一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用四环素菌渣的方法，尤其是涉及一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：a.种子活化培养、b.一级种子制备、c.二级种子制备、d.菌渣培养基制备、e.取步骤c制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子，分别按质量百分比为1～10%接种量接入步骤d制备的菌渣培养基中，经好氧发酵、酶解、离心、微滤膜过滤、浓缩等步骤，可得酵母浸膏；本发明专利技术可使四环素生产企业排放的大量废弃菌渣得以高效转化，同时其产品可广泛用于生物发酵、生物工程、生物医药等领域，且工艺简单，成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用四环素菌渣的方法，尤其是涉及。
技术介绍
中国是四环素类抗生素生产大国，年产量居世界首位。然而在四环素生产过程中， 会产生大量的废弃菌渣，这些菌渣主要是发酵醪液进行固液分离时形成的菌饼部分，其主要成分是微生物菌丝体、未代谢利用完的有机物、无机盐等。长期以来，抗生素菌渣多采用简单晾晒或烘干后，作为动物饲料或肥料使用，经济附加值较低。更重要的是，菌渣在晾晒或烘干过程中，会散发出一种特殊异味，而且，菌渣因有机质含量高，易引起二次发酵，颜色变黑，产生恶臭味，给周围环境带来危害。酵母浸膏是以酵母为原料，利用现代生物技术通过酵母细胞自溶破壁和酵母自身的酶系对酵母细胞质进行水解或以酶制剂进行水解，再经一系列的抽提、浓缩等工序得到的粉状或膏状或液体的产品，营养丰富，富含有18种以上氨基酸、功能性多肽、抗衰老活性因子、膳食纤维和甘露糖，还含有人体不可缺少的核酸、核苷酸和钙，富含B族维生素及磷、 镁、锰、锌、硒等多种微量元素。酵母浸膏被广泛应用于生物发酵、生物工程、生物医药等领域，具体地说，可广泛用于发酵法生产抗生素、氨基酸、有机酸、酶制剂、生物防腐剂、生物材料、维生素、透明质酸等的培养基配制以及生物工程、生物医药等领域。我国目前生产酵母浸膏的厂家较少，但市场需求量较大。由于酵母浸膏生产原料主要是以小麦等粮食作物为原料，价格偏高，因而造成酵母浸膏的生产成本还处在一个比较高的水平，难以达到实际且实惠的应用。目前还没有一种能利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种生产成本低、制备工艺简单独特、 生产周期短、使四环素菌渣得以高效转化、有效避免四环素菌渣不合理使用对环境造成危害的。本专利技术通过如下方式实现，其特征在于该方法包括如下步骤a.种子活化培养分别从酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露保存管中挑取一环，分别接入种子活化培养基中，30 35°C，10(Tl40r/min下好氧培养36 48h，可分别得到活化的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子；b.一级种子制备将上述步骤a制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子按质量百分比为1 5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，3(T35°C，10(Tl40r/min下好氧培养36 48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子；c.二级种子制备将上述步骤b制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子按质量百分比为广5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，3(T35°C，10(Tl40r/min下好氧培养36 48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子；d.菌渣培养基制备按下述重量比的原料混合即可得菌渣培养基四环素菌渣 11 13kg，玉米面粉0. 2 0. 5kg，酶制剂0. 4 0. 8kg，(NH4)2SO4 0. I 0. 3kg，加水使菌渣培养基中水分含量为75 85% ;e.将上述步骤c制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子，分别按质量百分比为I 10%接种量接入上述步骤d制备的菌渣培养基中，30 35°C，4(T80r/min下好氧培养4 6d，然后调节pH为6. 5^7. 0，在55°C水浴中按质量百分比为0. 03%的量加入酵母抽提酶，水解16 24h，升温到80°C使酶失活，待其冷却后，离心、微滤膜过滤，滤液经减压浓缩控制其水分为15 25%，即为酵母浸膏；所述种子活化培养基，种子扩大培养基，霉菌培养基，产酶培养基，酶制剂制备方法分别是1)种子活化培养基制备按下述重量比的原料混合即可得种子活化培养基蛋白胨 10g，酵母浸膏10g，葡萄糖20g，水IOOOml ；2)种子扩大培养基制备按下述重量比的原料混合即可得种子扩大培养基蛋白胨 IOg,酵母浸膏5g，葡萄糖5g，水IOOOml ；3)霉菌培养基制备按下述重量比的原料配制即可得霉菌培养基取新鲜去皮土豆 200g，切碎后，加IOOOml水煮沸20分钟，过滤后滤液用水稀释至1000ml，然后再加入葡萄糖 20g即可；4)产酶培养基制备按下述重量比的原料配制即可得产酶培养基四环素菌渣700g， 麸皮300g，再加水使产酶培养基水分含量为6(T65% ；5)酶制剂制备从黑曲霉、康宁木霉、绿色木霉保存管中挑取一环，分别接入霉菌培养基中，菌株经活化和扩大培养后，分别以5%的接种量接种于产酶培养基中，28 35°C好氧培养6(T72h后，可得生产酵母浸膏所用的酶制剂。 本专利技术有如下效果1)制备工艺简单独特本专利技术提供的， 包括种子活化培养、一级种子制备、二级种子制备、菌渣培养基制备，然后将制备的二级种子，按质量百分比为I 10%的接种量接种于菌渣培养基中，经好氧发酵、酶解、离心、微滤膜过滤、浓缩等步骤，即可得酵母浸膏；2)生产的酵母浸膏中蛋白质含量高利用本专利技术提供的方法制得的酵母浸膏具有较高的蛋白质、氨基酸和核苷酸含量，本专利技术产品的真蛋白，氨基酸态氮及核苷酸含量相对较高，同时氨基酸种类较多，不仅适用于生物发酵行业，而且还适用于生物工程、生物医药等领域；3)降低环境污染变废为宝、生产成本低本专利技术在原料的选择上主要是以四环素生产过程中产生的废弃菌渣为主，配以少量玉米面粉、(NH4)2SO4为辅料，不仅来源丰富而且价格低廉。本专利技术可以有效的利用四环素菌渣，减少其大量堆放对环境造成的危害。此外，本专利技术实现了好氧发酵工艺条件的优化，降低了生产酵母浸膏的成本，增加了投产后的产品竞争力；4)安全可靠本专利技术生产酵母浸膏所使用的发酵原料均不含任何有毒有害物质，具有安全性和补充营养的特点，对环境无直接或间接的污染作用；5)生产的产品质量高本专利技术针对目前大量四环素菌渣利用现状，以选育优化的酿酒酵母、热带假丝酵母、EM原露为酵母浸膏生产菌株，所产生的酵母浸膏中蛋白质、氨基酸与核苷酸含量较高，其中氨基酸种类较多，同时还提高四环素菌渣资源化利用的经济附加值， 本专利技术酵母浸膏中水分含量15 25%，铵盐含量I 3%，pH 6. 0 7. 0，真蛋白含量35 50%，氨基酸态氮含量4. 5^7. 5%，核苷酸含量8 15呢/g ；6)采用本专利技术提供的方法得到的酵母浸膏，可以达到以下指标I.感官指标棕黄色膏状，有特殊的酵母香味。2.卫生指标(每千克成品中含)总菌落，浸膏为阴性。重金属未检出。具体实施例方式实施例I :，该方法包括如下步骤a.种子活化培养分别从酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露保存管中挑取一环，分别接入种子活化培养基中，35°C，140r/min下好氧培养36h，可分别得到活化的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子；b.一级种子制备将上述步骤a制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子按质量百分比为5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，35°C，140r/min下好氧培养36h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子；c.二级种子制备将上述步骤b制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子按质量百分比为5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，35°C，140r/min下好氧培养 36h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子；d.菌渣培养基制备按下述重量比的原料混合即可得菌渣培养基四环素菌渣11k本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马玉龙，惠兴育，王敏，马志强，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：