一种梨多酚提取方法技术

本发明专利技术涉及植物活性物质提取、加工领域，涉及一种梨多酚提取方法。该方法是将梨幼果去皮去核，切成小于1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；用30%~90%的乙醇溶液对梨果进行浸提，浸提样品和溶液的质量体积比为1:20~30，用恒温摇床避光、50℃~70℃、100~170rpm匀速浸提，每次浸提时间为2~6小时，用离心机离心分离出上清液即为梨多酚提取液。本发明专利技术使用液氮研磨使得提取过程处于低温状态，避免了梨多酚在研磨过程中发生氧化反应，提高多酚的活性。本发明专利技术在提取过程中使用恒温摇床匀速浸提，利于样品和提取溶剂充分接触，提取率比恒温水浴提高5%-17%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物活性物质提取、加工领域，涉及，具体涉及一种利用溶剂法从梨幼果中提取植物多酚的方法。
技术介绍
植物多酚是广泛存在于植物体内的重要次生代谢产物，具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏等多种生理功能(2007)。植物多酚在粮食、蔬菜中含量较少，但在水果及谷物皮层中含量较高(2000)。梨是我国第三大水果，面积和产量仅次于苹果和柑橘。由于其含有多种如熊果苷、绿原酸、香草醛等多酚类物质(2004，2011)，因此具有一定的抗氧化保健功能。研究表明虽然在成熟梨果实中这些多酚物质存在的相对浓度不是很高，但梨幼果却含有十分丰富的多酚类物质(2004，2009)。在生产中，由于生理落果或疏花疏果等栽培管理的需要，大 量梨幼果被遗弃，在一定程度上造成了多酚类生物资源的浪费，而如何回收利用这些生物资源的关键在于如何高效地提取分析这些多酚类物质，但关于梨幼果中多酚类物质高效提取方法的研究还未有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以梨幼果为原料，通过溶剂法获得梨多酚的提取工艺。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现，梨幼果去皮去核，切成小于Icm3的小块，用液氮研磨成粉末；用309^90%的乙醇溶液对梨果进行浸提，浸提样品和溶液的质量体积比为1:2(T30，用恒温摇床避光、50°C 70°C、10(Tl70rpm匀速浸提，每次浸提时间为2飞小时，用离心机离心分离出上清液即为梨多酚提取液。所述的梨多酚提取方法，优选用40%飞0%的乙醇溶液对梨果进行浸提。所述的梨多酚提取方法，恒温摇床的振荡速率优选为10(Tl50rpm。所述的梨多酚提取方法，所述的浸提时间优选2 4小时。所述的梨多酚提取方法，梨幼果指落花后广2个月的梨果实。按照本专利技术方法获得的梨多酚提取液中多酚含量为75mg/100g 147mg/100g。此外，利用高效液相色谱法对本专利技术获得的多酚物质进行鉴定，以熊果苷、没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、香草醛、阿魏酸、芦丁、根皮苷、槲皮素等11种色谱纯对照品做标准品，以甲醇和水混合溶剂做洗脱剂，根据峰面积定性定量分析提取物中有效成分，从而评价提取多酚的品质。标准品的色谱出峰图谱如图I所示，熊果苷的出峰时间为6. 8分钟左右，没食子酸的出峰时间为7. 3分钟左右，儿茶素的出峰时间为9. 6分钟左右，绿原酸的出峰时间为10. I分钟左右，表儿茶素的出峰时间为11. 0分钟左右，咖啡酸的出峰时间为11. 5分钟左右，香草醛的出峰时间为12. 7分钟左右，阿魏酸的出峰时间为13. 5分钟左右，芦丁出峰时间为14. 4分钟左右，根皮苷出峰时间为15. 4分钟左右，槲皮素出峰时间为21. 8分钟左右，样品的色谱出峰图谱见图2。本专利技术的有益效果I、采用液氮研磨样品，可以使样品磨得更细、更充分，使提取率增加。2、液氮研磨使得提取过程处于低温状态，避免了梨多酚在研磨过程中发生氧化反应，提高多酚的活性。3、提取过程使用恒温摇床匀速浸提，利于样品和提取溶剂充分接触，提取率比恒温水浴提高5%-17%。附图说明图I为标准品的色谱出峰图谱 I为熊果苷，出峰时间约为6. 8分钟；2为没食子酸，出峰时间约为7. 3分钟；3为儿茶素，出峰时间约为9. 6分钟；4为绿原酸，出峰时间约为10. I分钟；5为表儿茶素，出峰时间约为11. 0分钟；6为咖啡酸，出峰时间约为11. 5分钟；7为香草醛，出峰时间约为12. 7分钟；8为阿魏酸，出峰时间约为13. 5分钟；9为芦丁，出峰时间约为14. 4分钟；10为根皮苷，出峰时间约为15. 4分钟；11为槲皮素，出峰时间约为21. 8分钟。图2为样品的色谱出峰图谱I为熊果苷,2为没食子酸,3为儿茶素,4为绿原酸,5为表儿茶素,6为咖啡酸,7为香草醛，8为阿魏酸，9为芦丁。具体实施例方式实施例I :选取健康的梨幼果，去皮，去核，切成小于Icm3小块，用液氮速冻研磨成粉末，加入40%的乙醇溶液，样品和溶液质量体积比为1:20，用恒温摇床IOOrpm 50°C浸提2小时(避光)，离心机离心分离出梨多酚提取液，FC法测定多酚含量为75mg/100g。对比例I :其他条件同实施例1，仅将恒温摇床浸提改为相同温度下的恒温水浴浸提，所获得的梨多酚提取液多酚含量为71mg/100g。实施例2 选取健康的梨幼果，去皮，去核，切成小于Icm3小块，用液氮速冻研磨成粉末，加入50%的乙醇溶液，样品和溶液质量体积比为1:30，用恒温摇床120rpm 50°C浸提3小时(避光)，离心机离心分离出梨多酚提取液，FC法测定多酚含量为90mg/100g。对比例2 其他条件同实施例2，仅将恒温摇床浸提改为相同温度下的恒温水浴浸提，所获得的梨多酚提取液多酚含量为77mg/100g。实施例3 选取健康的梨幼果，去皮，去核，切成小于Icm3小块，用液氮速冻研磨成粉末，加入50%的乙醇溶液，样品和溶液质量体积比为1:20，用恒温摇床150rpm 60°C浸提4小时(避光)，离心机离心分离出梨多酚提取液，FC法测定多酚含量为104mg/100g。对比例3 其他条件同实施例3，仅将恒温摇床浸提改为相同温度下的恒温水浴浸提，所获得的梨多酚提取液多酚含量为83mg/100g。实施例4 选取健康的梨幼果，去皮，去核，切成小于Icm3小块，用液氮速冻研磨成粉末，加入60%的乙醇溶液，样品和溶液质量体积比为1:30，用恒温摇床130rpm 60°C浸提2小时(避光)，离心机离心分离出梨多酚提取液，FC法测定多酚含量为124mg/100g。对比例4:其他条件同实施例4，仅将恒温摇床浸提改为相同温度下的恒温水浴浸提，所获得的梨多酚提取液多酚含量为105mg/100g。实施例5 选取健康的梨幼果，去皮，去核，切成小于Icm3小块，用液氮速冻研磨成粉末，力口A 60%的乙醇溶液，样品和溶液质量体积比为1:30，用恒温摇床150rpm70°C浸提2小时(避光)，离心机离心分离出梨多酚提取液，FC法测定多酚含量为147mg/100g。对比例5 其他条件同实施例5，仅将恒温摇床浸提改为相同温度下的恒温水浴浸提，所获得的梨多酚提取液多酚含量为122mg/100g。实施例6 :梨多酚提取物的定量定性分析本实验采用的仪器高效液相色谱仪Watersl525。高效液相色谱分析条件色谱柱，C18柱150mmX4. 6mm, 05 u m ;流动相，甲醇和水;柱温，30°C ;流速，0. 6mL mirT1 ;进样量，51^;紫外检测器，波长28011111。流动相A:水，用磷酸调pH3.2;B:甲醇。线性梯度淋洗程序，时间(min) /B (%) :0/2，3/2，4/25，11/50，16/80，26/80，30/2，35/2。标样熊果苷、没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、香草醛、阿魏酸、芦丁、根皮苷、槲皮素11种标准品购自Sigma公司，均为色谱纯。标准品制备精确称取标准品，用50%甲醇溶液配置为0. 005mg/ml、0. 025mg/ml、0.0625mg/ml、0. 125mg/ml、0. 25mg/ml、0. 5mg/ml 浓度梯度，过 0. 45 ii m 滤膜，待上机用。样品制备取实施例5中离心分离出的提取液30ml用旋转蒸发仪蒸干，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种梨多酚提取方法，其特征在于梨幼果去皮去核，切成小于1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；用30%~90%的乙醇溶液对梨果进行浸提，浸提样品和溶液的质量体积比为1:20~30，用恒温摇床避光、50℃~70℃、100~170rpm匀速浸提，每次浸提时间为2~6小时，用离心机离心分离出上清液即为梨多酚提取液。

【技术特征摘要】
1.一种梨多酚提取方法，其特征在于梨幼果去皮去核，切成小于Icm3的小块，用液氮研磨成粉末；用309^90%的乙醇溶液对梨果进行浸提，浸提样品和溶液的质量体积比为I 20 30，用恒温摇床避光、50°C 70°C、10(Tl70rpm匀速浸提，每次浸提时间为2 6小时，用离心机离心分离出上清液即为梨多酚提取液。2.根据权利要求I所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶书田，赵梅，张绍铃，齐开杰，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：