水凝胶封装的线虫制造技术

技术编号:75856 阅读:204 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种杀虫剂的制备方法及其组合物,包括水合的水凝胶胶囊,所述胶囊包括至少一个有效杀虫量的、能传染一个昆虫宿主的线虫.所述胶囊具有充分的水合作用以便维持所述线虫的生活力及传染性.同时也公开了制备所述杀虫剂组合物的方法.(*该技术在2006年保护过期,可自由使用*)

Hydrogel encapsulated nematode

Methods and compositions for preparing pesticides, including gel capsule hydrated, the capsule comprises at least one effective insecticidal quantity, can infect a host insect nematode. The capsule has sufficient hydration to maintain the life force and infectious nematodes. The preparation method of the the pesticide composition is also disclosed.

【技术实现步骤摘要】
本专利技术通常涉及应用线虫作杀虫剂,更具体涉及在水凝胶囊中固定并保存线虫以便输送到昆虫宿主中,也涉及装载线虫的胶囊。在农业区域内应用活的机体去控制有害昆虫的蔓延,给人们带来增长着的利益。为避免使用化学杀虫剂相关联的缺点,如它们缺少专一性、残留的毒性反应及目标昆虫的抗药性的迅速发展,使上述那种应用活的机体的杀虫制剂成为理想的杀虫剂。输送在控制条件下的活的杀虫制剂具有狭窄的宿主类型范围,能控制特定宿主的蔓延而又不影响天然的捕食者或有益的昆虫。被称为生物一合理的杀虫剂的实例中包括thuringiensis杆菌;杆状病毒科(Baculovindae)如苜蓿银纹夜蛾核多面体病病毒;及各种真菌病原体。长期以来线虫被认为是理想的杀虫制剂,部分是由于它们的目标或宿主机体是广泛的。例如斯氏线虫(steinernematids)及异小杆目(heterorhabditid)线虫在实验室条件下显示了很广泛的宿主范围,所述实验室条件排除了对线虫传染的行为或生态屏障,佛罗里达、博卡拉坦、CRC出版社有限公司1979年出版的波埃纳(Poiner.G.O.)“昆虫的生物控制中的线虫”“线虫”杂志13∶241-249(1981)戈格勒(Gaugler.R.)著文。杀虫作用通常是由于线虫本身对昆虫的致病性以及它与某些昆虫的细菌的关联造成的结果。例如,DD-136线虫的传染性的幼虫有一个关联细菌即嗜线幼虫无色杆菌,所述杆菌通常发现于幼虫的肠胃中。经昆虫摄食或昆虫的侵犯后,线虫通常会穿过肠壁而进入血腔,在此处细菌会被释放出来并增生,而改造成宿主中致死的败血病。应用线虫作为杀虫剂的主要障碍在于它们对于干燥的敏感性。在线虫所需要的湿度的场合下,有效宿主的范围限制于居住于泥土及隐藏的栖息地的昆虫,所述隐藏的栖息地包括暖房、蘑菇床及动物的粪便。曾在野外做过大量的尝试通过避免日间应用或使用抗-干燥剂或增湿剂来增加其田间持久性和应用线虫来控制昆虫。这种对水份的要求曾导致各种包含线虫带水制剂的生产,但这种制剂的有效性通常是受到水载-载体的早期蒸发的限制。为减少蒸发速度,水载体中包括着蒸发-阻滞水增稠剂,矿物油,胶凝剂或表面活性剂。例如可参见美国专利第4,178,366号。已经利用水凝胶对多种微生物或细胞培养物、甚至有机及生物-活性化学药品进行封装。这种封装法的典型代表叙述于美国专利第4,450,233;4,352,883;4,434,231号。能将多细胞有机体如线虫封装于一基质中将是很理想的,这种基质能供应促够的水份以便防止干燥,并允许线虫的传染期幼虫被广范围的昆虫宿主所摄食或者浸犯广范围的昆虫宿主。本专利技术的重要目的在于提供一种杀虫剂组合物,所述组合物可含有足够的水份的情况下输送到固定区域,以便提供封装在其中的供长时间用的有效杀虫量的线虫。本专利技术通过提供在水合的凝胶胶囊中封装传染性线虫的方法和材料达到这个或其他目的,该胶囊在一个较长的时间内在没有损害它们对昆虫宿主的传染能力支持着线虫的生活力及传染性。按照本专利技术的一个方面,提供一种杀虫剂组合物,该组合物包括一种水合的水凝胶胶囊,所述胶囊中包含有效杀虫量至少为一个能使一个昆虫宿主传染的线虫,所述胶囊具足够水合作用以便维持所述线虫的生活力及传染性。本专利技术的另一方面,包括一种所述杀虫剂组合物与在一起的为至少一种能吸引预料的昆虫宿主的试剂。本专利技术还有另一个方面,包括一种包含在水合的水凝胶胶囊中的有效杀虫量至少为一个能使一个昆虫宿主传染的线虫的杀虫剂组合物,与在一起的为至少一种能激发所述昆虫宿主摄食所述胶囊的试剂。也提供制备所述杀虫剂组合物的方法。先有技术中已知多种致病线虫具有范围的昆虫宿主,因而给本专利技术的实施提供了理想的杀虫剂。大概作为最有用的杀虫剂的最著名的线虫是DD-136线虫(褐夜蛾)斯氏线虫steinernema feltiae Filipjeu)。其能起杀虫作用的已知线虫包括斯氏线虫属格氏新线虫Neoapleetaua menozzii(=锯蜂斯氏线虫)毛蚊新线虫金龟新线虫(=格氏斯线虫)养治亚新线虫(=毛蚊斯系线虫)Neoapleetaua dutkui异小杆目线虫属Heterorhabditis bacterioplcoraHeterorhabditis heliotlindisHeterorhabditis hopthaHelerorabditis harubletoni索线虫属菲氏索线虫食蚊罗马索线虫Diximermis petersoniHexamermis arvalis暗黑索线虫Pheromermis pachysoma其他可包含能致昆虫于死亡的品种的属有步甲线虫属(carabomematidae)双胃线虫属小杆线虫属圆线虫属四线虫属除此还有许多昆虫的线虫也可使昆虫不育及在昆虫宿主的群体中造成成员数目降低上述公开的许多线虫可在控制条件下进行饲养。一种方法是通过将经选择的昆虫宿主传染并把生成的昆虫躯壳悬浮在一个水的环境中。经一段时间后可把线虫从水中收集起来。参看前述波埃纳著文。另外,如美国专利4,334,498号中所公开的,也可将线虫饲养于生长室之中,该专利中的有关部分作为参考资料结合到本专利技术中。可使用各种水凝胶试剂提供按照本专利技术生产的杀虫剂组合物的适当封装基质。通常,水凝胶囊可让气体扩散以便线虫呼吸。所选择的水凝胶试剂提供能足于抵抗外部摩擦及反向力的胶囊,但柔软到可以在适当的时间最后释放线虫或为昆虫摄食。为满足这些目的,在特定实施方安中可能需要使用各种凝胶的混合物或分层使用不同的凝胶,以便达到要求的结果。供制备封装线虫的水合的水凝胶胶囊的有用的水凝胶试剂包括藻酸钠、瓜尔树胶、含刺槐豆胶的鹿角菜及含白明胶的藻酸钠。其他还包括但不限于表1 水凝胶试剂Ⅰ.天然聚合物甲 离子键(需要络合试剂)含多果胶酸酯的藻酸盐果胶酸钠红藻胶果胶沙菜胶葡萄糖罗晃子果瓜尔豆胶吉蓝树胶乙 疏水性相互作用链淀粉琼脂琼脂糖含有白明胶的琼脂白明胶淀粉枝链淀粉玉米皮胶淀粉阿接伯半乳聚糖达瓦树胶梧桐树胶Ti胶黄蓍胶小麦胶壳多糖糊精Ⅱ.稳定性化合物A 商品名Gelrite(Kelco)其他具有相同特性的水凝胶亦可作为上述公开的水凝胶的等效物而使用。选作封装线虫的水凝胶试剂通常须包含下列特征(虽然可用其他方式实施本专利技术)1.一种水凝胶胶囊顺从适宜于作保护和衬垫线虫之用;2.水凝胶胶囊的内部须具有可溶性或形成乳胶的特性,以使它能接受及包含添加物,包括但不限于水、不可溶、或疏水物质,所述物质具有能吸引昆虫到胶囊的能力或刺激昆虫摄食胶囊;3.一个外表面,所述外表面对机械应力提供保护屏障,便于处理,及维持胶囊的水合作用并伴随维持线虫的生活力及传染性。4.足够的机械胶粘强度以维持胶囊的完整性,同时允许线虫从其中迁移至昆虫宿主,并释放所含的任何引诱剂的添加物。5.所选择试剂须可形成在温度和条件可为线虫所承受的胶囊基质,并须不要求应用或产生任何对线虫的寿命或传染性有害的组分。然而必须理解线虫是可以暂时承受那样的条件而没有永久性损害。上面叙述的水凝胶胶囊的特性通常是由所使用的水凝胶试剂的浓度参数及化学性质决定的,以及须认识到所述这些特点可在特殊的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杀虫剂组合物,其特征在于,该组合物包括水合的水凝胶胶囊,此胶囊包含至少一个能传染一个昆虫宿主的有效杀虫量线虫,所述胶囊具有足够的水合作用以维持所述线虫的生活力及传染性。

【技术特征摘要】
US 1985-10-23 790,337的范围有限制作用的提示。为说明本发明,提供下列实例来描述各种各样线虫、水凝胶试剂及引诱剂和摄食刺激剂。所标志的各种量如无特别说明则为每100毫升的克数。实例Ⅰ如Dutky等人在“昆虫病理学会志”6417-422(1964)中所叙述的在蜡螟的幼虫中生产DD-136线虫。经约四天后,将昆虫宿主的躯壳放置在含有水的收集盘中,约一星期后收获线虫。所收获的线虫贮存在250立方厘米的组织培养瓶中,贮存温度为4℃,浓度为每毫升约34000个线虫。将2克LF-6藻酸钠(新泽西、里奇菲尔特、Multi-Kem产品)溶解于商用混合器中的100毫升水中,搅拌约4至5分钟。游线虫的传染期幼虫混合在藻酸钠溶液中以便产生浓度为每毫升约4,000个线虫。然后将含线虫的溶液逐滴地装载在含100毫摩尔CaCl22H2O的络合试剂中。所述络合试剂溶液需在加入藻酸盐溶液时进行连续搅拌以避免二价阳离子局部稀薄。经约20至30分钟络合反应时间后,用选筛把胶囊从络合溶液中分离出来,并在去离子水中洗涤。然后将这些胶囊贮存在温度约为4℃的潮湿的环境中。经9个月贮存期后,测定被封装的线虫的生活力及传染性,其方法如下将每个样品胶囊沉浸在0.5摩尔的柠檬酸钠作为溶剂的溶液中使之溶解。将所述含有线虫的溶液用水稀释,并用解剂显微镜测读出活的线虫。将昆虫宿主放置在50毫升的烧杯中,用含有约7%水的沙覆盖,并用所获线虫接种。将烧杯盖住以便阻止干燥作用,7天后把昆虫的死亡率进行记录。这些检定的结果列于表3中。表3 生物检定结果处理 幼虫死亡率%实例ⅠA1.在溶液中贮存9个月的线虫 1002.在大胶囊(90毫克重) 70中贮存9个月的线虫3.在小胶囊(30毫克重) 90中贮存9个月的线虫4.无线虫 10实例ⅠB1.在溶液中贮存5个月的线虫 1002.在与CaCl2络合的胶囊 90中贮存5个月的成虫3.在与CuSO4络合的胶囊 100中贮存5个月的线虫4.无线虫 0实例ⅠC1.在溶液中贮存2个月的线虫 1002.在每个胶囊中包含2000 100个线虫的胶囊中贮存2个月的线虫3.在每个胶囊中包含1000 100个线虫的胶囊中贮存2个月的线虫4.在每个胶囊中包含2000 100个线虫的胶囊中贮存2个月的线虫5.在每个胶囊中包含3000 100个线虫的胶囊中贮存2个月的线虫6.在每个胶囊中包含4000 80个线虫的胶囊中贮存2个月的线虫7.无线虫 0实例Ⅱ重复实例Ⅰ所述的封装程序但用Hdterorhabditis heliothidis线虫来代替DD-136线虫,短期贮存的结果与实例Ⅰ所得相同。实例Ⅲ按实例Ⅰ所述的封装程序将DD-36线虫封装,但进行下述改进将肖里与黑尔昆虫食料(肖里-黑尔著“在简单的合成合质中对9种夜蛾属品种的大量-饲养”见于经济昆虫学会志,1965,58∶522-524。)溶解在藻酸钠溶液中,其浓度约为1毫升食料/4毫升凝胶溶液,并与线虫一起进行封装。将所制备的胶囊供应给昆虫宿主甜菜夜蛾、一点粘虫,在24至48小时不供应其他的饲料或水。在此之后,将胶囊取去并以普通饲料或水代替。在三天的时间内测定昆虫的死亡率。其结果如表4所示。表4 线虫释放幼虫死亡率百分比处理释放线虫于时间0 1小时 2小时 3小时 4小时实例ⅢA水 100 20 20 0 40胶囊 100 80 40 40 80胶囊+膜 60 60 100 100 60实例ⅢB水 100 100 0 0 20胶囊 100 80 40 20 0胶囊+膜 8 100 100 100 60实例ⅢC水 100 80 20 0 0胶囊 80 80 40 0 0胶囊+膜 20 100 80 80 60试验之平均值水 100.0 66.7 13.0 0 20.0胶囊 93.3 80.0 40.0 20.0 26.7胶囊+膜 53.3 86.6 93.3 93.3 60.0实例Ⅳ如实例Ⅰ所述将线虫封装于水凝胶胶囊中,此外,为降低水份的损失用外表膜涂敷于此胶囊的外表层。所述胶囊膜是按下列程式制备的。胶囊膜制备程式Ⅰ制备溶液A.预处理溶液将氧化钙在经微孔过滤的水中搅拌(1∶100,重量∶体积)15分钟。将生成的悬浮体经沃...

【专利技术属性】
技术研发人员:查尔斯E内尔森凯瑟琳曼尼恩凯瑟琳曼尼恩
申请(专利权)人:植物遗传学公司
类型:发明
国别省市:US[美国]

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