检测氮氧化物的方法技术

本发明专利技术提供了对生物样品中的NOx化合物进行检测和定量的方法和试剂盒。所述方法包括使包含亚硝酸盐化合物的混合物与显色试剂反应形成有色化合物，使所述混合物与被构造用于保留所述有色化合物的保留介质接触，和检测保留在所述保留介质上的所述有色化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关专利申请的交叉引用本申请要求2009年8月4日提交的美国临时专利申请61/231，257、2010年8月 2日的美国临时专利申请61/369，933的优先权，两专利申请以引用方式并入本文。
技术介绍
硝酸盐化合物可存在于供水中。当其浓度水平较高时，可在成人中引起与亚硝胺有关的胃部问题，并可引起婴儿的高铁血红蛋白血症。饮用水标准通常包括硝酸盐化合物在公共饮用水中的最大容许浓度。硝酸盐化合物还可以低水平存在于生物组织中，特别是创伤组织中。一氧化氮合酶(N0Q在组织中产生一氧化氮(NO)。NO在生物组织中的半衰期为约5秒。NO通常代谢成稳定的NO相关化合物(如硝酸盐和亚硝酸盐化合物)，这可在患者的尿液、血浆、组织、创液或其他样本中得以测定。样本中硝酸盐和亚硝酸盐化合物的水平可用作患者体内NO合成水平的指标。患者体内的NO在阈值水平以下时，不能实现正常的创伤修复，从而导致不愈合的慢性创伤或溃疡。需要简单、灵敏的方法来测量样品中的NO相关化合物。
技术实现思路
本专利技术涉及对生物样品(如患者的尿液、血浆、组织、创液或其他样本)中的NOxK 合物进行检测和任选定量的方法。在某些优选实施例中，采自某个部位的生物样品可包含有限量的即刻可捕集的流体(如创伤部位)。可通过样品采集装置来捕集生物样品。本专利技术的方法提供用于检测生物样品中极低量的NOx化合物。在一个方面，本专利技术提供检测NOxK合物的方法。所述方法可包括提供可能含有 NOx化合物的样品和4，4’ -磺酰基双苯胺；形成包含样品和4，4’ -磺酰基双苯胺的混合物； 以及检测指示样品中存在NOx的有色沉淀。所述混合物还可包含N-(1-萘基)乙二胺和/ 或 VC13。在另一方面，本专利技术提供检测创伤中NOx化合物的方法。所述方法可包括提供来自创伤的样品和4，4’ -磺酰基双苯胺；形成包含样品和4，4’ -磺酰基双苯胺的混合物；以及检测指示样品中存在NOx的有色沉淀。所述混合物还可包含N-(1-萘基)乙二胺和/或VCl3O在另一方面，本专利技术提供检测NOxK合物的方法。所述方法可包括提供可能包含 NOxK合物的样品、4，4’ -磺酰基双苯胺和芳香族二胺；形成包含样品、4，4’ -磺酰基双苯胺和芳香族二胺的混合物；和检测指示样品中存在NOx的有色沉淀。芳香族二胺可包括 N-(l-萘基)乙二胺。在另一方面，本专利技术提供检测创伤中NOx化合物的方法。所述方法可包括提供样品采集装置、来自创伤的样品、4，4’ -磺酰基双苯胺和芳香族二胺；形成包含样品和4，4’ -磺酰基双苯胺以及芳香族二胺的混合物；和检测指示样品中存在NOx的有色化合物。芳香族二胺可包括Ν-α-萘基)乙二胺。在上述任一实施例中，所述混合物还可包含强酸。在上述任一实施例中，所述有色沉淀可包括红色沉淀。在上述任一实施例中，所述方法还可包括加热混合物的步骤。在上述任一实施例中，所述方法还可包括过滤混合物的至少一部分的步骤。在一些实施例中，过滤混合物的至少一部分可包括捕集表面积为约1. 5mm2至约31mm2的过滤型保留介质中的滤液。在一些实施例中，过滤混合物的至少一部分可包括捕集表面积为约1. 5mm2至约20mm2的过滤型保留介质中的滤液。在一些实施例中，过滤混合物的至少一部分可包括捕集表面积为约1.5mm2 至约3. Imm2的过滤型保留介质中的滤液。在上述任一实施例中，检测有色沉淀可包括目视检测沉淀。在上述任一实施例中， 检测有色沉淀可包括定量检测有色沉淀。在上述任一实施例中，所述方法还可包括形成包含预定量的NOxK合物和4， 4’ -磺酰基双苯胺的混合物。在这些实施例中，所述方法还可包括检测有色沉淀。在这些实施例中，所述方法还可包括将包含可能含有NOx化合物的样品的混合物中的有色沉淀的量与包含预定量的NOx化合物的样品中的有色沉淀的量进行比较。在另一个方面，本专利技术提供试剂盒。该试剂盒可包含过滤型保留介质和选自4， 4’ -磺酰基双苯胺和Ν-α-萘基)乙二胺的化合物。在另一个方面，本专利技术提供试剂盒。该试剂盒可包含过滤型保留介质和选自4， 4’ -磺酰基双苯胺、N-(l-萘基)乙二胺和VCl3的两种或更多种化合物。在上述任一实施例中，所述试剂盒还可包含强酸。在上述任一实施例中，所述试剂盒还可包括样品采集装置。在一些实施例中，所述样品采集装置可用于从创伤中获得样品。 在上述任一实施例中，所述试剂盒还可包括过滤装置。在一个方面，本专利技术提供检测创伤中NOx化合物的方法。所述方法可包括提供来自创伤的样品和能与亚硝酸盐化合物反应形成有色化合物的显色试剂。所述方法还可包括形成包含样品和显色试剂的第一混合物。所述方法还可包括使第一混合物的至少一部分与被构造得适于保留有色化合物的第一保留介质接触。所述方法还可包括检测保留在第一保留介质上的有色化合物。在一些实施例中，所述方法还可包括提供能够将硝酸盐化合物还原成亚硝酸盐化合物的还原剂，其中所述第一混合物包括还原剂。在上述方法的任一实施例中，与亚硝酸盐化合物反应形成有色化合物的显色试剂可包含生色团或显色剂。在上述方法的任一实施例中，与亚硝酸盐化合物反应形成有色化合物的显色试剂可选自4，4'-双_(二甲基氨基)二苯甲硫酮；奧；番木鳖碱吲哚(brucine indol)；对苯基偶氮苯胺；对硝基苯胺；邻氨基苯甲酸；对氨基苯乙酮；对氨苯基砜；对苯基苯胺；对氨基苯磺酸；双-(4-氨基苯基)硫醚；(4-氨基苯基)三甲基氯化铵；1-萘胺； 氯-对苯二胺；间苯二酚；N，N-二甲基苯胺；对氨基苯乙酮；4-硝基-1-萘胺；对硝基苯胺；4-硝基-1-萘胺；对苯基偶氮苯胺；对苯基偶氮苯胺；对硝基苯胺；4-硝基-1-萘胺；对氨基苯乙酮；1-萘胺；1-苯胺基萘；1-萘酚；苯甲醛2-苯并噻唑腙；蒽酮；1-蒽酚；奧；二苯胺；1，2- 二羟基苯；芝麻酚；N，N- 二甲基-1-萘胺；甲醛；高氯酸铁(III)；和N，N- 二甲基-3-羟基苯胺。在上述任一实施例中，所述方法还可包括加热混合物的步骤。在上述方法的任一实施例中，使混合物的至少一部分与第一保留介质接触可包括使所述部分与膜滤器接触。 在上述方法的任一实施例中，检测有色化合物可包括定量检测有色化合物。在上述任一实施例中，所述方法还可包括提供第二保留介质、显色试剂和包含预定量的NOxK合物的溶液。显色试剂与亚硝酸盐化合物反应形成有色化合物。第二保留介质被构造成用于保留有色化合物。所述方法还可包括形成包含溶液和显色试剂的第二混合物，使第二混合物的至少一部分与第二保留介质接触，检测保留在第二保留介质上的有色化合物，以及将保留在第一保留介质上的有色化合物的量与保留在第二保留介质上的有色化合物的量进行比较。在另一个方面，本专利技术提供试剂盒。所述试剂盒可包含被构造用于保留有色化合物的保留介质和可与亚硝酸盐化合物反应形成有色化合物的显色试剂。在一些实施例中，所述试剂盒还可包含将硝酸盐化合物还原成亚硝酸盐化合物的试剂。在上述任一实施例中，所述试剂盒还可包括样品采集装置。在上述任一实施例中，所述试剂盒还可包括含有保留介质的过滤装置。^JL如本文所用，“N0X”是指一氧化氮相关(NO相关)化合物。NO相关化合物包括一氧化氮及其衍生物。NO衍生物包括硝酸盐化合物和亚硝酸盐化合物。本文中所用的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：维诺德·P·梅农，
申请(专利权)人：三M创新有限公司，
类型：发明
国别省市：