本发明专利技术公开了一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐Ⅲ的方法，属于食品生物加工技术领域。本发明专利技术基于高静水压对某些食品酶的稳定与激活效应，将双果糖酐Ⅲ生物酶催化反应体系置于高静水压处理设备中，在60℃-80℃的条件下，施加100-300MPa的压力，处理20-60min后卸压，沸水浴灭酶，菊糖果糖转移酶的催化效率提高了20%-50%。本发明专利技术方法利用非热加工技术来高效生物合成双果糖酐Ⅲ，具有节能、绿色、环保、安全、成本低等特点，可满足工业化生产要求，经济效益和市场前景广阔。
【技术实现步骤摘要】
一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法，属于食品生物加工
技术介绍
双果糖酐III(Difrucose anhydride III)是ー种由两个果糖结合的非还原性双糖，其相对甜度为蔗糖的一半，而热量值却只有蔗糖的1/15。双果糖酐III还具有良好的生理功能，不仅可以促进钙的吸收，增进骨骼生长，而且可促进肠道益生菌的生长，利于排尿，改 善便秘等。双果糖酐III作为ー种新型功能性添加剤，市场需求量较大，可应用于糖果、饮料、焙烤食品和医药制剂中，前景广阔。双果糖酐III生物合成受酶用量、酶活性、反应条件等因素的调控，若提高加酶量必会増加生产成本，因此从反应条件方面来研究，提高酶的催化效率就很有意义。高静水压技术是将样品密封在容器内，以水作为传压介质，在常温或稍高于常温下进行100-300MPa的加压处理，維持一定的时间后，不仅使得食品酶、蛋白质和淀粉等生物大分子改变活性，还能改变微生物细胞的膜结构和性能。然而，目前对高静水压加工食品的研究报道主要集中在新鲜果蔬制品、水产品、肉制品等预包装液态或固态食品的杀菌和钝酶等方面，至今未见利用高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III相关报道。基于上述原因，本专利技术对一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法进行了详细研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法，通过高静水压的稳定和激酶效应，提高生物酶的催化效率，从而达到双果糖酐III高效生物合成的目的。本专利技术的技术方案一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法，操作步骤如下采用IOOmM pH 5. 5-6. 5的缓冲液(醋酸钠缓冲液或磷酸钠缓冲液)配制质量分数为2%-10%的菊糖溶液，添加2-5U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，在60-80°C条件下，施加100-300MPa的压力，处理20-60min后卸压，沸水浴灭酶。所述的高静水压联合生物酶催化处理后使菊糖果糖转移酶的催化效率提高了20%-50%。双果糖III含量检测方法HPLC检测条件糖柱(Waters Sugur-Pak 1,6. 5 X 300mm);流动相，超纯水；示差折光检测器(Shodex RI 101);柱温，80°C ;流速，0.4mL/min ;进样量，10 u し本专利技术的有益效果采用本专利技术的方法制备双果糖酐III可减少酶用量、缩短酶反应时间、缩短生产周期、降低生产成本。具体实施例方式下面以具体实施例对本专利技术进行进一步的说明。实施例I IOOmM pH6. 5的磷酸钠缓冲液配制10%的菊糖溶液，添加3U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，混合均匀。将此酶解反应体系进行密封处理后送入高静水压处理设备中，压カ200MPa，反应温度为80°C，保压60min后卸压。沸水浴灭酶后采用高效液相的方法測定双果糖III的生成量，计算Imin平均产双果糖酐III I. 38 u moL/mL,与常压对照0. 96 u moL/mL相比,酶的催化效率提高了 43. 75%。 实施例2 IOOmM pH5. 5的醋酸钠缓冲液配制8%的菊糖溶液，添加5U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，混合均匀。将此酶解反应体系进行密封处理后送入高静水压处理设备中，压カlOOMPa，反应温度为60°C，保压30min后卸压。沸水浴灭酶后采用高效液相的方法測定双果糖III的生成量，计算Imin平均产双果糖酐III I. 69 ii moL/mL,与常压对照I. 31 ii moL/mL相比,酶的催化效率提闻了 29.01%。实施例3 IOOmM pH6. 0的磷酸钠缓冲液配制2%的菊糖溶液，添加2U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，混合均匀。将此酶解反应体系进行密封处理后送入高静水压处理设备中，压カ300MPa，反应温度为70°C，保压20min后卸压。沸水浴灭酶后采用高效液相的方法測定双果糖III的生成量，计算Imin平均产双果糖酐III I. 28 u moL/mL,与常压对照I. 04 y moL/mL相比，酶的催化效率提高了 23. 07%。本文所描述的具体实施案例仅作为对本专利技术精神和部分实验做举例说明。本专利技术所述领域的技术人员可以对所描述的具体实施案例做出各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本专利技术的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。权利要求1.一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法，其特征在于操作步骤如下，采用IOOmM pH 5. 5-6. 5的醋酸钠缓冲液或磷酸钠缓冲液配制质量分数为2%_10%的菊糖溶液，添加2-5U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，在60-80°C条件下，施加100-300MPa的压力，处理20-60min后卸压，沸水浴灭酶。2.根据权利要求I所述ー种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐III的方法，其特征在干，高静水压联合生物酶催化处理后使菊糖果糖转移酶的催化效率提高了 20%-50%。全文摘要本专利技术公开了，属于食品生物加工
本专利技术基于高静水压对某些食品酶的稳定与激活效应，将双果糖酐Ⅲ生物酶催化反应体系置于高静水压处理设备中，在60℃-80℃的条件下，施加100-300MPa的压力，处理20-60min后卸压，沸水浴灭酶，菊糖果糖转移酶的催化效率提高了20%-50%。本专利技术方法利用非热加工技术来高效生物合成双果糖酐Ⅲ，具有节能、绿色、环保、安全、成本低等特点，可满足工业化生产要求，经济效益和市场前景广阔。文档编号C12P19/18GK102747122SQ20121025015公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月19日 优先权日2012年7月19日专利技术者刘苗, 江波, 缪铭 申请人:江南大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高静水压联合生物酶催化高效合成双果糖酐Ⅲ的方法，其特征在于操作步骤如下，采用100mM？pH？5.5？6.5的醋酸钠缓冲液或磷酸钠缓冲液配制质量分数为2%？10%的菊糖溶液，添加2？5U/g菊糖的菊糖果糖转移酶，在60？80℃条件下，施加100？300MPa的压力，处理20？60min后卸压，沸水浴灭酶。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：江波，缪铭，刘苗，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
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