本发明专利技术涉及对受试者中的肿瘤血管系统体内成像的非侵入性方法和用途，包括检测经荧光标记的抗CD31抗体。在又一方面，本发明专利技术涉及在受试者中体内监测抗血管生成剂的治疗功效的非侵入性方法和用途，包括检测经荧光标记的抗CD31抗体。另外，提供了在本发明专利技术的方法中使用的试剂盒，其包含经荧光标记的抗CD31抗体和用于近红外荧光成像以检测受试者中的该抗体的手段。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】体内肿瘤血管系统成像本专利技术涉及对受试者中的肿瘤血管系统体内成像的非侵入性方法和用途，包括检测经荧光标记的抗CD31抗体。在又一方面，本专利技术涉及在受试者中体内监测抗血管生成剂的治疗功效的非侵入性方法和用途，包括检测经荧光标记的抗CD31抗体。另外，提供了在本专利技术的方法中使用的试剂盒，其包含经荧光标记的抗⑶31抗体和用于近红外荧光成像以检测受试者中的该抗体的手段。血管形成经由血管生成(vasculogenesis)和血管发生(angiogenesis)过程发生。血管生成是胚胎发育期间血管内皮细胞自前体细胞(称为成血管细胞)的重新分化。此过程与血管发生过程不同，血管发生过程是一种以自先前存在的血管萌发新血管为特征的重塑过程(Folkman 和 D，Amore，Cell 1996 ；第 87 卷1153-1155 ；Risau,Nature 1997;第386卷671-674)。始终广泛认为，血管生成仅在早期胚胎发生期间发生。最近的研究揭示了内皮祖干细胞的存在，而且已经发现这些骨髓衍生细胞掺入成人中的新血管病灶(包括受损伤的角膜、缺血性下肢和肿瘤血管系统)中，提示血管生成可以在成人中发生 (Asahara 等，Science 1997 ；第 275 卷964_967 ；Shi 等，Blood 1998 ；第 92 卷362_367)。然而，血管发生在胚胎发生期间，并且以有限的程度在成人中，例如在女性生殖系统中、在生理性伤口愈合中及在病理性疾病过程诸如癌症中发生(Klagsbrun和Moses， Chemistry&Biology 1999 ；第 6 卷217_224)。血管发生是由各种生长因子诸如血管内皮生长因子(VEGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)刺激的。对血管发生刺激因子的早期应答是蛋白酶诸如基质金属蛋白酶(MMP)家族成员对内皮细胞基底膜的降解。MMP降解胶原和其它胞外基质组分(见附图说明图1)。破坏基底膜屏障让内皮细胞自先前存在的血管向血管生成刺激迁移并增殖(Marsh，Stem Cells 1997 ；第15卷180-189)。血管细胞粘着分子通过介导细胞-胞外基质相互作用来促成内皮细胞迁移。主要的介导物之一是整联蛋白α νβ3，即蛋白质诸如纤连蛋白的一种受体。整联蛋白α νβ3的拮抗剂抑制新血管的生长，提示细胞粘着是血管发生中的一个至关重要的步骤(Brooks等，Cell 1994 ；第79卷1157_1164)。在迁移和增殖后，内皮细胞装配成具有开放腔的管。生成成熟血管中的一个重要步骤是间充质细胞的募集及其随后分化成平滑肌细胞样周细胞，认为所述平滑肌细胞样周细胞稳定化新形成的血管系统。这些周细胞逐渐被内皮丛吸引，导致血管树的进行性覆盖(Benjamin等，Development 1998 ；第125卷 1591-1598)。在此期间，未覆盖的毛细管发生消退，这在获得周细胞包被后停止。因此，血管形成的此较晚期阶段以重塑步骤为特征，其中切除不受保护的血管，并且经周细胞覆盖的血管变得稳定，而且不太易于脱稳定化和消退。大概自内皮细胞来源衍生的血小板衍生生长因子(PDGF)募集周细胞以与内皮细胞联合，从而提高血管稳定性(Lindahl等，Science 1997 ；第277卷242-245)。图1中也显示了上文所描述的血管发生中的过程。血管生成和血管发生，特别是新血管发生是不仅在正常的发育中，而且在异常发育中诸如在肿瘤形成中发生的过程。也就是说，肿瘤细胞的增殖和存活依赖于生长因子的足够供应和毒性分子的除去。在实体组织中，例如氧可以自毛细管放射状扩散仅150至 200 μ HIo在距离超过这点时，继之以细胞死亡(Vincent等，CANCER-Principles&Practice of Oncology，第5版；Lippincott-Raven)。如此，肿瘤块的扩大超出直径为2mm依赖于足够血供的形成。许多出版物描述了肿瘤血管发生的现象。可以将肿瘤植入无血管区，诸如角膜中，或者在特征性血管化表面，诸如鸡尿囊绒膜上植入，及在每种情况中形成新毛细管向内生长的观察结果提示了肿瘤释放血管发生的扩散性活化剂，其可以向静止的血管系统发信号以开始毛细管萌发(Hanahan和Folkman，Cell 1996 ；第86卷353_364)。在过去数年中，已经通过使用许多体外和体内生物测定法，诸如增殖测定法和趋化性测定法来鉴定血管发生的许多诱导物和抑制剂。增殖测定法使用培养的毛细管内皮细胞，并测量增加的细胞数目或经放射性标记的或经修饰的核苷的掺入以检测S期的细胞。相反，趋化性测定法通过多孔膜盘来分开内皮细胞和测试溶液，使得内皮细胞迁移穿过屏障指示测试溶液中存在的化学引诱物(Hanahan和Folkman，Cell 1996 ；第86卷 353-364)。通过使用体内测定法，诸如角膜中的植入物，可以补充体外测定法。已经使用这些测定法来鉴定血管发生的数种诱导物和抑制剂。要检测的第一种是成纤维细胞生长因子， 并且几乎同时，通过其引发血管通透性的能力鉴定一种分泌性蛋白质，称作血管内皮生长因子或血管通透性因子(VEGF) (Simpson-Haidaris和Rybarczyk，Annals of the New York Academy of Sciences2001 ；第 936 卷406_425)。已经显示了这两种蛋白质(VEGF，FGF)都能够增强毛细管生长，并且如此，是血管发生的有力诱导物。最近，已经鉴定出两种相关生长因子VEGF-B和VEGF-C，并且所有三种VEGF基因及FGF在小鼠和人的正常成年器官中广泛表达，提示在组织稳态及血管发生中的作用。FGF 和VEGF结合内皮细胞上的受体，其是跨膜酪氨酸激酶，并且如此经由信号转导级联与细胞调节网络偶联(Brown等，EXS1997 ；第79卷:233_269)。FGF和VEGF通常在极其多种人和动物癌症中表达，并且它们已经在显著分数的携带肿瘤的患者的尿液和血清中以升高的水平检出(Simpson-Haidaris和Rybarczyk， Annals of the New York Academy of Sciences2001 ；第 936 卷406_425)。在过去数十年期间，已经鉴定出数目日益增加的血管生成诱导物，而且还已经呈现了内源血管发生抑制剂的第一项证据。例如，研究人员分别使用基于体外趋化性的测定法和角膜袋体内测定法观察到α干扰素和血小板因子_4可以抑制内皮细胞趋化性和增殖(Brouty-BoyS和 Zetter, Science 1980 ；第 208 卷516_518)。上述段落汇总了如下的证据，即血管发生可以受到内皮细胞增殖和迁移的诱导物和抑制剂两者调节。目前，存在着提示抑制剂和诱导物的平衡决定血管生成开关的线索。数个线索为此假设提供了基础。第一个线索来自体外生物测定法。如提及的，使用增殖和趋化性测定法，FGF和VEGF可以引发来自毛细管内皮细胞的正响应。实验已经表明了，量增加的抑制剂诸如血小板反应蛋白-I(TSP-I)阻断血管发生，提示足够量的抑制剂压倒正活化剂的信号，将血管生成开关保持关闭(Dameron等，Science 本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.07.09 EP 09165031.71.一种对受试者中的肿瘤血管系统体内成像的非侵入性方法，包括检测经荧光标记的抗CD31抗体。2.一种在受试者中体内监测抗血管生成剂的治疗功效的非侵入性方法，包括检测经荧光标记的抗⑶31抗体。3.前述权利要求中任一项的方法，其中要在检测所述抗体前对所述受试者施用所述经荧光标记的抗⑶31抗体。4.前述权利要求中任一项的方法，其中所述受试者患有癌症。5.前述权利要求中任一项的方法，其中所述受试者具有实体瘤。6.权利要求5的方法，其中所述受试者的实体瘤是异种移植物，优选地人异种移植物。7.前述权利要求中任一项的方法，其中要用抗血管生成剂治疗所述受试者。8.前述权利要求中任一项的方法，其中通过近红外荧光成像(NIRE)来实现检测。9...
【专利技术属性】
技术研发人员：M多伯兹，C克莱恩，J萨姆，W舒尔，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：
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