多价体昆虫病毒杀虫剂制造技术

本发明专利技术涉及微生物中利用三种病毒复配制得多价体昆虫病毒杀虫剂，其主要是采用棉铃虫核多角体病毒（新疆株）、苜蓿夜蛾（亚麻夜蛾）核多角体病毒、惊纹地老虎颗粒体病毒三种昆虫病毒复配制成多价体昆虫病毒杀虫剂可湿粉剂，该杀虫剂适用于实夜蛾属及切根夜蛾属等六种害虫的杀虫及防治，并可起到兼治蚜虫的作用，经过大面积的试验证明，对棉花、罐藏番茄、辣椒、豇豆、四季豆、玉米等使用后其棉铃虫、蛀果率控制在５％以下。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

Polyvalent insect virus insecticide

The present invention relates to a compound prepared multivalent viral insecticide using three kinds of virus microorganisms, which is mainly used to Heliothis armigera nuclear polyhedrosis virus (Xinjiang strain), alfalfa (flax Cutworm Moth) nuclear polyhedrosis virus, scared three kinds of insect virus lines tiger granulosis virus complex preparation of polyvalent insect virus pesticide wettable powder, the insecticide for insecticidal and control in Heliothis and cutworm spp. and other six kinds of pests, and can play a role and cure aphid, as proved by the test of large area, cotton, tomato, pepper, cowpea, maize, such as the use of the Sauteed Green Beans cotton bollworm moth the fruit rate below 5%.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于微生物中利用三种病毒复配制得杀虫剂。在世界范围内，农作物上的害虫始终严重而普遍地给农业生产造成严重的损失。化学农药在防虫增产过程中虽然起到了显著作用，但也造成了环境污染和人畜中毒以及杀灭了天敌造成生态不平衡，并使害虫的抗性增强等弊端。因此近年来世界各国对微生物农药的发展及应用引起了广泛的重视，并取得了较好的成效。昆虫病毒多以单价病毒制剂控制特定的一种害虫，当这种害虫作为优势种群对作物产生严重危害，甚至毁灭性灾害时，应用这种单价病毒制剂是十分有效的。然而在一种作物中通常有多种害虫同时危害，采用单价病毒制剂就难以达到植物保护的目的。在自然界中本身就存在病毒混合感染的情形。近年来，大部分棉区第二代棉铃虫空前发生，面积之大，范围之广，蛾卵量之高为历史所罕见，致使大片区棉花遭受重大损失，其结果是由于长期单一使用化学农药导致棉铃虫抗性增强，天敌的控制作用下降是一个重要原因。因此，研究多价体昆虫病毒杀虫剂，有利于充分保护植物的生长，同时在生物防治中可起到极大的效果。本专利技术目的在于，经过多年的研究试验，研制出一种多价体昆虫病毒杀虫剂，充分利用三种昆虫病毒资源优势将分离出的三种昆虫杆状病毒复合成一种剂型，适用于对实夜蛾属及切根夜蛾属等六种害虫的防治，并可起到兼防蚜虫的作用。本专利技术所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，其主要是由棉铃虫核多角体病毒(新疆株)(Baculovirus armigera)(CCTCC.NO.V93001)苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒(Baculovirus dipsacea“A”)(CCTCC.NO.V93001)惊纹地老虎颗粒体病毒(Baculovirus exclamations“B”)(CCTCC.NO.V93001)复配而成，在制做过程中，首先分别在棉铃虫核多角体病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒、惊纹地老虎颗粒体病毒幼虫中通过活体增殖，得到虫尸，然后按常规方法获得纯病毒，再以棉铃虫核多角体病毒(新疆株)为主毒株，其比率为55.56-76.91%，苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒为辅毒株，其比率为2.65-11.49%，惊纹地老虎颗粒体病毒为辅毒株，其比率为20.44-37.03%，按常规方法加以复配制成可湿性粉剂。本专利技术所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，采用了现代病毒研究的方法和手段，分别对三种毒株进行了离心提纯，扫描电镜，透射电镜，病毒粒子碱释，滴膜负染，超薄切片DMA内切酶分析等从而进行了毒株生物学特性的研究得出棉铃虫核多角体病毒(新疆株)即为多角包涵体(PIB)为不规则的4-6边形多角体，大小为1143×978nm；病毒粒子杆状、两端平截大小为327×68nm，超薄切片病毒粒子呈单粒包埋，核酸为双链DNA，分子量为68.53×106道尔顿。苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒，为多角包涵体(PIB)为4-6边形、棱形、椎形等不规则多角体，大小为887×834nm；病毒粒子杆状、两端钝圆一般不弯曲，大小为259.2×67.6nm，单粒包埋型，核酸为双链DNA，分子量为65.9×106道尔顿，超薄切片中多角体蛋白质晶体，大多呈方阵排列，有时也有平行排列，晶格距约50A。惊纹地老虎颗粒体病毒，为颗粒包涵体(GIB)为卵圆形颗粒，包膜内有1-2个病毒粒子，颗粒大小为578×412nm；病毒粒子杆状，两端钝圆，不弯曲或稍弯曲，大小为390×50nm，核酸为双链DNA，分子量为67.85±3.97×106道尔顿。本专利技术所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，在其生长过程中，该三种病毒均属杆状病毒科，系属A、B亚组，对宿主特异性强，亦即是宿主范围一般较窄，棉铃虫核多角体病毒及苜蓿夜蛾核多角体病毒能感染实夜蛾属(包括棉铃虫、苜蓿夜蛾、烟草夜蛾)惊纹地老虎颗粒体病毒能感染切根夜蛾属(包括惊纹地老虎、黄地老虎、小地老虎)。同时采用活体增殖方法，在活细饱以病毒粒子侵入宿主细饱后，细饱核为侵染部位，如肠道、血淋巴、脂肪囊等部位，随后细饱明显发生病变，细饱逐渐膨大、核仁消失，直至虫体内脏液化胞浆内核糖体显著增加，核内出现病毒发生基质，其周围生长大量核衣壳，细胞核的核膜依然完好，因此该三种昆虫病毒有它生长的共性特征。在培养中将三种昆虫病毒均采用活体饲养增殖病毒的方法，饲养条件为室温，饲养方法分别以天然饲料、半合成饲料及合成饲料，保证昆虫生长发育所必需的碳水化合物，维生素等营养，病毒的代谢产物为核酸及病毒蛋白，核酸为DNA双链。本专利技术所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，经过微生物学检验，卫生指标和安全性检测其制剂不含大肠杆菌，沙门氏菌、痢疾菌等致病菌，在动物试验中，对小白鼠进行试验，其结果口服无毒，腹腔注射致死中量LD50＞2.5mg/g体重，毒性轻微。表明对人畜无毒，是安全的生态-生物农药。对农田无敌昆虫安全，喷洒该杀虫剂16天后表明百株草蛉、蜘蛛、食蚜瘿蚊等与空白对照无异，表明对维护天敌居留，保护益虫资源与生态环境，具有良好的效益。本专利技术所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，经过多年的大面积对棉花、罐藏番茄使用，其棉铃虫，蛀果率控制在5%以下，以棉花34万亩使用计算，提高产量达138万kg；罐番茄2万亩使用后提高产量11万kg。实施例以棉花、罐藏番茄、辣椒及烟草为例以棉铃虫等实夜蛾害虫为防治对象时，棉花掌握在第二或第三代虫蛾羽化盛期或百株卵粒达12-16粒至初孵期，罐藏番茄、辣椒、豇豆、四季豆、玉米及烟草，掌握在第二代或第三代虫蛾羽化盛期或百株卵粒达20-24粒至初孵期采用喷雾的形式，每亩喷一次时取多价体昆虫病毒杀虫剂可温粉剂为40克，(含包涵体20亿/g)稀释水量为40升，喷二次时，取多价体昆虫病毒杀虫剂可温粉剂为80克(包涵体20亿/g)，稀释水量80升。微量喷雾按每亩次1∶30加水稀释。飞机喷雾按每次稀释水一次为6升，二次为12升，喷后遇雨得进行复喷。该杀虫剂不可加入碱性物或杀菌剂，配药用水PH为7左右。权利要求1.一种用于多价体昆虫病毒杀虫剂，其特征在于它是棉铃虫核多角体病毒(新疆株)(Baculovirus araigera)(CCTCC，NO，V93001)。2.一种用于多价体昆虫病毒杀虫剂，其特征在于它是苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒(Baculovirus dipsacea“A”)(CCTCC.NO.V93001)。3.一种用于多价体昆虫病毒杀虫剂，其特征在于它是惊纹地老虎颗粒体病毒(Baculovirus exclamations“B”)(CCTCC.NO.V93001)。4.根据权利要求1、2、3、所述的多价体昆虫病毒杀虫剂，其特征在于首先分别在棉铃虫核多角体病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒、惊纹地老虎颗粒体病毒幼虫中通过活体增殖，得到虫尸，然后按常规方法获得纯病毒，再以棉铃虫核多角体病毒(新疆株)为主毒株，其比率为55.56-76.91%，苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒为辅毒株，其比率为2.65-11.49%，惊纹地老虎颗粒体病毒为辅毒株，其比率为20.44-37.03%，按常规方法加以复配制成可湿性粉剂。全文摘要本专利技术涉及微生物中利用三种病毒复配制得多价体昆虫病毒杀虫剂，其主要是采用棉铃虫核多角体病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亚麻夜蛾)核多角体病毒、惊纹地老虎颗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于多价体昆虫病毒杀虫剂，其特征在于它是棉铃虫核多角体病毒（新疆株）（Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ａｒａｉｇｅｒａ）（ＣＣＴＣＣ，ＮＯ，Ｖ９３００１）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈誉，任德新，王琳娜，张春竹，黄伟，
申请(专利权)人：新疆巴音郭蒙古自治州农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：65[中国|新疆]