一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法技术

一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法，属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-090A，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO：M2012173，该菌株由大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-070B（保藏编号CCTCCNO：M2012071）经基因工程改造获得。用其动态调控发酵生产α-酮戊二酸，发酵36~48h产α-酮戊二酸水平达到9%，且所产α-酮戊二酸化学纯度达到95%以上。该工艺以葡萄糖或淀粉、糖蜜或生物柴油副产甘油为原料，工业化生产α-酮戊二酸，其使用价值非常巨大。本发明专利技术发酵培养基简单清洁，既有利于降低生产成本，也有利于简化后提取步骤获得高品质产品。操作工艺简单易行，有利于在工业化规模生产中推广使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术采用微生物发酵法生产α -酮戊二酸。
技术实现思路
涉及一株基因改造后丙酮酸代谢过程可动态调控的α-酮戊二酸高产菌株，以及相关的发酵生产技术。本专利技术是一种高光学纯度和化学纯度的α -酮戊二酸制造技术，发酵生产过程中只有痕量琥珀酸，乙酸等杂酸的生成。属于微生物发酵工程

技术介绍
α -酮戍二酸(a-ketoglutaric acid, a-KG),又名 α -氧代戍二酸，α -胶酮酸，α-羰基戊二酸，α-酮基戊二酸，在细胞代谢中起重要作用，是三羧酸循环的重要中间产物之一，在生物体内参与氨基酸、蛋白质和维生素的合成以及能量代谢。α -酮戊二酸在医药工业、饲料工业、有机合成和功能性食品等领域应用广泛。医药工业方面，α-酮戊二 酸主要作为生化试剂和测肝功能的配套试剂，另外α-酮戊二酸还具有抗氰作用，可以起到抗惊厥作用；饲料工业方面，作为饲料添加剂可以提高动物抗应激能力，增强免疫功能，促进骨骼发育和提高繁殖率；有机合成方面，α -酮戊二酸也是重要的化工合成中间体，用于多种衍生化学品的合成；功能性食品方面，α-酮戊二酸主要作为运动营养饮料的成分，同时可以降低术后患者和长期病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株产a -酮戍二酸的菌株，其分类命名为大肠杆菌{Escherichia coli )B0013-090A，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO M 2012173，动态调控发酵过程，该菌株在添加丙酮酸脱氢酶系辅因子的情况下在好氧培养阶段快速生长，在发酵产酸阶段菌体生长受限快速合成a-酮戊二酸。2.用权利要求I所述的产a-酮戊二酸的菌株发酵生产a-酮戊二酸的方法，其特征在于出发菌株为本发明构建的a -酮戊二酸高产菌株CCTCC NO M 2012173，动态调控发酵过程，丙酮酸脱氢酶系辅因子在发酵开始添加，发酵过程中不再添加，丙酮酸脱氢酶系辅因子的添加量为广200 ng/L ;在发酵初期的8 12h内，培养温度控制在2(T30°C，pH维持7. 0，初始糖浓度为3%，充分供氧控制溶氧不低于30%，该阶段菌体利用葡萄糖快速生长，检测糖浓度低于0. 2%时，停止通氧；之后为厌氧发酵阶段，培养温度控制在37 45°C，pH维持7. 2，停止供氧并两次分批补加葡萄糖至终浓度10%，控制第二次补糖前残糖不低于1%，该阶段菌体利用葡萄糖快速合成a -酮戊二酸；发酵36 48h产a -酮戊二酸水平达到9%，a -酮戊二...

【专利技术属性】
技术研发人员：王正祥，田康明，周丽，沈微，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：