一种外用抗真菌药的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种外用抗真菌药的检测方法，所述外用抗真菌药为鞣硼三酸散，所述检测方法为性状、检查、鉴别以及含量测定项目；其中鉴别分为定性鉴别，以水杨酸对照品为对照的高效液相色谱鉴别；含量测定是对以水杨酸对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇：0.4％磷酸溶液＝50～70：30～50为流动相测定制剂中水杨酸的含量，本发明专利技术科学合理，准确性高，可行性强，提高了鞣柳硼三酸制剂的稳定性，可有效地控制药品的质量，从而保证临床效果和用药安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种外用抗真菌药的检测方法，具体涉及鞣柳硼三酸散的检测方法，属于中药的质量鉴定领域。
技术介绍
真菌感染性疾病根据真菌侵犯人体的部位分为4类浅表真菌病、皮肤真菌病、皮下组织真菌病和系统性真菌病；前二者合称为浅部真菌病，后二者又称为深部真菌病。浅部真菌(癣菌)仅侵犯皮肤、毛发和指(趾)甲，而深部真菌能侵犯人体皮肤、黏膜、深部组织和内脏，甚至引起全身播散性感染。因此，出现了许多抑制或消除真菌感染的药物，如灰黄霉素、两性霉素B等抗生素，咪康唑、 氟咆嘧啶等合成药，以及ー些古老的抗真菌外用药如水杨酸、碘剂等。其中由鞣酸、水杨酸、硼酸三种成分组成的外用抗真菌药鞣柳硼三酸散，质量标准收载于化学药品地方标准上升国家标准(第十册)，标准号WS-10001-(HD-1007)-2002。本专利技术人经过研究发现，其中的水杨酸可以溶解角质间的构成形物质(cement)，使角质层产生脱落，能去除积聚过厚的角质层，促进新陈代谢。但现行标准仅对鞣酸、水杨酸、硼酸进行简单的定性鉴别，没用采用高效液相等定性鉴别，也没有对制剂中重要的指标水杨酸进行含量測定，质量难以控制，该种药品的疗效得不到有效的保证。另外，杨大勇等在文献《高效液相色谱法测定鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量》中，提出了米用 Symetry Shield RP18 (5 μ m4. 6mmX 250mm) Columm 色谱柱，以 O. 05mol/L 憐酸ニ氢钠缓冲液(PH2.6)-こ腈(50 50)为流动相，检测波长为233nm的检测条件，来对鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量进行測定，取得了一定效果，但是分离度不佳，峰形有拖尾，另外重复性和稳定性等也有缺陷。因此，需要认真研究水杨酸在药物中的特性，分析比较得出更好的方法和參数，使得鞣柳硼三酸外用制剂的疗效得到更好的保证。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种鞣柳硼三酸散的检测方法。在现有技术的基础上，増加了水杨酸的液相色谱鉴别方法，另外在水杨酸的高效液相色谱含量測定法中，优化供试品溶液的配制方法以及展开剂的选择，以达到准确有效地检测出制剂中所含有的有效成分的目的。本专利技术是这样构成的鞣柳硼三酸散的检测方法，所述检测方法为性状、检查、鉴别以及含量测定项目；其中鉴别分为定性鉴别，以水杨酸对照品为对照、以甲醇O. 4%磷酸溶液=50 70 30 50为流动相的高效液相色谱鉴别；含量測定是以水杨酸对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇O. 4%磷酸溶液=50 70 30 50为流动相，照中国药典2010版二部附录V D高效液相色谱法测定制剂中水杨酸的含量。具体的鉴别方法为(I)取鞣柳硼三酸散制成的重量比为O. 2-0. 4%的水溶液8_12ml，加1%明胶溶液2 3滴，生成乳白色沉淀；(2)在水杨酸含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液中水杨酸峰保留时间应与对照品溶液中主峰保留时间一致；(3)取鞣柳硼三酸散制成的重量比为2-4%的水溶液2-4滴，滴于姜黄试纸上即显橘红色，干燥后显樱红色，用氨试液湿润即变为绿黑色。更具体的鉴别方法为(I)取鞣柳硼三酸散制成的重量比为O. 2%的水溶液10ml，加I %明胶溶液2 3滴，生成乳白色沉淀；(2)在水杨酸含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液中水杨酸峰保留时间应与对照品溶液中主峰保留时间一致； (3)取鞣柳硼三酸散制成的重量比为2%的水溶液2滴，滴于姜黄试纸上即显橘红色，干燥后显樱红色，用氨试液湿润即变为绿黑色。具体的含量测定方法为照高效液相色谱法中国药典2010年版二部附录V D測定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇O. 4%磷酸溶液=50 70 30 50为流动相；检测波长为305nm，理论塔板数按水杨酸峰计算应不低于3000 ；測定法称取约相当于水杨酸O. 075-0. Ig的鞣柳硼三酸散，置50ml量瓶中，加こ醇30-50ml，超声5-20分钟，放冷，用こ醇稀释至刻度，摇匀；量取l_3ml，置50ml量瓶中，用こ醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取水杨酸对照品适量,称定,加こ醇溶解并定量稀释制成每Iml中含O. 04-0. 08mg的溶液，同法測定；按外标法以峰面积计算，即得。更加具体的含量测定方法为照高效液相色谱法中国药典2010年版二部附录V D測定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.4%磷酸溶液=60 40为流动相；检测波长为305nm，理论塔板数按水杨酸峰计算应不低于3000 ；測定法精密称取约相当于水杨酸O. 075g的鞣柳硼三酸散，置50ml量瓶中，加こ醇40ml，超声10分钟，放冷，用こ醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置50ml量瓶中，用こ醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液ΙΟμΙ，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取水杨酸对照品适量,称定,加こ醇溶解并定量稀释制成每Iml中含O. 06mg的溶液，同法测定；按外标法以峰面积计算，即得。本专利技术散剂中，含水杨酸(C7H6O3)应为标示量的90. 0% 110. 0%。为了确保本专利技术有效，其检测方法科学、合理、可靠，申请人对试品的专属性、系统适用性、线性关系、精密度、稳定性、重复性、加样回收率、耐用性等方面进行了一系列的试验研究，主要的试验资料如下实验例鞣柳硼三酸散中水杨酸的高效液相色谱法鉴别及含量測定研究I、仪器与试药仪器戴安P680 高效液相色谱仪，Agilent TC-C18 (2) 5 μ m4. 6_X 250mm 柱号518925-902，岛津UV1700紫外分光光度计；赛多利斯CPA22 电子天平，精度为十万分之O试剂与试药水杨酸对照品，中国药品生物制品检定所，批号100106-200303 ;鞣柳硼三酸散供试品，贵州神奇制药有限公司生产。甲醇色谱纯，磷酸分析纯，こ醇分析纯。2、色谱条件的选择及系统适用性试验2. I流动相的选择取同一批号的样品按供试品制备方法制成供试液，分别以甲醇-O. 4%磷酸溶液、甲醇-O. 5%冰醋酸溶液、O. 05mol/L磷酸ニ氢钠缓冲液(pH2. 6)-こ腈溶液为流动相对样品中水杨酸进行測定，试验结果见表I。 表I流动相对含量測定的影响 流动相出峰时间峰形水杨酸含量(mg/g) 甲醇-0.4%磷酸7.7分钟左右峰形对称379.60甲醇-0.5%冰醋酸10分钟Ai右峰拖尾381.680.05mol/L磷酸ニ氢钠缓10分钟左右峰拖尾372.51 冲液(pH2.6)-乙腈试验结果表明上述三种流动相对含量测定结果无显著影响，但以甲醇-O. 4%磷酸溶液为流动相得峰形对称，出峰时间较早，故选择甲醇-O. 4%的磷酸溶液为本品含量测定用流动相。2. 2色谱条件及系统适用性试验采用C184. 6X250mm色谱柱，经过试验以甲醇O. 4%磷酸溶液=60 40为流动相，流速I. Oml/min,检测波长为305nm，柱温为25°C，测定效果较好。紫外吸收光谱表明水杨酸在305nm附近有最大吸收,选定305nm为检测波长。按上述色谱条件测定制剂中水杨酸的含量，水杨酸峰拖尾因子、分离度符合要求。理论板数不低于3000。3、专属性试验及样品液相鉴别按本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张芝庭，张涛涛，
申请(专利权)人：贵州神奇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：