本发明专利技术涉及分子标记，其遗传地连接至黄瓜植物(Cucumis?sativus?L.)中的基因座，并能鉴定该基因座，该基因组赋予对烟草花叶病毒一般抗性，特别是对两个在商业上重要的致病烟草花叶病毒(即，黄瓜绿斑点花叶病毒(CGMMV)和黄瓜果实斑点花叶病毒(CFMMV))的抗性。本发明专利技术还涉及用于向黄瓜植物(Cucumis?sativus?L.)、植物、植物部分和果实提供对烟草花叶病毒，尤其是对两个商业上重要的致病烟草花叶病毒，即黄瓜绿斑点花叶病毒(CGMMV)和黄瓜果实斑点花叶病毒(CFMMV)的抗性的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及ー种抗黄瓜脉黄化病毒(CVYV)黄瓜植物(⑶CUMIS SATIVUS L.)，提供抗黄瓜脉黄化病毒(CVYV)黄瓜植物(⑶CUMIS SATIVUS L.)的方法，分子标记在该方法中的用途，和植物，植物部位，组织，细胞和/或衍生自或来自本专利技术抗黄瓜脉黄化病毒(CVYV)的黄瓜植物(CUCUMIS SATIVUSL.)的种子。
技术介绍
黄瓜植物，即Cucumis sativus种的植株,属于葫芦科的瓜，葫芦科也包括像甜瓜和笋瓜(squashes)这样的家族成员。该植物可食用果实通常被称为黄瓜。黄瓜通常是圆柱形、绿皮果实，其包括大约96%的水。黄瓜植物很早就被种植了，也命名为Cucumis sativus L.,是ー种世界上重要的园艺作物。黄瓜一般在未成熟的时期即被收获，且被用在腌菜行业或新鲜市场中。黄瓜脉黄化病毒(Cucumber Vein Yellowing Virus)缩写为CVYV,属于马铃薯Y病毒(Potyviridae)科甘薯病毒(Ipomovirus)属。它是杆形且是ー种相当不稳定的颗粒，通常是740-800nm长、15_18nm宽。据报道CVYV的病毒核酸由双链核糖核酸組成。该病毒的宿主范围窄，宿主主要限定在葫芦科的植物。该科包括重要的经济作物如，黄瓜，笋瓜(包括南瓜)，甜瓜和西瓜。尽管通常CVYV感染是黄瓜产量的主要问题，但笋瓜，福禄瓜(zucchini),西瓜和甜瓜产量也会受影响。CVYV通常是通过烟粉虱(Bremisia tabaci)传播。CVYV感染的植物一般出现叶脉黄化或脉明病(vein clearing)及具有明显的产量下降的发育障碍。CVYV感染也能引起植物死亡。因此，CVYV对已经感染的作物能有灾难性的影响。预防感染通常是昂贵和/或不利于环境，所述预防感染通过例如在无粉虱的环境下培育幼苗，或者例如用杀虫剂处理。此夕卜，这些方法不总是达到满意的效果。黄瓜绿斑点花叶病毒(CucumberGreen Mottle Mosaic Virus),也缩写为 CGMMV,是ー种引起葫芦科严重疾病的烟草花叶病毒属的RNA病毒。CGMMV株系最先由英国和欧洲报道。该病毒出现在所有组织中，并且该病毒迅速在工人手中、服装、刀和其他设备上传播，且加上病毒是种子带菌的。种子的热处理通常用来控制病毒污染。CGMMV还能够通过地表水传播。叶片变黄、长斑、向下卷曲的症状已被报导，但也许最重要的是减轻重度的果实长斑和变形的报道。果实的这种长斑和变形能够迅速使受感染的作物滞销。黄瓜绿斑点花叶病毒也许是感染黄瓜作物最广泛和最有名的烟草花叶病毒。在黄瓜生产区域如荷兰、西班牙、希腊和印度，CGMMV是ー个全球性的问题。产量损失可能为15%。黄瓜果实斑点花叶病毒(CucumberFruit Mottle Mosaic Virus),缩写 CFMMV,是烟草花叶病毒组能引起黄瓜植物重要经济损失的另ー个家庭成员。黄瓜果实斑点花叶病毒(CFMMV)感染的症状，通常最先发现在相对增进生长阶段的果实和叶尖。叶子的症状包括严重的花斑，脉结病和黄斑。有时，完全发育的植物会出现严重的萎蔫致使植物虚弱。温室内病毒快速传播可导致显著的产量降低。
技术实现思路
考虑黄瓜植物(Cucumis sativus L.)中因黄瓜脉黄化病毒(CVYV)引起的经济损失，在其它目的中，本专利技术的目的是提供抗黄瓜脉黄化病毒(CVYV)的黄瓜植物(Cucumissativus L.)。继而，在其它目的中，本专利技术的目的提供用于提供抗黄瓜脉黄化病毒(CVYV)的黄 瓜植物(Cucumis sativus L.)的方法和途径。上述目的，在其它目的中，通过本专利技术附加的权利要求I中所述方法实现。尤其是，上述目的，在其它目的中，通过本专利技术用于提供黄瓜脉黄化病毒(或CVYV)抗性黄瓜植物,或者黄瓜(Cucumis sativus L.)的方法来实现,该方法包含b)选择第一黄瓜植物(Cucumis sativus L.),其中所述选择包括通过以下确定赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分的存在以所述第一黄瓜植物(Cucumissativus L.)的基因组为模板，在分子扩增片段长度多态性(AFLP)分析中，利用分子扩增片段长度多态性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No :2，检测245至247碱基对核酸扩增片段，优选246碱基对核酸扩增片段；c)转移鉴定的赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分到第二黄瓜植物(Cucumis sativus L.)中，由此赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性到所述第二黄瓜植物(Cucumis sativusL.),其中所述转移包括，以所述第二黄瓜植物(Cucumis sativusL.)的基因组为模板，在分子扩增片段长度多态性(AFLP)分析中，使用分子扩增片段长度多态性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No :2，检测245至247碱基对核酸扩增片段，优选246碱基对核酸扩增片段。具体实施例方式根据本专利技术，引物SEQ ID NO 1包括核酸序列5' -GAC TGC GTA CCA ATT CGT-3'和引物SEQ ID No 2包括核酸序列5' -GAT GAG TCC TGA GTA ACA C-3'显示存在赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分的本专利技术的核酸扩增片段，在本领域中通常被指定作为扩增片段长度多态性(AFLP)标记(所述标记遗传地连接到本专利技术的赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分上)，及在本文中可互換地指定为含245到247碱基对核酸，优选246碱基对核酸的标记E22/M48-F-246。本专利技术245至247碱基对的核酸扩增片段，优选246碱基对的核酸扩增片段，及由此本专利技术的赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分，可利用任何适合植物基因组材料的扩增技术，如PCR，来鉴定或检测。在ー个具体的优选实施例中，本专利技术245至247碱基对的核酸扩增片段，优选246碱基对的核酸扩增片段，及由此本专利技术的赋予黄瓜脉黄化病毒(CVYV)抗性的遗传成分，可利用本领域指定的核酸扩增技术如分子扩增片段长度多态性来鉴定或检测(ALFP，Vos,P.，Hogers, R，Bleeker，M.，等人，1995. AFLP anew technique for DNA fingerprinting.Nucleic Acids Research23 (21) :4407-4414 ;Zabeau, M 和 P.Vos. 1993。Selectiverestriction fragment amplification a general method for DNA fingerprinting,欧洲专利局，欧洲公开0 534 858A1)。扩增片段长度多态性(AmplifiedFragment Length Polymorphism,AFLP)是一种以聚合酶链反应(PCR)为基础的基因指纹技术，其早在二十世纪90年代初由荷兰Keygene开发。简言之，AFLP用限制性内切酶来消化基因组DNA，然后将互补的双链衔接子连接到限制片段末端。然后限制片段的子集利本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
【专利技术属性】
技术研发人员：亚普·马泽利乌，布莱特·凡·坎彭，罗纳尔多·威尔特丁克，南内·法贝尔，
申请(专利权)人：安莎种子公司，
类型：发明
国别省市：
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