针对呼吸道疾病的组合疫苗制造技术

将流感、肺炎球菌和/或RSV疫苗作为组合疫苗给予，同时维持免疫效力。该组合简化了针对这两种下呼吸道感染的免疫接种。肺炎球菌疫苗理想上包括至少一种肺炎球菌多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于针对下和/或上呼吸道疾病的免疫接种领域。
技术介绍
已知同时对对象施用不同的呼吸道疫苗，例如同时施用肺炎球菌疫苗和流感病毒疫苗(例如参考文献1-4)。也已知将两种或更多疫苗作为组合物施用的组合疫苗，例如参考文献5组合了(偶联或未偶联的)肺炎球菌糖和呼吸道合胞病毒(RSV)抗原，还推测可加入许多其它抗原，例如流感病毒抗原。文献6公开了 RSV的融合(F)、附着(G)和基质(M)蛋白与流感疫苗的组合。文献7公开了基于施用质粒的针对甲型流感病毒和RSV的组合疫苗。·本专利技术的一个目的是简化针对下和/或上呼吸道疾病的免疫接种。
技术实现思路
虽然参考文献1-4 (和很多其它文献)已经同时施用了独立的流感和肺炎球菌疫苗，本专利技术人发现这类疫苗可作为组合疫苗施用，同时仍保留其免疫效力。虽然参考文献5包括了 RSV抗原，本专利技术人提供了一种不必要包含RSV组分的流感和肺炎球菌疫苗组合。另夕卜，与参考文献5相反，专利技术人优选包括肺炎球菌蛋白抗原，而不是仅依赖于肺炎球菌糖抗原。而且，纳入肺炎球菌免疫原(包括蛋白和/或糖组分)可改善参考文献6和7的疫苗。这些发现意味着可简化和改良针对这些不同下呼吸道感染的免疫接种。组合流感和肺炎球菌疫苗并非无关紧要。虽然现有肺炎球菌疫苗(例如PREVNAR 和SYNFL0RIX 产品)具有固定的组成，而且常年随时施用，流感疫苗组成随季节变化，在冬季开始时施用。因此，这两种疫苗先天不相容，但是专利技术人证明组合是可行的。因此，本专利技术提供了一种包含流感病毒免疫原和肺炎球菌免疫原的免疫原性组合物。这些组合物适用于同时针对流感病毒和肺炎球菌的免疫接种。肺炎球菌免疫原通常包含至少一种肺炎球菌多肽。所述组合物可包含RSV免疫原，但在一些实施方式中组合物不包括RSV免疫原。本专利技术还提供了一种免疫原性组合物，其包含(i)包含至少一种肺炎球菌多肽的肺炎球菌免疫原和(ii)流感病毒免疫原和/或RSV免疫原。在一些实施方式中，所述组合物不包括RSV免疫原，在一些实施方式中所述组合物不包括流感病毒免疫原，但在一些实施方式中它包括两种RSV免疫原和流感病毒免疫原。本专利技术还提供了制备免疫原性组合物的方法，包括步骤混合流感病毒免疫原和肺炎球菌免疫原。肺炎球菌免疫原通常包含至少一种肺炎球菌多肽。所述免疫原性组合物可以是不包括RSV免疫原的组合物。本专利技术还提供了制备免疫原性组合物的方法，包括步骤将包含至少一种肺炎球菌多肽的肺炎球菌免疫原和RSV免疫原与流感病毒免疫原中的一种或两种混合。当所述组合物包含所有3种肺炎球菌免疫原、RSV免疫原和流感病毒免疫原时，这些组分可以任意顺序混合。本专利技术的这些方法可提供具有0. 5ml单位剂量体积的组合物。本专利技术的组合物还适用于针对B族链球菌(无乳链球菌(Streptococcusagalactiae) ；GBS)的其它免疫接种。因此，在一些实施方式中，所述组合物还包括GBS免疫原，例如流感、肺炎球菌和GBS免疫原(含或不含RSV免疫原)的组合。本专利技术的方法包括步骤混合GBS免疫原与(i)流感病毒免疫原，(ii)肺炎球菌免疫原，(iii)RSV免疫原，和/或(iv)流感病毒免疫原、肺炎球菌免疫原和RSV免疫原中的任意I、2、或3种的混合物。流感病毒免疫原流感病毒免疫原可以采用各种形式。流感疫苗通常基于活病毒或灭活的病毒，本 专利技术优选使用灭活病毒作为流感免疫原。灭活病毒可基于全病毒颗粒、裂解病毒颗粒或纯化的表面抗原(包括血凝素，通常也包括神经氨酸酶)。可用于本专利技术的另一类流感病毒免疫原是病毒体。本专利技术还可用重组血凝素和/或神经氨酸酶糖蛋白作为流感病毒免疫原。另一种有用的流感病毒免疫原类型是M2基质蛋白。本专利技术可使用活的减毒疫苗，但通常仅和活的减毒RSV疫苗联用。为了制备灭活的病毒免疫原，灭活病毒的化学方法包括用有效量的以下一种或多种试剂处理去污剂、甲醛、丙内酯、亚甲基蓝、亚甲蓝、补骨脂素、羧基富勒烯(C60)、二元乙基胺、乙酰基乙烯亚胺或其组合。本领域已知病毒灭活的非化学方法，例如UV射线或Y射线辐射。可通过各种方法由含病毒液体收获病毒颗粒。例如，纯化方法可包括用含有去污剂以破坏病毒颗粒的线性蔗糖梯度溶液进行区带离心。任选稀释后，可通过渗滤纯化抗原。用去污剂处理纯化的病毒颗粒获得裂解病毒颗粒，产生亚病毒颗粒制剂，包括“吐温-醚”裂解法。裂解流感病毒的方法是本领域熟知的，例如参见参考文献8-13等。一般使用破坏浓度的裂解剂破坏或片段化全病毒来裂解病毒，无论该病毒有无感染性。这种破坏导致病毒蛋白的完全或部分溶解，改变病毒的完整性。优选的裂解剂是非离子型和离子型(例如阳离子)表面活性剂，如乙醚、脱氧胆酸盐、三正丁基磷酸、TergitolNP9、烷基糖苷、烷基硫苷、酰基糖、磺基甜菜碱、甜菜碱、聚氧乙烯烷基醚、N，N- 二烷基-葡糖酰胺、Hecameg、烷基苯氧基-聚乙氧基乙醇、季铵化合物、肌氨酰、CTAB (溴化十六烷基三甲铵，例如塞塔隆(Cetavlon)、三正丁基磷酸酯、十四烧基三甲铵盐、Iipofectin(脂质体转染试剂)、Iipofectamine (脂质体转染胺试剂)和D0TMA、辛基-或壬基苯氧基聚氧乙醇(如曲通表面活性剂，如曲通XlOO或曲通N101)、聚氧乙烯去水山梨糖醇酯(吐温表面活性剂，例如聚山梨醇酯80)、聚氧乙烯醚、聚氧乙烯酯等。一种有用的裂解方法利用脱氧胆酸钠和甲醛的连续作用，并且裂解可在病毒颗粒初始纯化期间(例如在蔗糖密度梯度溶液中)进行。因此，裂解过程可包括澄清含病毒颗粒的物质(以去除非病毒颗粒物质)，浓缩收获的病毒颗粒(例如使用吸附方法，如CaHPO4吸附)，从非病毒颗粒材料分离全病毒颗粒，用裂解剂在密度梯度离心步骤中裂解病毒颗粒(例如，用含有裂解剂如脱氧胆酸钠的蔗糖梯度)，然后过滤(例如超滤)以去除不需要的物质。可将裂解的病毒颗粒重悬于磷酸钠缓冲的等渗氯化钠溶液中。BEGRIVAC 、FLUARIX 、FLUZONE 和FLUSHIELD 产品是裂解疫苗。纯化的表面抗原包含流感表面抗原血凝素，一般还包含神经氨酸酶。其可通过从流感病毒颗粒纯化这些糖蛋白获得。制备这些蛋白质纯化形式的方法是本领域熟知的。FLUVIRIN 、AGRIPPAL 和 INFLUVAC 产品是亚基疫苗。另一种有用的流感抗原是病毒体[14](即无核酸病毒样脂质体颗粒)，例如在INFLEXAL V 和INVAVAC 产品中。病毒体可通过用去污剂溶解流感病毒，然后去除核衣壳和重建含病毒糖蛋白的膜来制备。另一种制备病毒体的方法包括将病毒膜糖蛋白加入至过量磷脂，得到膜中具有病毒蛋白质的脂质体。作为从流感病毒颗粒衍生物质中制备流感疫苗的替代方法，也已知在异源重组宿主中表达蛋白。例如，可在昆虫细胞中用杆状病毒载体[15，16]中表达HA，神经氨酸酶也可以[17]。纯化的重组血凝素和/或神经氨酸酶糖蛋白可用作本专利技术的免疫原。这些重组抗原可以是全长，或可包含全长蛋白的表位，例如包含HA胞外域。 另一种有用的流感病毒免疫原类型是M2基质蛋白。已知用M2胞外域(M2e ;长20-25个氨基酸)针对流感免疫。M2e可与乙肝病毒核心抗原(HBc)等蛋白融合，提供在其表面呈递M2抗原的免疫原性颗粒。与GC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.09.10 US 61/241,264;2009.09.11 US 61/241,4851.ー种免疫原性组合物，包含(a)流感病毒免疫原和肺炎球菌免疫原，(b) RSV免疫原和肺炎球菌免疫原，或(c)流感病毒免疫原、RSV免疫原和肺炎球菌免疫原，其中肺炎球菌免疫原含有至少ー种肺炎球菌多肽。2.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括佐剂。3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述佐剂包括水包油乳液。4.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在干，所述组合物包括B型链球菌免疫原。5.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物具有0.5ml的单位剂量体积。6.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述流感病毒免疫原包含来自HlNl甲型流感病毒、H3N2甲型流感病毒、B/Victoria/2/87样こ型流感病毒和B/Yamagata/16/88样こ型流感病毒的血凝素。7.ー种制备权利要求I所述的免疫原性组合物的方法，所述方法包括步骤混合流感病毒免疫原、肺炎球菌免疫原和/或RSV免疫原中的两种或多种，其中肺炎球菌免疫原包含肺炎球菌多肽。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括混合GBS免疫原的步骤。9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述方法提供单位剂量体积为O.5ml的组合物。10.一种药盒，所述药...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·拉普奥利，R·克莱门斯，
申请(专利权)人：诺华有限公司，
类型：发明
国别省市：