合物。本专利技术还提供预防或治疗癌症的组合物的筛选方法。本专利技术还提供增强癌症对TRAIL的敏感性的方法，其包括将药学上有效量的TIP41蛋白表达或活性抑制剂施用于患有TRAIL介导的细胞凋亡相关疾病的对象的步骤。本专利技术还提供预防癌症的方法，其包括将药学上有效量的TIP41蛋白表达或活性抑制剂施用于对象的步骤。本专利技术还提供治疗癌症的方法，其包括将药学上有效量的TIP41蛋白表达或活性抑制剂施用于罹患癌症的对象的步骤。本专利技术还提供TIP41蛋白表达或活性抑制剂，其用于在治疗TRAIL介导的细胞凋亡相关疾病期间增强TRAIL敏感性。此外，本专利技术提供用作抗癌助剂的TIP41蛋白表达或活性抑制剂。当用TIP41 SiRNA处理表现出TRAIL抗性的肝癌细胞系以抑制TIP41的表达后，用TRAIL处理，则诱导出癌细胞系的特异性细胞凋亡。同样的效果不仅在肝癌中、也在具有TRAIL抗性的肺癌和结肠癌中发现。另外，TIP41表达的消耗和TRAIL处理减小了注射有肿瘤细胞的裸鼠肿瘤大小。总之，本专利技术的含有TIP41表达或活性抑制剂的组合物可用于增强TRAIL敏感性或用作抗癌助剂。附图说明参照所附的附图可最佳地理解本专利技术优选实施方案的应用，其中图I显示TIP41在肝癌组织中表达增强，并证明了将TIP41siRNA转染至Huh7肝癌细胞系中然后用TRAIL处理，对TIP41的抑制图IA显示TIP41在肝癌组织中表达增强；图IB显示通过蛋白质印迹法(Western Blot)分析，不考虑HBV感染，与周围正常细胞中的TIP41相比，TIP41在肝癌组织中表达增强的水平； 图IC显示通过将TIP41 siRNA转染至Huh7肝癌细胞系中然后用TRAIL处理，对 TIP41表达的抑制；si-cont :对照组 siRNA ;和si-TIP41 :TIP41siRNA。图2所示确认了将TIP41 siRNA转染至Huh7肝癌细胞系中，然后用TRAIL处理，所诱导的癌细胞的细胞凋亡图2A所示为将TIP41 siRNA转染至Huh7肝癌细胞系中，然后以与时间相关的方式用TRAIL处理，通过核染色质染色法显示的癌细胞的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：金南顺，宋寅成，金哲熙，河佳喜，金晛宅，郑昭泳，金桢珉，金柱宪，金镇万，全修英，
申请(专利权)人：韩国生命工学研究院，
类型：
国别省市：
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