本发明专利技术描述了一种杀死或抑制包含异质或混合细胞群体的肿瘤的方法。实现所述的杀死或抑制肿瘤是通过选择性地指向被认为表达在特定细胞群体上的特定的配体，从而还能杀死缺乏该特定配体的细胞群体。这些结合体的治疗作用是由于其被传送至特定的细胞群体以杀死这些细胞，并且释放细胞毒性药物以杀死非目标细胞，因此消除了肿瘤。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种消除或杀死异质或混合细胞群体的方法。本专利技术尤其涉及一种通过择性地将对应于特定细胞群体的专一配体例如抗原、抗原决定基或受体同时还指向并杀死一个缺乏该专一配体的细胞群体，从而杀死肿瘤中的异质或混合细胞群体的方法。
技术介绍
细胞毒素抗癌药物的疗效可以通过提高其对于癌细胞的选择性而得以增强。实现该目标的一种方法为将药物和与肿瘤细胞具有选择亲和性的单克隆抗体或其他类型的定向剂共价键合。这种方法已经被广泛应用于已经被开发的同时对于杀死目标肿瘤细胞具有高强度和高选择性、较长的循环保留时间、并且缺乏免疫基因的多种细胞毒素剂、 以及多种可用于人源化(或人体)的抗体-药物结合体或免疫结合体。这种新一代的高效抗癌剂包括抗体和美登木素生物碱(maytansinoid)的结合体、CC1065的同功异质体、紫杉醇(taxol)(紫杉类(taxoids))的衍生物、auristatin的衍生物、以及刺孢霉素 (calicheamycin) Y I的衍生物。多种美登木素生物碱(maytansinoid) (DMl)的结合体正在进行临床开发，并且anti_CD33抗体与刺孢霉素(calicheamycin)的结合体以及Mylotarg 已经被联邦食品及药物管理局批准作为抗癌药物用于临床应用。已经发表的很多报道详细地试图将单克隆抗体-药物结合体特定地指向肿瘤细胞(Sela 等人发表于 Immunoconjugates 189-216 (C. Vogel, ed. 1987) ;Ghose 等人发表于 Targeted Drugs 1-22 (E. Goldberg, ed. 1983) ;Diener 等人发表于 Antibody Mediated Delivery Systems 1-23 (J. RodwelI, ed. 1988) ;Pietersz 等人发表于 Antibody Mediated Delivery Systems 25-53 (J. RodwelI, ed. 1988) ;Bumol 等人发表于 Antibody Mediated Delivery Systems 55-79 (J. RodwelI，ed. 1988))。细胞毒素药物例如氨甲蝶呤、柔毛霉素、 阿霉素、长春新碱、长春碱、美法仑、丝裂霉素C、以及瘤可宁已经与多种单克隆抗体共轭。 在一些情况下，药物分子和抗体分子之间的连接是通过中间载体分子例如清蛋白(Garnett 等人发表于 Cancer Res. 46 :2407-2412 (1986) ;Ohkawa 等人发表于 Cancer TmmumoI. Immunother. 23 :81-86 (1986) ；Endo 等人发表于 Cancer Res. 47 1076-1080 (1980))、葡聚糖(Hurwitz 等人发表于 Appl. Biochem. 2 :25-35 (1980) ;Manabi 等人发表于 Biochem. Pharmacol. 34 :289-291 (1985) ;DiIIman 等人发表于 Cancer Res. 46 :4886-4891 (1986)； Shoval 等人发表于 Proc. Natl. Acad. Sci. 85 :8276-8280 (1988))、或聚谷氨酸(Tsukada 等人发表于 J. Natl. Cane. Inst. 73 :721-729 (1984) ；Kato 等人发表于 J. Med. Chem. 27 1602-1607(1984) ;Tsukada 等人发表于 &■· J. Cancer 52:111-116(1985))。抗体-药物结合体的药效通常折衷为在一些肿瘤中的目标抗原的异质表达，因为通过与抗原-阳性肿瘤细胞结合的抗体的结合药物的定向转送不会伤害无法与抗体结合的任何抗原-阴性肿瘤细胞。此外，作为一种通过减少其血液供给而使肿瘤缩小的方法，肿瘤脉管系统是个有吸引力的目标，越来越引起注意。肿瘤脉管系统通常为肿瘤抗原-阴性。以前有报道发现几种抗体一定向细胞毒素剂确实不但能够根除抗原-阳性细胞而且能够根除抗原-阴性的邻近细胞，即所谓的“旁侧效应”。在免疫放射性核素、 免疫脂质体、以及ADEPT中都观察到了该旁侧效应(Allen TM, Nat Rev Cancer 2(10) 750-63 (2002) ；Muldoon LL, Neurosurgery53 (6) 1406-12 (2003), Muldoon LL 和 Neuwelt EA, J Neurooncol 65(1) :49-62 (2003))。在2000年3月美国癌症研究协会学报第41卷发表的摘要中，作者描述了通过细胞内的P-糖蛋白和其他流出转移剂使分裂的DMl的一部分流出。这是因为在细胞外的环境中，自由释放的DMl-硫醇容易与细胞的具有巯基或二硫键的分子例如半胱氨酸或胱氨酸、氧化或还原谷胱甘肽、或蛋白质(例如血清蛋白)反应。一旦与这些亲水的生物分子反应，DM-I会变成无活性的、混合二硫化合物，可以消除其渗入隔壁细胞的能力以及保留其特性的能力。因此，如果细胞结合剂-药物结合体可以被设计成这样，就会非常有助于多种增殖疾病的治疗，从而提供一种更稳定并且更有效的游离药物的形式，不但可以消灭抗原-阳性肿瘤细胞，而且可以消灭周围的抗原-阴性肿瘤细胞或赘生脉管系统的细胞，因此通过在目标细胞内由结合体释放稳定游离的药物，可以使治疗肿瘤的效果最大化。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种消除异质或混合细胞群体AB的方法，其中A代表选择性地表达特定配体的细胞群体,并且B代表缺乏由A表达的配体的细胞群体。该方法基本包含转送细胞-结合剂药物结合体，使用含有二硫基团的连接剂连接选择的表达配体的细胞群体A，使该试剂与细胞群体A中的配体结合，选择使该药物进入包含细胞群体A的细胞中。在结合体中与细胞-结合剂连接的药物表示为前体药物；前体药物一旦离开结合体就转变为细胞毒素药物或“药物”，并且能够进行进一步的修饰，例如烷基化。细胞毒素药物或修饰的细胞毒素药物是活性药剂。这样，在一个实施方式中，药物一旦离开结合体，就经过烷基化，优选为甲基化，可以保护未反应的硫醇基团不被进一步修饰而导致药物失活。游离烷基化的药物可以有效地杀死细胞群体A中的细胞；并且从细胞群体A中释放出该“活化”药物，并导致杀死细胞群体B中的细胞，因此消除了异质或混合细胞群体AB。这里使用的术语“活化”指的是游离的药物，优选为修饰的游离药物，其中对游离药物的修饰可以提高其稳定性或活性。这种修饰包含了从抗体-药物结合体上脱离后药物的烷基化例如甲基化。因此，意外地发现，如果药物一旦脱离结合体，就在药物的硫醇基团上进行烷基化 (例如甲基化)，烷基化可以保护药物不与具有巯基的细胞的分子比如半胱氨酸或蛋白质 (例如血清蛋白)反应而使游离的药物受阻或灭活。如本专利技术所示，烷基化的游离药物非常稳定并且有效，而且可以转移至并杀死抗原阴性的邻近的细胞，从而杀死肿瘤中的异质或混合细胞群体。除了上述发现以外，还有一个令人意外的发现，如果在连接细胞结合剂和药物的连接剂中的二硫键通过在二硫键附近形成空间位阻而本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：维克托·S·戈德马克赫尔，罗伯特·J·卢茨，拉维·V·J·查里，耶乐娜·V·科夫通，约翰·M·兰伯特，丽塔·斯蒂夫斯，汉斯·K·埃里克森，
申请(专利权)人：免疫基因公司，
类型：发明
国别省市：
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