维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开一种维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法，用于维生素A醋酸酯和棕榈酸经固定化脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的反应产物的分离，分离纯化方法包括如下步骤：1）通过低温结晶去除棕榈酸；2）用液-液萃取分离法或硅胶柱层析分离法分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。本发明专利技术对分离纯化的工艺条件进行了优化。本发明专利技术的液-液萃取分离法具有操作简单，对设备要求低的优点；硅胶柱层析分离法可以得到纯度很高的维生素A棕榈酸酯。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶法合成维生素A棕榈酸酯领域，具体涉及酶法合成维生素A棕榈酸酯过程中的分离纯化方法。
技术介绍
维生素A棕榈酸酯是维生素A最主要的系列产品之一，普遍应用于食品、药物、 营养保健品、化妆品、饲料添加剂等，是人体正常代谢所不可缺少的一种物质，它能维持和促进人体生长、发育、生殖和细胞膜的稳定性，对视觉的形成有明显的作用，而且，维生素A 棕榈酸酯还有助于细胞的繁殖和区分坏死细胞，并且作为一种抗氧化剂能与那些可以产生基因突变的自由基结合。人体正常代谢所需的维生素A棕榈酸酯通常主要是由维生素A 在小肠壁上被酯化而成，再由淋巴输送到肝脏中存储后再发挥作用，因此维生素A棕榈酸酯对人体的正常体内代谢具有重要作用。维生素A、维生素A醋酸酯、维生素A棕榈酯是我国可允许添加的维生素A系列添加剂，但是维生素A、维生素A醋酸酯对热、光极不稳定。 维生素A棕榈酯相对维生素A、维生素A醋酸酯化学性质稳定，不易分解等优点，已广泛应用于化妆品、药物、饲料等。维生素A棕榈酸酯可采用固定化脂肪酶催化合成。固定化脂肪酶催化合成维生素 A棕榈酸酯的反应机理如下酶催化反应通常为可逆反应，由此可以得出反应后反应液中有尚未反应完的维生素A 醋酸酯和棕榈酸，产物维生素A棕榈酸酯和乙酸，还有反应溶剂石油醚。酶法合成维生素A棕榈酸酯的后处理主要包括两种策略，一种是通过优化条件， 提高维生素A醋酸酯向维生素A棕榈酸酯的转化，使转化率尽量接近100%，这样就不需要进行分离纯化操作，而直接结晶就可以得到纯度很高的维生素A棕榈酸酯，这也是目前像厦门金达威等几家维生素A生产企业生产维生素A酯的策略；另一种是不要求转化率很高，在反应结束后，进行分离纯化，通过一种或者几种分离操作得到纯度很高的维生素A棕榈酸酯。分离纯化成本的高低是该合成工艺是否能产业化的关键，因此，从产业化经济性原则来考虑，要求分离纯化操作尽量简单，以降低生产成本，增加企业利润。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法，从而可以得到纯度很高的维生素A棕榈酸酯成品。为达到上述目的，本专利技术是通过以下技术方案实现的 维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法，包括如下步骤1)棕榈酸的去除先将维生素A醋酸酯和棕榈酸经固定化脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的反应产物在4°C条件下放置20 h，析出棕榈酸结晶，过滤除去棕榈酸结晶；接着将过滤后的上层清液放置在-20°C条件下8 h，又析出棕榈酸结晶，再次过滤除去棕榈酸结晶，得到过滤液；2)分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯得到的过滤液用液-液萃取分离法或硅胶柱层析分离法分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。步骤2)中的液-液萃取分离法是将得到的过滤液用乙醇-水溶液和石油醚的混合溶剂作为萃取溶剂萃取分离，萃取温度为rc。乙醇-水溶液和石油醚的混合溶剂中，乙醇的体积分数为80%_100%，乙醇-水溶液和石油醚的体积之比为3:1。上述乙醇-水溶液和石油醚的混合溶剂中，乙醇的体积分数为84%。步骤2)中的硅胶柱层析分离法是用石油醚和氯仿配成的展开剂对过滤液进行薄层层析分离，分离得到维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯；其中展开剂中石油醚和氯仿的配制比例按体积比为(1-5) :1。上述展开剂中石油醚和氯仿的配制比例按体积比为2 :1。本专利技术采用液-液萃取分离法分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。萃取是一种用液态的萃取剂处理与之不互溶的双组分或多组分溶液，从而实现组分分离的传质分离过程。其基本原理是利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的差异，使化合物从一种溶剂中转移到另一种溶剂中。这样经过反复多次萃取，可以将目标产物和其他组分尽可能的分开。萃取剂的选择在萃取中显得很重要，合适的萃取剂就是要求各组分在萃取溶剂两相中的分配系数差异尽可能大，即选择系数大。此外，本专利技术也采用硅胶柱层析分离法分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。 其中洗脱溶剂的选择是分离的关键因素。由分析可知待分离的样品中有维生素A棕榈酸酯、维生素A醋酸酯和微量的棕榈酸。其中棕榈酸分子结构中含有1个-C00H，极性较强， 维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯极性较弱，尤以维生素A棕榈酸酯极性最弱。因此，选择极性适宜的有机溶剂作为洗脱流动相可以实现维生素A棕榈酸酯的分离纯化。根据溶剂极性大小选择石油醚、苯、氯仿、乙酸乙酯四种有机溶剂作为展开剂，对反应液进行薄层层析分离试验。结果表明单独使用任何一种有机溶剂都不能将三种物质分开。根据维生素 A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯、棕榈酸极性的差别关系，选择石油醚和氯仿两种有机溶剂进行互配。本专利技术选择两种不同的方法来分离维生素A棕榈酸酯，一是液-液分离，具有操作简单，对设备要求低的优点；另一是硅胶柱层析分离，利用此分离操作方法可以得到纯度很高的维生素A棕榈酸酯。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步的详细描述，但附图和具体实施方式不应理解为是对本专利技术进行的限定。图1是本专利技术实施例1中不同温度下棕榈酸的去除效果图。图2是本专利技术实施例2中乙醇溶度对萃取的影响效果图。图3是本专利技术实施例3中萃取次数对分离效果的影响表示图。 具体实施例方式维生素A醋酸酯和棕榈酸经固定化脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的具体反应过程如下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法，其特征在于包括如下步骤1)棕榈酸的去除先将维生素A醋酸酯和棕榈酸经固定化脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的反应产物在4°C条件下放置20 h，析出棕榈酸结晶，过滤除去棕榈酸结晶；接着将过滤后的上层清液放置在-20°C条件下8 h，又析出棕榈酸结晶，再次过滤除去棕榈酸结晶，得到过滤液；2)分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯得到的过滤液用液-液萃取分离法或硅胶柱层析分离法分离维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。2.根据权利要求1所述的维生素A棕榈酸酯的分离纯化方法，其特征在于步骤2)中的液-液萃取分离法是将得到的过滤液用乙醇-水溶液和石油醚的混合溶剂作为萃取溶剂萃取分离，萃取温度为4°C。3.根据权利要求2所述的维...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪辉，杨远帆，肖安风，蔡慧农，黄高凌，李利君，杜希萍，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：