本发明专利技术涉及调节‘含有GTP酶激活蛋白的IQ模体’(IQGAP)的表达和/或功能的反义寡核苷酸，尤其是，通过靶向‘含有GTP酶激活蛋白的IQ模体’(IQGAP)的天然反义多核苷酸。本发明专利技术还涉及这些反义寡核苷酸的鉴定和它们在治疗IQGAP表达相关的疾病和病症中的用途。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请要求2009年8月25日提交的美国临时专利申请No. 61/236，727的优先权， 其通过引用全文并入本文。本专利技术的实施方案包括调节IQGAP和相关分子的表达和/或功能的寡核苷酸。
技术介绍
DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交对于核酸功能的许多方面是重要的，包括DNA复制、 转录和翻译。杂交对于检测特定核酸或改变其表达的多种技术也是关键的。反义核苷酸， 例如通过与靶RNA杂交从而干扰RNA剪接、转录、翻译和复制来破坏基因表达。反义DNA具有额外的特性，即DNA-RNA杂合体用作被核糖核酸酶H消化的底物，这是在大多数细胞类型中存在的活性。反义分子可被递送到细胞中，如寡脱氧核苷酸(ODN)的情形，或反义分子可从内源基因表达为RNA分子。FDA最近批准了一种反义药物VITRAVENE (用于治疗巨细胞病毒视网膜炎)，反映了反义药物具有治疗效用。
技术实现思路
提供本概述以展示本专利技术的概述，以简要地指出本专利技术的性质和实质。提交本概述应理解的是，其不会用来解释或限制权利要求书的范围或含义。在一个实施方案中，本专利技术提供通过利用靶向天然反义转录物任何区域的反义寡核苷酸，导致相应有义基因的上调而抑制天然反义转录物作用的方法。本文还预期，天然反义转录物的抑制可由siRNA、核酶和小分子实现，认为这些在本专利技术的范围中。一个实施方案提供体内或体外调节患者细胞或组织中IQGAP多核苷酸的功能和 /或表达的方法，包括将所述细胞或组织与长度为5至30个核苷酸的反义寡核苷酸接触， 其中所述寡核苷酸与包括SEQ ID NO 2的核苷酸1至979中的5至30个连续核苷酸的多核苷酸的反向互补序列具有至少50%序列同一性，从而体内或体外调节患者细胞或组织中 IQGAP多核苷酸的功能和/或表达。在另一优选的实施方案中，寡核苷酸靶向IQGAP多核苷酸的天然反义序列，例如， SEQ ID NO :2所列的核苷酸，和其任何变体、等位基因、同系物、突变体、衍生物、片段和互补序列。反义寡核苷酸的实例如SEQ ID NO :3至7所列。另一实施方案提供体内或体外调节患者细胞或组织中IQGAP多核苷酸的功能和/ 或表达的方法，包括将所述细胞或组织与长度为5至30个核苷酸的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与IQGAP多核苷酸的反义的反向互补序列具有至少50%序列同一性；从而体内或体外调节患者细胞或组织中IQGAP多核苷酸的功能和/或表达。另一实施方案提供体内或体外调节患者细胞或组织中IQGAP多核苷酸的功能和/ 或表达的方法，包括将所述细胞或组织与长度为5至30个核苷酸的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与IQGAP反义多核苷酸的反义寡核苷酸具有至少50%序列同一性；从而体内或体外调节患者细胞或组织中IQGAP多核苷酸的功能和/或表达。在优选的实施方案中，组合物包括一种或多种结合有义和/或反义IQGAP多核苷酸的反义寡核苷酸。在另一优选的实施方案中，寡核苷酸包括一种或多种修饰或取代的核苷酸。在另一优选的实施方案中，寡核苷酸包括一种或多种修饰的键。在又一实施方案中，修饰的核苷酸包括包含硫代磷酸酯、膦酸甲酯、肽核酸、 2’ -0-甲基、氟-或碳、亚甲基或其它锁核酸(LNA)分子的修饰的碱基。优选地，修饰的核苷酸是锁核酸分子，包括a-L-LNA。在另一优选的实施方案中，寡核苷酸被皮下、肌内、静脉内或腹膜内地施用于患者ο在另一优选的实施方案中，寡核苷酸以药物组合物施用。治疗方案包括向患者施用反义化合物至少一次；然而，可修改该治疗以包括经一段时间的多个剂量。该治疗可与一种或多种其它类型的治疗联合。在另一优选的实施方案中，寡核苷酸被封装在脂质体中或被连接于载体分子 (如，胆固醇、TAT肽)。其它方面在以下描述。附图说明图1是实时PCR结果的图，显示利用Lipofectamine 2000引入的硫代磷酸酯寡核苷酸处理IfepG2细胞后与对照相比IQGAP2 mRNA的倍数变化+标准差。实时PCR结果显示， 用针对IQGAP2反义Hs. 711698设计的寡核苷酸之一处理后48h，HEPG2细胞中IQGAPanRNA 的水平显著增加。标为⑶R-0938至⑶R-0942的条柱分别对应用SEQ ID NO :3至7处理的样品。序列表描述-SEQ ID N0:1 智人含IQ模体的GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)， mRNA (NCBI 登记号:NM_006633) ；SEQ ID NO :2 天然 IQGAP 反义序列 Hs. 711698 (扩展的)； SEQ ID NO :3至7 反义寡核苷酸。*指示硫代磷酸酯键。具体实施例方式下面参考用于示例的实例应用来描述本专利技术的多个方面。应理解的是，列出许多具体细节、关联和方法以提供对本专利技术的完全理解。然而，相关领域普通技术人员将容易认识到，可没有一种或多种具体细节地实践本专利技术或以其它方法实践本专利技术。本专利技术不限于行为或事件的顺序，因为一些行为可以不同顺序进行和/或与其它行为或事件同时进行。 而且，并非所有列举的行为或事件都是实施根据本专利技术的方法所需的。本文公开的所有基因、基因名称和基因产物意为对应来自本文公开的组合物和方法可适用的任何物种的同系物。因此，这些术语包括但不限于来自人和小鼠的基因和基因产物。应理解的是，当公开来自具体物种的基因或基因产物时，这一公开意为仅是示例，不解释为限制，除非其存在的上下文清楚地指明。因此，例如，对于本文公开的基因，其在一些实施方案中涉及哺乳动物核酸和氨基酸序列，意为涵盖来自其它动物的同源和/或直系同源基因和基因产物，所述其它动物包括但不限于其它哺乳动物、鱼、两栖类、爬行动物和鸟7类。在一个实施方案中，基因或核酸序列是人的。定义本文所用的术语仅是为了描述具体实施方案的目的，不意为限制本专利技术。除非上下文另外清楚地指明，否则本文所用的单数形式"一(a)〃、“ 一个/种(an)〃 和"该(the)"意为包括复数形式。而且，在详述和/或权利要求书中使用术语"包括 (including)“、“包括(includes)“、“具有(having)“、“具有(has)“、“带有 (with)“或其变化形式的程度上，这些术语以类似于术语"包含(comprising)"的方式意图为内含式的。术语"约"或"大约"是指对于由本领域普通技术人员确定的特定数值在可接受的误差范围内，其将部分地取决于如何测量或确定该数值，即，测量系统的限度。例如，按照本领域中的实践，“约"可表示在1个或多于1个标准差内。可选地，“约"可表示给定数值的达20%、优选地达10%、更优选地达5%、仍更优选地达1 %的范围。可选地，尤其是有关生物系统或方法，术语可表示在数值的数量级内，优选地在5倍内，更优选地在2倍内。当在本申请和权利要求书中描述特定数值时，除非另外指明，否则应假设术语"约"对特定数值表示在可接受的误差范围内。本文所用的术语"mRNA"是指靶基因的目前已知的mRNA转录物、和可能说明的任何进一步的转录物。‘‘反义寡核苷酸〃或〃反义化合物〃是指结合另一RNA或DNA(靶RNA、DNA)的 RNA或DNA分子。例如，如果其是RNA寡核苷酸，其借助于RNA-RNA相互作用结合另一 RNA 靶并改变靶RNA的活性。反义寡本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·克拉德，O·霍克瓦舍曼，C·科伊托，
申请(专利权)人：OPKOCuRNA公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。