具有趋化活性的分泌蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术提供了趋化白细胞和肿瘤的SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的FAM19A5分泌蛋白，编码该蛋白的多核苷酸，及含有多核苷酸的基因工程载体。还涉及药物组合物，含有所述蛋白或多核苷酸、基因工程载体和/或宿主细胞，及药物可接受的盐、载体或赋形剂。还涉及体外检测所述蛋白或多核苷酸表达水平变化的方法。还有所述蛋白或多核苷酸能用于预防和/或治疗病毒感染、过敏疾病、炎症反应、移植排斥、脑部疾病、自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、干细胞增殖分化、骨质疏松症、肥胖和胰岛素抵抗、动脉硬化、血管钙化等心血管病，及用于商品化试剂研究上述病状。还涉及以所述蛋白或多核苷酸作为靶开发化合物、抗体、多肽药物和商品化试剂。

【技术实现步骤摘要】
具有趋化活性的分泌蛋白及其应用
本专利技术涉及基因工程领域，特别地，本专利技术涉及具有多种功能的蛋白及编码其的多核苷酸、包含多核苷酸的基因工程载体、以及相应的药物组合物，本专利技术还涉及所述蛋白和多核苷酸及其药物组合物的应用。
技术介绍
细胞因子是由机体各种细胞合成分泌的具有多种生理活性和参与病理反应的小分子可溶性蛋白质。趋化因子是一类具有趋化作用的细胞因子，在机体的病毒感染、过敏性疾病、炎症反应、移植排斥、脑部疾病、自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、干细胞增殖分化、骨质疏松症、肥胖和胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、血管钙化、心肌缺血-再灌注损伤、高血压、心衰等心血管疾病等过程中发挥重要作用。目前，趋化因子已经成为国内外研究的热点之一。人类基因组框架图完成10周年，目前的任务是阐明数以万计的基因及其产物的功能，深入认识疾病发生发展的相关基因和分子机理，发现疾病易感基因、抗病基因、药物敏感基因，发现新的药物作用靶点和新的生物技术药物。这些工作将花费远比基因序列分析更多的时间、更大的投入和更繁重的工作量，也更加具有挑战性。趋化因子超家族成员具有一定的同源结构，根据一级结构中保守的4、6个Cys的前2个Cys的排列方式，可将趋化因子超家族分为CXC、CC、C和CX3C四个亚家族，它们的功能除趋化活性外，还具有细胞活化等多种生物学效应。这些趋化因子与七次跨膜的G蛋白偶联受体特异结合，通过G蛋白转导信号至细胞内，发挥其生物学活性。迄今为止，大约50种趋化因子和20种趋化因子受体被发现，其中多种趋化因子可以通过同一趋化因子受体发挥趋化作用，同一趋化因子还可通过作用于几种趋化因子受体发挥趋化作用。近年来，免疫疗法发生了变化，从基础向临床的转化到药物开发成为更为重要的途径。通过描述免疫系统相关趋化因子及其配体如何组织在生理和病理活动中发挥作用，暗示趋化因子有强大的临床应用前景，可以用作免疫疗法的治疗靶或辅助治疗剂或主要疗法。本专利技术人利用人类功能基因组学数据库，生物信息学分析，分子生物学、细胞生物学及免疫学技术，从人类基因数据库中发掘具有重要生理、病理意义的新基因，为阐明疾病的发病机制、发现疾病标志物、基因组药物靶标(开发化合物、抗体、多肽药物)或基因工程药物提供基础。基因表达及其编码产物蛋白质表达的检测方法包括反转录-聚合酶链式反应、蛋白质印迹、ELISA、FACS、免疫荧光、免疫组化、免疫细胞化学等检测方法。可以应用于实验研究以及临床生理和病理疾病(病毒感染、过敏性疾病、炎症反应、移植排斥、脑部疾病、自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、干细胞增殖分化、骨质疏松症、肥胖和胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、血管钙化、心肌缺血-再灌注损伤、高血压、心衰等心血管疾病)中细胞和组织的基因表达及其编码产物蛋白质表达的检测。具有重要生理、病理意义的基因及其编码产物蛋白质，可以作为药物靶标，开发靶向这一分子本身及其相互作用分子的化合物、抗体、多肽药物或基因工程药物和商品化试剂，应用于发病机制研究，疾病标志物的研究和临床检测，及研究和临床的药物的治疗。
技术实现思路
利用生物信息学技术，本专利技术从新基因中首次成功地筛选出了新的具有趋化活性的细胞因子，即FAM19A5(Familywithsequencesimilarity19，memberA5)，其核酸序列在Gen-bankTM的注册登记号为BC039396.1；NM_001082967.1；NM_015381.5。其中，BC039396.1、NM_001082967.1和NM_015381.5分别编码114、132和125个氨基酸，在体外具有趋化活性。本专利技术经蛋白表达、纯化、N端测序和趋化功能检测的实验证明FAM19A5具有趋化活性的分泌蛋白为其C端89个氨基酸序列。本专利技术还包括在FAM19A5的基础上陆续得到的其它一些新的蛋白。本专利技术在一方面提供了一种具有趋化活性的蛋白。本专利技术在另一方面提供了一种编码本专利技术的蛋白的多核苷酸。本专利技术在另一方面提供了一种含有本专利技术的多核苷酸的基因工程载体。本专利技术在另一方面提供了一种药物组合物，该药物组合物含有本专利技术的蛋白、多核苷酸和/或基因工程载体，以及一种或多种药物可接受的盐或药学上可接受的载体或赋形剂。本专利技术在另一方面提供了本专利技术的蛋白或多核苷酸在制备预防和/或治疗病毒感染、过敏性疾病、炎症反应、移植排斥、脑部疾病、自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、干细胞增殖分化、骨质疏松症、肥胖和胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、血管钙化、心肌缺血-再灌注损伤、高血压、心衰等心血管疾病的药物中的应用。本专利技术在另一方面提供了检测待测样品中本专利技术的蛋白或多核苷酸的表达水平是否变化的方法。本专利技术在另一方面了本专利技术的蛋白或多核苷酸在制备商品化试剂研究病毒感染、过敏性疾病、炎症反应、移植排斥、脑部疾病、自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、干细胞增殖分化、骨质疏松症、肥胖和胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、血管钙化、心肌缺血-再灌注损伤、高血压、心衰等心血管疾病的应用。本专利技术在另一方面提供了以本专利技术的蛋白或多核苷酸或本专利技术蛋白的相互作用分子作为靶开发化合物、抗体、多肽药物和商品化试剂的应用。根据本专利技术的一些实施方式，本专利技术提供一种蛋白，该蛋白包含：(1)如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列的蛋白；或(2)具有(1)所述蛋白至少80％同源性的氨基酸序列，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同的生物学功能。其中，如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列的蛋白，为FAM19A5蛋白的C末端89个氨基酸序列(FAM19A5蛋白的核酸序列在Gen-bankTM的注册登记号为BC039396.1；NM_001082967.1；NM_015381.5)；在本专利技术中称为FAM19A5分泌蛋白。本专利技术蛋白还包括具有与SEQIDNO：1所示氨基酸序列至少80％，优选至少85％，更为优选至少90％，更进一步优选至少95％，特别优选至少98％，更为特别优选至少99％同源性(序列匹配)的序列。这些序列可以与本专利技术的SEQIDNO：1所示的序列具有相同、相似或不同的生物学功能，优选具有相同或相似的功能。在本专利技术的一些优选实施方式中，本专利技术的蛋白为：(1)如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列的蛋白；或(2)具有(1)所述蛋白至少90％同源性的氨基酸序列，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同的生物学功能。再者，根据本专利技术的一些实施方式，本专利技术还提供一种多核苷酸，该多核苷酸包含：(1)编码SEQIDNO：1所示氨基酸序列的多核苷酸；或(2)具有(1)所述多核苷酸至少80％同源性的多核苷酸序列，其编码的蛋白与(1)所述多核苷酸编码的蛋白具有相同或相似或不同的生物学功能。如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列为FAM19A5分泌蛋白89个氨基酸序列。本专利技术的多核苷酸序列可以只编码FAM19A5分泌蛋白，也可以在上述蛋白的编码序列的基础上，增加非编码序列，例如内含子、编码序列5′或3′端的非编码序列等。本专利技术的多核苷酸序列最好是以分离形式提供的。本专利技术的多核苷酸是“分离”形式的，其不仅已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开，而且已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来。在本专利技术的一些实施方式中，本专利技术还包括具有与编码FAM19A5分泌蛋白或其片段的多核本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白，其包含：(1)具有SEQ？ID？NO：1所示氨基酸序列的蛋白；或(2)具有(1)所述蛋白至少80％同源性的氨基酸序列，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同的生物学功能。

【技术特征摘要】
2011.05.12 CN 201110122213.81.一种蛋白，其由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列组成。2.一种多核苷酸或其互补序列，其中所述多核苷酸编码的蛋白为权利要求1所述的蛋白。3.一种基因工程载体，其含有权利要求2所述的多核苷酸。4.一种药物组合物，其含有权利要求1所述的蛋白、编码所述蛋白的多核苷酸和/或含有所述多核苷酸的基因工程载体，以及一种或多种药物可接受的盐或药学上可接受的载体或...

【专利技术属性】
技术研发人员：王应，马大龙，张焱，郑奕，郭嫦媛，张文娟，张颖妹，王平章，郭帅，石太平，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：