南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶蛋白编码序列及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种在南方红豆杉中表达的新的编码2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(2-C-Methyl-D-erythritol4-phosphatecytidyltransferase，MCT)蛋白的编码序列及其在提高植物萜类化合物含量的应用。本发明专利技术涉及包含所说基因的克隆、功能验证、融合基因构建体，携带该构建体的新的重组表达载体。还涉及被所说的表达载体转化植物细胞，以及由转化细胞产生的所说基因的转基因植物及其后代，包括植物种子及植物组织。本发明专利技术将所说基因在植物中表达，所获得的转基因植物的萜类化合物含量获得了提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学、酶学、生理学以及基因工程等领域。具体地，本专利技术涉及ー种在植物中表达的TcMCT蛋白(南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶蛋白，2-C-Methyl-D-erythritol 4-phosphate cyt idyl transferase, TcMCT)及其核酸序列。本专利技术还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。
技术介绍
紫杉醇(Taxol)是从药用植物红豆杉中分离出的具有抗癌作用的天然产物，是目前发现的最好的天然抗癌药物之一。由于红豆杉生长缓慢且紫杉醇含量非常低，所以完全不能满足患者的需求。开展红豆杉的基因工程为解决药源缺乏的问题提供了崭新的思路，而开展紫杉醇生物合成途径的分子生物学研究是实现紫杉醇基因工程的首要工作。本专利技术中，我们在南方红豆杉科(Araceae)植物南方红豆杉(Tkras chinensis)中克隆到2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(TcMCT)基因，该基因为定位于质体的MEP/DXP途径的的关键酶基因之一。TcMCT催化MEP/DXP途径的第三个反应，在胞苷三磷酸(CTP)的參与下，催化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶蛋白编码序列，其特征在于，编码具有南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(2-C-Methyl-D-erythritol 4-phosphate cyt idyl transferase, TcMCT)蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述核苷酸序列与SEQ ID NO. 3中从核苷酸第59-1001位的核苷酸序列有至少70%的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO. 3中从核苷酸第59-1001位的核苷酸序列杂交。2.南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶蛋白编码序列，其特征在于，编码具有南方红豆杉2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(2-C-Methyl-D-erythritol 4-phosphate cyt idyl transferase, TcMCT)蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述核苷酸序列是SEQ ID NO. 3中从核苷酸第59-1001位的核苷酸序 列。3.一种分离出的南方红豆杉TcMCT蛋白多肽，其特征在于，它是具有SEQ ID NO. 4氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。4.如权利要求4所述的南方红豆杉TcMCT蛋白多肽，其特征在于，所述蛋白多肽是具有SEQ ID NO. 4所示的氨基酸序列的多肽。5.ー种载体，其特征在于，它包含权利要求I或2所述的蛋白编码序列。6.一种用权利要求I或2所述蛋白编码序列转化的宿主细胞，其特征在于它是原核或真核细胞。7.ー种可用作探针的核酸分子，其特征在于所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖志华，陈敏，杨春贤，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：