本发明专利技术公开了一株枯草芽孢杆菌及其应用。本发明专利技术所提供的枯草芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）BLG010，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC?No.5953。本发明专利技术的枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）BLG010CGMCC?No.5953在低浓度下能够有效抑制香尖孢镰刀菌的生长，对香蕉枯萎病的防治具有重要意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株枯草芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
香蕉枯萎病是由尖孢铼刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense)侵染引起的一种毁灭性病害，是香蕉生产的毁灭性土传病害。病原菌从受伤的根茎侵入，通过維管束向假茎及叶部蔓延，堵塞木质部导管，直至植株枯萎死亡。香蕉枯萎病菌是土壤习居菌，其厚垣孢子能够在土壌中存活8 10年。目前对枯萎病的防治还没有一种有效的化学农药，而且长期使用化学农药对环境 和人类健康造成严重威胁。与化学防治法相比，利用拮抗菌防治植物病害具有对环境友好、成本低、病原菌不易产生抗药性等优点，是未来病害防治的方向。尽管人们已经发现了大量拮抗细菌，但目前所分离到的细菌还远不能满足农业生产发展的要求。芽孢杆菌能产生耐热、抗逆的芽抱，有利于菌剂的生产、剂型加工及在环境中存活、定殖与繁殖。国内外已有生防芽孢杆菌用于防治豆类、麦类、棉花和花生等根部病害及防治蔬菜、樱桃、葡萄、葫芦和胡桃的细菌和真菌等叶部病害的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的ー个技术问题是提供ー株枯草芽孢杆菌。本专利技术所提供的枯草芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No. 5953。该 菌种已于2012年04月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCOo本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLGOlO在营养琼脂(NA)培养基上呈乳脂色不透明，表面干燥，有皱褶突起，边缘不整齐。显微镜下单个菌体呈杆状，两端钝圆，革兰氏染色后，染色均匀，并可见细胞中被染成蓝紫色芽孢。本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供ー种杀菌剂。本专利技术所提供的杀菌剂，它的活性成分是上述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) BLGOIOo所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLGOlO具体可为分生孢子或/和菌丝体。所述杀菌剂具体可用于防治由尖孢铼刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp. cubense)引起的植物病害。所述植物病害具体可为香蕉枯萎病。本专利技术所要解决的再一个技术问题是提供一种防治香蕉枯萎病的方法。本专利技术所提供的防治香蕉枯萎病的方法，包括采用I X 108cfu/mL的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010CGMCC No. 5953菌悬液浇灌香蕉苗基部的步骤。实验证明，以lX108cfu/mL的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLGOlOCGMCCNo. 5953菌悬液浇灌香蕉苗基部，对香蕉枯萎病的防病效果达81. 4%。本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010CGMCC No. 5953在低浓度下能够有效抑制香尖孢铼刀菌的生长，对香蕉枯萎病的防治具有重要意义。菌种名称枯草芽孢杆菌拉丁名Bacillussubtilis菌株编号BLG010保藏机构中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称CGMCC地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号 保藏日期2012年04月06日保藏中心登记入册编号CGMCC No. 5953下面结合具体实施例详细描述本专利技术，这些实施例用于理解而不是限制本专利技术。附图说明图I 为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010CGMCC No. 5953 发酵滤液对尖孢铼刀菌古巴专化型4号小种(F0C4)菌丝抑制作用。A 为未加入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010CGMCC No. 5953 发酵滤液的PDA上的尖孢铼刀菌古巴专化型4号小种(F0C4)菌丝。B 为加入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010CGMCC No. 5953 发酵滤液的PDA上的尖孢铼刀菌古巴专化型4号小种(F0C4)菌丝。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的NA培养液牛肉浸膏0. 3%，酵母浸膏0. 1%，蛋白胨0. 5%，葡萄糖I.0%，用蒸馏水定容至IOOOmL ;其pH7. O。其中的百分含量均为质量百分含量。下述实施例中的NA培养基是在上述NA培养液中加入琼脂得到的固体培养基。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的保护范围。实施例I、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010的分离及鉴定I、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) BLG010 的分离从中国海南省香蕉种植地选择枯萎病重发田中发病田块的香蕉植株，采集根部土样。把土壤样本风干，过筛后称取IOg放入装有90mL无菌水和玻璃珠的三角瓶中，充分振荡，静置IOmin后，按梯度浓度法稀至I X 10'I X 10'IX 1(T5。各梯度稀释液于80°C水浴加热20min，取IOOul涂布于营养琼脂(NA)分离培养基上。30°C恒温培养2d，根据菌落顔色、形态、干湿度、透明度、边缘等特征挑取有代表性的单菌落纯化，纯化后经革兰氏染色和芽孢染色，菌体杆状、产芽孢等特征选取芽抱杆菌转入NA斜面培养基保存，作为待测菌株。拮抗初筛、复筛拮抗菌制备尖孢铼刀菌古巴专化型4号小种(F0C4)孢子液(约2.0X105个/mL)，以培养基的1/1000比例吸取孢子悬浮液至PDA培养基混匀后倒至四方形大板。均匀点接待测菌，28°C下培养4天，观察有无抑菌圏。复筛时，在培养4天的香蕉枯萎病菌的菌落边缘打取直径为5mm的菌块，将其移至空白PDA平板中央。然后在距中心5cm处划直线接种供试拮抗细菌。每皿接种2个供试菌株，以只接种指示菌作为对照28°C培养6d。连续观察记录各拮抗菌菌落长度、宽度及抑菌带宽度，重复4次，最终计算抑制率。最终得到枯草芽孢杆菌(BaciIIus subtilis) BLGO10。2、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) BLG010 的鉴定(I)形态学鉴定 将分离纯化到的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) BLG010菌株接种于NA培养基上，30°C培养48h，观察菌落形态。另取培养48h的菌落，适当稀释后于显微镜下观察。结果显示枯草芽孢杆菌(BaciIIus subtilis)BLG010菌株在NA培养基上呈乳脂色不透明，表面干燥，有皱褶突起，边缘不整齐。显微镜下单个菌体呈杆状，两端钝圆，革兰氏染色后，染色均匀，并可见细胞中被染成蓝紫色芽抱。(2)分子鉴定枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) BLG010的16S rDNA全序列如序列表中的序列I所示，全长为1429bp。枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) BLG010已于2012年04月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No. 5953。实施例2、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLG010CGM本文档来自技高网...
【技术保护点】
枯草芽孢杆菌（Bacillus？subtilis），其特征在于：所述枯草芽孢杆菌（Bacillus？subtilis）的菌株号为BLG010，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC？No.5953。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄俊生，梁昌聪，朱利林，王国芬，刘磊，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：
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