蛋白质药物制剂制造技术

本发明专利技术提供了一种液体药物制剂，其包含治疗性蛋白质、表面活性剂和至少一种选自自由基清除剂、螯合剂或链终止剂的抗氧化剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】蛋白质药物制剂本专利技术提供了一种液体药物制剂，其包含治疗性蛋白质、表面活性剂和至少一种选自自由基清除剂、螯合剂或链终止剂的抗氧化剂。常用的其中涉及界面相互作用的方法和条件如过滤泵送搅动(filtrationpumping agitation)(例如振摇或搅拌)、冷冻/融化以及冷冻干燥可导致聚集。聚山梨酯是一类重要的非离子表面活性剂，其广泛用在蛋白质药物中以稳定蛋白质避免界面诱导的聚集和使蛋白质的表面吸附最小化(Wang W 2005.生物药剂学中的蛋白质聚集及其抑制(Protein aggregation and its inhibition in biopharmaceutics). Int J Pharm289(1-2) :1-30)。由于其在保护许多蛋白质中有效，聚山梨酯普遍存在于蛋白质制剂中。事实上，特别是对于单克隆抗体(Mab)，超过70%的市售制剂含有聚山梨酯20或聚山梨酯80 (PS20或PS80)。聚山梨酯的广泛使用是由于其具有高HLB数、低CMC值，并且因此在低浓度下具有非常有效的表面活性。聚山梨酯稳定蛋白质的作用机理被认为是基于它们的表面活性，并且因此基于它们的与蛋白质竞争性的在界面处的相互作用，但是尚未发现CMC 本身是主要参数。从聚山梨酯本身与表面例如过滤器相互作用这一事实，聚山梨酯对表面的高亲和力是显然的。聚山梨酯是由聚氧乙烯(POE)失水山梨醇的脂肪酸酯组成的两亲性非离子表面活性剂。市售可得的聚山梨酯是主要含有失水山梨醇POE脂肪酸酯的化学上种类不同的混合物。另外，存在大量的Ρ0Ε、失水山梨醇POE和异山梨醇POE脂肪酸酯。已知聚山梨酯易于被自氧化作用和水解作用降解。尽管有当前关于聚山梨酯降解的知识水平(Kerwin BA 2008.在蛋白质生物治疗药物的制剂中使用的聚山梨酯20和80 :结构和降解途径(Polysorbates 20and 80used in the formulation of protein biotherapeutics Structure and degradation pathways). J Pharm Sci 97(8) :2924-2935),胃肠外蛋白质制剂中使用的聚山梨酯的命运促使人们进行更周密的研究，以理解该时间过程以及在药学相关条件下的降解机理。这是尤其恰当的，因为关于降解的聚山梨酯物质对蛋白质稳定性的相互作用或影响了解不多。已知原料形式的和水溶液形式的聚山梨酯均随时间推移通过两种机理进行降解a)水解；b)自氧化。聚山梨酯的降解(a)通过不再稳定蛋白质、并且从而具有反面影响或(b)由于随时间推移不溶性降解产物(其可能在产品中以“颗粒”形式出现)累积而可能对产品质量具有潜在影响。因此，需要至少部分克服现有技术的蛋白质药物制剂的缺点的蛋白质药物制剂。本专利技术的一个目的是提供一种液体药物制剂，其包含蛋白质、表面活性剂和至少一种选自自由基清除剂、螯合剂或链终止剂的抗氧化剂。本专利技术的另一个目的是提供至少一种选自自由基清除剂、螯合剂或链终止剂的抗氧化剂用于防止包含蛋白质的液体药物制剂中的表面活性剂降解的用途。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述至少一种抗氧化剂选自自由基清除剂。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述自由基清除剂选自抗坏血酸、BHT、BHA、亚硫酸钠、对氨基苯甲酸、谷胱甘肽和掊酸丙酯。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述蛋白质是治疗性蛋白质，优选是抗体，更优选是单克隆抗体。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述螯合剂选自EDTA和朽1檬酸。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述链终止剂选自蛋氨酸、山梨醇、乙醇和N-乙酰半胱氨酸。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述表面活性剂选自聚山梨酯和泊洛沙姆。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述聚山梨酯是聚山梨酯20或聚山梨酯80。附图简要说明·图IA显示了在三个不同温度下历经6个月的储存时间聚山梨酯20制剂中过氧化物含量的增加，图IB显示了在三个不同温度下历经6个月的储存时间聚山梨酯80制剂中过氧化物含量的增加，图2A显示了用HPLC/ELSD方法测得的历经6个月的储存时间聚山梨酯20的聚山梨酯浓度的下降，图2B显示了用HPLC/ELSD方法测得的历经6个月的储存时间聚山梨酯80的聚山梨酯浓度的下降，图3A显示了在存在和不存在BHT/EDTA/蛋氨酸的情况下PS20的聚山梨酯浓度。赋形剂是P1 =聚山梨酯，P2 =聚山梨酯+ΒΗΤ，P3 =聚山梨酯+EDTA，P4 =聚山梨酯+蛋氨酸，图3B显示了在存在和不存在BHT/EDTA/蛋氨酸的情况下PS80的聚山梨酯浓度。赋形剂是P1 =聚山梨酯，P2 =聚山梨酯+ΒΗΤ，P3 =聚山梨酯+EDTA，P4 =聚山梨酯+蛋氨酸，图4显示了在存在或不存在各种用于防止聚山梨酯降解的赋形剂的情况下故意降解的聚山梨酯20的结果。本文所用的术语“药物制剂”(或“制剂”)意指例如要施用于需要其的哺乳动物(例如人)的含有治疗有效量的活性药物成分(例如多肽或抗体)以及药学上可接受的赋形剂的混合物或溶液。本文所用的术语“多肽”指氨基酸的聚合物，但不指特定的长度。因此，在多肽的定义内包括肽、寡肽和蛋白质片段。术语“抗体”包括各种形式的抗体结构，包括但不限于完整抗体和抗体片段。本专利技术的抗体优选是人源化抗体、嵌合抗体或其它遗传工程抗体，只要保留本专利技术的特征性性质即可。“抗体片段”包括全长抗体的一部分，优选其可变结构域或至少其抗原结合部位。抗体片段的实例包括双抗体、单链抗体分子和由抗体片段形成的多特异性抗体。例如在Houston, J. S. , Methods in Enzymol. 203 (1991) 46-96)中描述了 scFv 抗体。本文所用的术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体制剂”指单一氨基酸组成的抗体分子制备物。术语“嵌合抗体”指包含来自于一个来源或物种的可变区(即，结合区)和源自不同来源或物种的恒定区的至少一部分的抗体，其通常是用重组DNA技术制备的。优选包含鼠可变区和人恒定区的嵌合抗体。本专利技术包括的其它优选的“嵌合抗体”形式是其中恒定区已经由原抗体的恒定区被修饰或改变以产生本专利技术的性质(尤其是在Clq结合和/或Fe受体(FcR)结合方面)的那些。所述嵌合抗体也称为“类别转换抗体”。嵌合抗体是包含编码免疫球蛋白可变区的DNA片段和编码免疫球蛋白恒定区的DNA节段的被表达的免疫球蛋白基因的产物。制备嵌合抗体的方法包括常规重组DNA和基因转染技术，是本领域公知的。参见例如 Morrison，S. L.等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 (1984) 6851-6855 ;美国专利No. 5，202，238 和 5，204，244。本文所用的术语“人抗体”用于包括具有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。人抗体在现有技术中是公知的(van Dijk, M. A.和van de ffinkel,J. G. , Curr.Opin.Chem. Biol. 5 (2001) 368-374)。人抗体也可在转基因动物(例如小鼠)中产生，所述转基因动物经免疫接种能在不存在内源性免疫球蛋白产生的情况下产生人抗体的所有组成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.01.19 EP 10151021.21.一种液体药物制剂，其包含蛋白质、表面活性剂和至少一种选自自由基清除剂、螯合剂或链终止剂的抗氧化剂。2.权利要求I的液体药物制剂，其中所述至少一种抗氧化剂选自自由基清除剂。3.权利要求2的液体药物制剂，其中所述自由基清除剂选自抗坏血酸、BHT、BHA、亚硫酸钠、对氨基苯甲酸、谷胱甘肽和掊酸丙酯。4.权利要求1-3的液体药物制剂，其中所述蛋白质是治疗性蛋白质，优选是抗体，更优选是单克隆抗体。5.权利要求1-4的液体药物制剂，其中所述螯合剂选自EDTA和柠檬酸。6.权利要求1-5的液体药物制剂，其中所述链终止剂选自蛋氨酸、山梨醇、乙醇和N-乙酰半胱氨酸。7.权利要求1-7的液体药物制剂，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯和泊洛沙姆。8.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：HC·马勒，S·K·K·拉乌里，
申请(专利权)人：弗·哈夫曼拉罗切有限公司，
类型：发明
国别省市：