本发明专利技术涉及用于保存、灌注和/或再灌注用于移植的器官特别是心脏的溶液。该溶液包含蛋白激酶CβII（PKCβII）和/或蛋白激酶Cζ(PKCζ)的肽抑制剂和/或蛋白激酶Cδ(PKCδ)的肽激活物。也公开了使用本发明专利技术的溶液的用途，包括用于保存移植用的器官、用于保护局部缺血的器官免受损伤、用于减轻局部缺血后器官的功能障碍、用于在局部缺血的器官中维持一氧化氮的释放和/或抑制过氧化释放以及用于当从循环系统分离时保护器官免受损伤的用途。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及用于保存、灌注和/或再灌注 用于移植的器官特别是心脏的溶液。该溶液包含蛋白激酶CP II (PKC￠11)和/或蛋白激酶C 4 (PKC ^ )的肽抑制剂和/或蛋白激酶C 6 (PKC 6 )的肽激活物。
技术介绍
成功的器官移植通常因局部缺血/再灌注损伤的原因而受到限制。缺氧超过4小时的分离的人的心脏逐渐失去活力且通常在受体宿主中不能存活。其他器官例如肾、肝脏、胰腺和肺，当在移植前从其宿主中取出时，也遭受组织和细胞损伤。该损伤是由于低氧状态和缺乏循环造成的，所述循环通常递送生理浓度的氧和营养物和清除由器官的细胞产生的毒性化合物。当从其宿主切取后立即进行移植时，器官移植具有更高的成功率。近年来的进步已増加了成功的器官移植和器官手术例如冠状动脉旁路手术的比例。首先包括器官保存和器官灌注液。第二是用于递送器官灌注液至器官的改进的方法和装置。目前通过在心脏停搏后冷冻贮藏来提供短期心肌保护。存在多种方法，然而它们的差异在于所用溶液的组成、保存温度和施用方案。已发展了用于使心脏停跳和保存心脏的不同溶液以在心脏手术中保护心肌。这些溶液的实例包括克-汉ニ氏溶液(Krebs-Henseleit solution)、Uff 溶液、St. Thomas II 溶液、Collins 溶液和 Stanford 溶液。(參见，例如，美国专利 Nos. 4，798，824 和 4，938，961; Southard和 Belzer, Ann. Rev. Med. 46: 235-247 (1995);以及 Donnelly 和 Djuric, Am. J. Hosp.Pharm. 48:2444-2460 (1991))。然而，由于在取出的时间和在受体中恢复血流的时间之间移植的器官的状况恶化的原因，器官排异反应仍然存在。血流的恢复是在例如移植期间治疗经历长时间局部缺血的器官组织的首要目的。然而，血流的再灌注引起内皮和肌细胞损伤，从而导致器官功能障碍(Buerke等人，細I Physiol 266:H128-136, 1994;Lucchesi 和 Mullane, Ann Rev Pharmacol Toxicol26:2011-2024，1986;和 Lucches i 等人，J MoI Cell Cardiol 21:1241-1251,1989)。与再灌注损伤相关的系列事件由特征在于再灌注后前2. 5-5分钟内的基底内皮细胞释放ー氧化氮(NO)的下降的内皮功能障碍引发(Tsao和Lefer, Am J Phyiol259:H1660-1666, 1990)。内皮细胞产生的NO的减少与内皮细胞膜和多形核(PMN)白细胞膜上的粘附分子上调相关(Ma等人，Circ Res 72:403-412，1993;和Weyr i ch等人，JLeuko Biol 57:45-55, 1995)。该事件促进了再灌注后10至20分钟之内发生的PMN/内皮相互作用，且再灌注后30分钟内观察到随后的PMN至心肌的浸润(Lefer和Hayward，In TheRole of Nitric Oxide in Ischemia-Reperfusion Contemporary しaraiology, Loscalzo等人(Ed s. ), Humana Press, Totowa, NJ, pp. 357-380，2000;Lefer 和 Lefer, CardiovascRes 32:743-751, 1996; Ts ao 等人，Circulation 82. 1402-1412，1990;和 Weyrich 等人，JLeuko Biol 57:45-55， 1995)。从再灌注组织释放的趋化物质和血浆因子激活PMN，这促进了 PMN在局部缺血/再灌注后释放细胞毒性物质(即过氧化物阴离子)并促成了器官功能障碍(Lucchesi等人 J Mol Cell Cardiol 21:1241-1251，1989;Ma等人，Circ Res 69:95-106，1991;Tsao 等人，Circulation 82:1402-1412，1990;和 Tsao 等人，Am Heart J123:1464-1471，1992)。过氧化物结合NO以产生过硝酸盐阴离子，从而減少了 NO的生物利用度和在心肌局部缺血/再灌注后促进内皮功能障碍和PMN浸润(Clancey 等人，J Clin Invest 90:1116-1121, 1992; Hansen, Circulation 91:1872-85，1995; Lucches i 等人，J Mol Cell Cardiol21:1241-1251，1989;Rubanyi 和 Vanhoutte, Am J Physiol 250:H815_821, 1986;Tsao 等人，Am Heart J123:1464-1471，1992;和 Weiss, New Eng J Med 320:365-375，1989)。因此，存在对提高的质量的溶液的需要，该溶液可延长用于移植的器官的保存时间和保护器官免受局部缺血后再灌注损伤，从而使器官可在血流恢复后重新开始适当的功倉^:。专利技术概述本专利技术提供了用于器官特别是心脏的保存、灌注和/或再灌注的溶液，其包含蛋白激酶CP II (PKCPII)和/或蛋白激酶C 4 (PKC ^ )的肽抑制剂和/或蛋白激酶CS (PKC 6 )的肽激活物。当从循环系统分离器官或器官经历減少的血流(局部缺血)吋，所述溶液保护所述器官组织和细胞免受损伤。本专利技术者已发现蛋白激酶CP II和/或蛋白激酶C (的肽抑制剂和/或蛋白激酶C S (PKC 6 )的肽激活物増加NO释放或抑制内皮/PMN过氧化物释放，这可在经历局部缺血/再灌注的器官中产生保护效应。在一个实施方案中，所述溶液包含溶解在盐溶液中的大约5-10 ii M PKCP II的肽抑制剂和/或大约2. 5-5 u M PKC ^的肽抑制剂和/或5-10 U M PKC 6的肽激活物。本专利技术的溶液可用作灌注液或保存液。作为灌注液，将其灌注入器官的脉管系统以保护所述器官组织和细胞。作为保存液，其用作将器官浸没于其中的浴液。优选地，用本溶液灌注器官并将器官浸没在其中。此外，当局部缺血后对器官恢复血流时，本专利技术的溶液也用作再灌注溶液。本专利技术也包括使用本专利技术的溶液的方法。这些方法包括用于保存移植用的器官、用于保护局部缺血的器官免受损伤、用于在局部缺血后减轻器官功能障碍、用于维持局部缺血的器官中的一氧化氮的释放和用于当从循环系统分离时保护器官免受损伤的方法。附图概述图I.假手术、I/R、I/R+PMN和I/R+PMN+PKC4肽抑制剂(5 y M)灌注的大鼠心脏中的LVDP (左心室形成压=左心室收缩末期压-左心室舒张末期压)的时程。开始时(基线)和局部缺血20分钟后0至45分钟的再灌注时的LVDP数据。假手术组(n=6)在整个80分钟的方案中保持相同的LVDP。I/R(n=6)组恢复至初始基线值。I/R+PMN组(n=6)，与I/R+PMN+PKC ^肽抑制剂(n=6)组相比，表示显著的和持续的LVDP的減少。所有值都表示为平本文档来自技高网...
【技术保护点】
用于器官保存用的灌注、保存和/或再灌注的溶液，其包含蛋白激酶Cζ(PKCζ)的至少一种肽抑制剂。
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：L·H·扬，
申请(专利权)人：整骨疗法费城医学院，
类型：发明
国别省市：
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