海藻用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用制造技术

技术编号:7775048 阅读:191 留言:0更新日期:2012-09-15 14:47
本发明专利技术公开了一种海藻用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。优选的,所述海藻为海带和裙带菜。优选的,所述海带和裙带菜为海带和裙带菜的干品经模拟胃液、模拟胃肠液、蛋白酶水解后的产物。本发明专利技术为海藻的开发利用开辟了一条新的途径,具有一定的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品领域,具体地说,是关于海藻用于制备血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme, ACE)抑制剂的应用。
技术介绍
海带(Laminaria japonica Aresch),别名昆布、江白菜,属于褐藻门、褐子纲、海带目、海带科、海带属,是生长在海底岩石上的一种藻类,形状像带子,含有大量的碘质,可用来提制碘、钾等。中医入药时叫昆布,有“碱性食物之冠”一称。是一种常见的藻类,在中国辽宁、山东、江苏、浙江、福建及广东省北部沿海均有养殖,野生海带在低潮线下2-3米深度岩石上均生长。每100克干海带中含有粗蛋白8. 2克,脂肪0. I克,糖57克,粗纤维9. 8克,无机盐12. 9克,钙2. 25克,铁0. 15克,以及胡萝卜素0. 57毫克,硫胺素(维生素BI )0. 69毫克,核黄素(维生素B2) 0. 36毫克,尼克酸16毫克,含有262千卡热量。裙带菜(Undaria pinnatifida Suringar),属褐藻门,褐子纲、海带目、翅藻科、裙带菜属的温带性海藻。裙带菜在我国宋代的《本草》上称宭送菜,音变成裙带菜。目前主要人工养殖的国家为中国、韩国、日本和法国,我国自然生长的裙带菜主要分布在浙江省的舟山群岛及嵊泗岛。据分析每100克干裙带菜中含粗蛋白11. 6g,精脂肪0. 32g,糖类37. 81g,灰分18. 93g,还含有多种维生素,粗蛋白质含量高于海带。ACE (血管紧张素转化酶,Angiotensin Converting Enzyme)在人体内的作用是将血管紧张素 I (Angiotensin I Converting Enzyme)转化成血管紧张素 II (AngiotensinIIConverting Enzyme),这是肾素-血管紧张素系统中已知最强的血管收缩剂,能够升高血压。在激肽释放酶-激肽系统(简称KKS)中,血管紧张素转化酶水解舒缓激肽,分解成为非活性的多肽,舒缓激肽是降压成分,从而引起血压升高。ACE是一种金属肽酶,含有2个结合Zn2+的位点,即所谓“必须结合位点(Obligatory Binding Site)”。Zn2+结合位点是ACE催化反应的活性基团所在部位。各种ACE抑制物的共同作用是与ACE活性部位的Zn2+结合,使之失活。降血压肽是由数个氨基酸组成的肽,是对ACE活性区域亲和力较强的竞争性抑制齐U,它们与ACE的亲和力比血管紧张素转化酶I (AngI)或舒缓激肽更强,而且也较不容易 从ACE结合区释放,降低ACE活性或使其失去活性,从而阻碍ACE催化血管紧张素I转化成血管紧张素II,使血管不收缩,以及催化水解舒缓激肽成为失活片段的两种生化反应过程,起到降血压的作用。到目前为止,未发现有关于利用海带、裙带菜制备ACE抑制物或降血压药物的报道
技术实现思路
本申请的专利技术人在长期研究海藻的用途的过程中发现,海带和裙带菜的水解产物具有较明显的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。因此,本专利技术的目的在于提供一种海藻用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。根据本专利技术,所述海藻为海带和裙带菜。根据本专利技术的优选实施例,所述海带和裙带菜为海带和裙带菜的干品经模拟胃液、模拟胃肠液和蛋白酶水解后的产物。根据本专利技术的优选实施例,所述模拟胃液包括胃蛋白酶。根据本专利技术的优选实施例,所述模拟胃肠液包括胃蛋白酶和胰蛋白酶。 根据本专利技术的优选实施例,所述蛋白酶选自碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及风味酶。基于海藻具有抑制血管紧张素转化酶活性的作用,海藻可进一步用于开发具有降血压功能的食品或保健品。本专利技术为海藻的开发利用开辟了一条途径,具有一定的应用前景。具体实施例方式以下结合具体实施例,对本专利技术的降血压多肽的制备方法作进一步详细说明。应理解,以下实施例仅用于实施本专利技术而非用于限定本专利技术的范围。以下实施例中,ACE抑制活性的测定原理及方法步骤如下海带以及裙带菜蛋白水解物(多肽)的ACE抑制活性测定采用体外模拟测定,体外ACE抑制率测试原理为底物马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)在酶ACE的催化作用下,可以生产马尿酸(Hip)和二肽,通过液相的方法测定马尿酸的含量,进而可以间接测定ACE酶的酶活;而八0£抑制剂的存在可以抑制ACE酶的活性,致使Hip的生成减少,从而间接反映了 ACE抑制肽的活性。测试方法步骤如下选取EP管作为反应器,编号0、1、2、3等,0号管加入50^去离子水为对照,I、2、3等管加入50 ii L的ACE抑制剂,同时各管内加入50 y L的底物HHL,37°C温浴5min,然后加入10 y L的ACE启动反应,在37 °C水浴中反应40min,反应结束后,力口A IOOuL IM HCl终止反应。反应液进行高速离心,过4. 5 ii m的滤头,然后进行高效液相色谱(HPLC)测定。HPLC条件是:15%乙腈85%水(0. 1%TFA),检测波长228nm,柱温30°C,上样量10 ii L ;ACE抑制率(X)按下式计算X= (A 对照-AI) /A 对照 X 100%式中X—ACE抑制率(%)A对照一对照组生成Hip的峰面积Al—实验组生成Hip的峰面积实施例1-11、海带多肽水解物的制备取干海带,研磨粉碎,收集,得一定量的海带粉末。按照以下方法制备模拟胃液和模拟肠液模拟胃液取I. Og NaClU. 6g胃蛋白酶、3. 5ml浓盐酸,用双蒸水定容至500ml。模拟肠液将6. 8gKH2P04溶于250ml双蒸水中,混匀,加入190ml 0. 2mol/LNa0H和400ml双蒸水,加入胰蛋白酶(0. 2519g),混匀,用0. 2mol/L NaOH调整pH值7. 5±0. 1,定容至 IOOOml0按表I所示,对获得的海带粉末分别用模拟胃液水解、模拟胃肠液水解、以及不同的蛋白酶处理,具体如下模拟胃液水解称取2g海带粉末,加入50ml模拟胃液,按照表I水解条件,在相应温度下水浴IOmin 6h,煮沸IOmin灭酶活,调节pH至7,水解物离心(12000r/min, IOmin),收集上清液。模拟胃肠液水解在模拟胃液水解之后,再加入25ml模拟肠液,在相应温度下水浴10mirT5h,煮沸IOmin灭酶活,调节pH至7,水解物离心(12000r/min,IOmin),收集上清 液。蛋白酶水解称取2g粉末加50ml水,按照表I的蛋白酶水解条件,调节pH值至相应的酶反应pH条件,加入相应的酶0. 1% (w/v),在相应的反应温度下水浴酶解6h,加热灭活,终止反应,调节pH至7,水解物离心(12000r/min, IOmin),收集上清液。表I、蛋白酶解条件 实施例~ 模拟体液/酶温度rc)时间 模拟胃液37L86h—2模拟胃肠液 371.8+7.6 6h+6h ~碱性蛋白酶 5587T26h ~木瓜蛋白酶 5556h 5风味酶5566h ~6模拟胃液37L8IOmin ~模拟胃液37O2h I模拟胃液37L84h~9模拟胃肠液 371.8+7.6 4h+10min 模拟胃肠液 371.8+7.6 4h+3h~~Tl模拟胃肠液 371.8+7.6 4h+5h注实施例2中,模拟胃液和模拟肠液水解时间分别为6h本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.海藻用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。2.如权利要求I所述的应用,其特征在于,所述海藻为海带和裙带菜。3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述海带和裙带菜为海带和裙带菜的干品经模拟胃液、模拟胃肠液、蛋白酶水解后的产物。4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述模拟胃液包...

【专利技术属性】
技术研发人员:谢静莉方明李莹杜磊吴燕玲李鹏张旭晟邓高静王波束雯婷
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

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