本发明专利技术公开了一种CS和PEG联合修饰的OA纳米脂质体的制备方法，包括：A、将OA、SPC和Chol溶解于无水乙醇中，搅拌得到油相；B、将PEG和CS溶液加入到水化介质PBS缓冲液中，搅拌得到水相；C、将油相逐滴滴入水相中，得到脂质悬液；D、去除脂质悬液中的无水乙醇，并进行超声粉碎得到小单层脂质体；E、置于4℃保存。本发明专利技术还公开了一种CS和PEG联合修饰的OA纳米脂质体。本发明专利技术的纳米脂质体分散性好、形态规整、包封率较高，能够发挥其小尺度、大吸收面效应，从而更显著地提高药物的生物利用度。另外，本发明专利技术可在常温常压及温和的条件下完成，工艺简单，反应易于控制，得到的脂质体包封率较高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于纳米药物
，特别涉及一种。
技术介绍
OA (Oleanolic Acid，齐墩果酸)是一种天然五环三萜类化合物，广泛存在于多种植物中。OA可以降低转氨酶活性、促进肝细胞再生、降低血糖、缓解肥胖相关的胰岛素抗性和高血脂的效果，并还具有很好的抗肿瘤效果。由于其对机体没有毒副作用，因此具有较好的开发前景。但OA在水中溶解度极低，体内吸收和生物利用存在一些问题，故其用药量大，用药次数频繁，这些均限制了其药理作用的充分发挥。药物的吸收效率除了受自身性质影响外，还取决于药物颗粒尺寸、形貌、分散性及表面状态等。由于传统药物低吸收、新陈代谢和降解等因素的影响使药物作用于病变部位的浓度过小，给药时水相的药物溶解度低，这些都影响了药物在靶向部位发挥作用。与常规的药物相比，纳米药物具有颗粒小、表面反应活性高、活性中心多及吸附能力强等优点。此夕卜，纳米药物可在保证药效的前提下减少用药量，减轻或消除药物的毒副作用；对于水溶性较差的口服药物，减少药物颗粒尺寸，可增加其比表面积，从而显著提高药物的溶出速率和生物利用度；被包裹的纳米药物可实现其缓释效果，延长其在机体内的循环时间，减少给药次数，提高药效和安全性。在纳米药物系统中，脂质体是目前最好的药物载体之一，适合于小分子药物、肽、蛋白和核酸。它通过包封、结合防止生物消除作用的保护膜或保护基团形成转移靶向，从而实现纳米粒靶器官、靶组织或靶细胞所要求的选择性。纳米脂质体经口服给药可以增加渗透性和稳定性。它具有较高的载药量，容易穿透血管而不引起血管内皮损伤，保护药物免受胃酸和酶的破坏，药物在体内局部聚集浓度高，从而能提高疗效，并降低药物毒副作用；纳米脂质体能增加其在肠道上皮细胞的吸附，延长吸收时间，提高药物靶向性。脂质体的制备方法有很多种，主要有主动载药法和被动载药法，主动载药法包括pH梯度法、硫酸铵梯度法和醋酸钙梯度法；被动载药法有薄膜分散法、超声分散法、冷冻干燥法、冻融法、复乳法、注入法、逆向蒸发法、超临界法。由于普通的脂质体存在稳定性差、靶向性不强等缺陷，而脂质体的表面修饰提高了其靶向性、稳定性，实现了体内作用时间的延长。目前，修饰脂质体的方法有壳聚糖及衍生物、半乳糖、聚乙烯醇和不同分子量的聚乙二醇(PEG)。壳聚糖是一种天然的带正电荷的多糖，它具有亲水性、生物适应性、生物降解性和低毒性等特点。利用壳聚糖修饰脂质体，提高了药物的缓释性，增加了脂质体的稳定性和药物的靶向性，同时能够通过与带负电的细胞膜相互作用，促进亲水性大分子药物的吸收，降低阳离子脂质体的毒性。聚乙二醇与水分子结合力极强，柔性大，毒性低。聚乙二醇修饰能实现化合物的循环半衰期延长和理化稳定性增强。由壳聚糖和PEG共同修饰脂质体膜表面可以综合发挥两者的功效，使其减少脂质体与血浆中调理成分的结合，增加了亲水性，延长了其在体内的作用时间，提高了其在体内外的稳定性。但是，通过现有的制备方法制备出来的脂质体尺寸较大、分散性不好、包封率较低，从而造成药物的生物利用度低。
技术实现思路
(一)要解决的技术问题 本专利技术要解决的技术问题是提供一种，以克服现有技术的齐墩果酸脂质体中药物的生物利用度低的缺陷。(二)技术方案 为了达到上述目的，本专利技术提供了一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体，齐墩果酸包封于所述纳米脂质体的双层膜之间，并采用壳聚糖和聚乙二醇联合修饰， 所述齐墩果酸与聚乙二醇的质量比为I: I. 5,所述壳聚糖与聚乙二醇的质量比为I: 1.5。其中，所述纳米脂质体为圆球状结构。其中，所述纳米脂质体大小均一。本专利技术还提供了一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体的制备方法，所述方法包括以下步骤 A、将齐墩果酸、大豆卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，搅拌得到均一的油相；其中所述齐墩果酸与胆固醇的质量百分比浓度为I: 2，所述齐墩果酸与大豆卵磷脂的质量比为1:10 1:20，所述无水乙醇的体积占所述油相的10-40% ； B、将聚乙二醇和壳聚糖溶液加入到35-45°C的水化介质磷酸盐缓冲液中，搅拌得到水相； C、将所述油相逐滴滴入水相中，得到脂质悬液； D、去除所述脂质悬液中的无水乙醇，并进行超声粉碎得到小单层脂质体； E、在常温下放置一段时间，置于4°C保存。其中，在所述步骤A和步骤B中，采用恒温磁力搅拌，其中恒温温度为35_55°C，在步骤A中搅拌的转速控制在300-700 r/min，在步骤B中搅拌的转速控制在50-300 r/min。其中，在所述步骤B中，所述聚乙二醇与步骤A中的齐墩果酸的质量比为1.5:1。其中，在所述步骤B中，所述磷酸盐缓冲液的pH值为6. 5。其中，在所述步骤B中，所述壳聚糖溶液为将壳聚糖溶解于浓度为O. 1-0. 5%的乙酸溶液中得到的溶液，所述壳聚糖与聚乙二醇的质量比为I: 1.5。其中，在所述步骤D中，去除所述脂质悬液中的无水乙醇的方法为将脂质悬液中的无水乙醇旋蒸去除或搅拌足够的时间去除。其中，在所述步骤D中，进行超声粉碎得到小单层脂质体的方法为采用细胞超声粉碎机进行3-10 min的超声粉碎。(三)有益效果 通过本专利技术的制备方法得到的壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体分散性好、形态规整、包封率较高，能够发挥其小尺度、大吸收面效应，从而更显著地提高药物的生物利用度。另外，本专利技术可在常温常压及温和的条件下完成，工艺简单，反应易于控制，得到的脂质体包封率较高。附图说明图I是本专利技术实施例的一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体的制备方法的流程 图2a和图2b是本专利技术实施例的修饰的齐墩果酸纳米脂质体电镜照片 图3是本专利技术的CS和PEG联合修饰的OA纳米脂质体和OA原药对Hela细胞的存活率随药物浓度的变化影响示意 图4是本专利技术实施例对CS和PEG存在的红外光谱检测波形图。具体实施方式 下面结合附图和实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。本专利技术采用改进的乙醇注入法结合超声分散法，考察了配方因素(0A与大豆卵磷脂的配比，OA与胆固醇的比以及OA与PEG-2000的配比)和制备工艺因素(制备中的水化温度和水化介质的PH以及超声时间)，通过正交试验法及单因素变量法选出最优配方。本专利技术具体的一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体的制备方法如图I所示，包括以下步骤 步骤SlOl，将齐墩果酸、大豆卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，搅拌得到均一的油相；其中所述齐墩果酸与胆固醇的质量百分比浓度为I: 2，所述齐墩果酸与大豆卵磷脂的质量比为l:l(Tl:20，所述无水乙醇的体积占所述总体系的10-40%。本步骤中可以采用恒温磁力搅拌，恒温温度是35-55°C，转速控制在300-700 r/min。步骤sl02，将聚乙二醇和壳聚糖溶液加入到35_45°C的水化介质磷酸盐缓冲液中，搅拌得到水相。本步骤中，所述聚乙二醇与步骤SlOl中的齐墩果酸的质量比为1.5:1，所述壳聚糖与聚乙二醇的质量比为I: I. 5，所述磷酸盐缓冲液的pH值为6. 5，并采用恒温磁力搅拌，恒温温度是35-55°C，转速控制在50-300 r/min。步骤sl03,将所述油相逐滴滴入水相中，得到脂质悬液本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体，其特征在于，齐墩果酸包封于所述纳米脂质体的双层膜之间，并采用壳聚糖和聚乙二醇联合修饰，所述齐墩果酸与聚乙二醇的质量比为1:？1.5，所述壳聚糖与聚乙二醇的质量比为1:？1.5。
【技术特征摘要】
1.一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体，其特征在于，齐墩果酸包封于所述纳米脂质体的双层膜之间，并采用壳聚糖和聚乙二醇联合修饰，所述齐墩果酸与聚乙二醇的质量比为I: I. 5，所述壳聚糖与聚乙二醇的质量比为I: 1.5。2.根据权利要求I所述的壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体，其特征在于，所述纳米脂质体为圆球状结构。3.根据权利要求I或2所述的壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体，其特征在于，所述纳米脂质体大小均一。4.一种壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤 A、将齐墩果酸、大豆卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，搅拌得到均一的油相；其中所述齐墩果酸与胆固醇的质量百分比浓度为I: 2，所述齐墩果酸与大豆卵磷脂的质量比为I: l(Tl: 20，所述无水乙醇的体积占所述总体系的10-40% ； B、将聚乙二醇和壳聚糖溶液加入到35-45°C的水化介质磷酸盐缓冲液中，搅拌得到水相； C、将所述油相逐滴滴入水相中，得到脂质悬液； D、去除所述脂质悬液中的无水乙醇，并进行超声粉碎得到小单层脂质体； E、在常温下放置一段时间，置于4°C保存。5.根据权利要求4所述的壳聚糖和聚乙二醇联合修饰的齐墩果酸纳米脂质体的制备方法，其特征在于，在...
【专利技术属性】
技术研发人员：高大威，汤胜楠，段金婷，
申请(专利权)人：燕山大学，
类型：发明
国别省市：
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