本发明专利技术公开了一种同时测定五味子原料或五味子浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素含量的方法，所述方法采用粉碎、过筛、甲醇超声提取、定容、过滤等手段处理北五味子或五味子浸膏后得到供试样品溶液，利用高效液相色谱法同时测定四种五味子木脂素的含量。该方法在柱温25～45℃，流动相为甲醇和0.05～0.2％三氟乙酸水溶液(甲醇和三氟乙酸水溶液体积比为50∶50～100∶0)，洗脱时间30～60min，流速0.7～1.5ml/min、检测波长210～280nm条件下，利用反向分配层析原理，通过梯度洗脱对样品进行分析。该质量检测方法简便、快速、灵敏、准确。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药
，涉及一种中药成分的定量分析方法，具体涉及一种以高效液相色谱方法定量分析五味子原料和/或五味子浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法。
技术介绍
五味子俗称山花椒、秤砣子、药五味子、面藤、五梅子等，为木兰科植物五味子 (Schisandra chinesnsis Baill)的干燥成熟果实。唐等《新修本草》载“五味皮肉甘酸， 核中辛苦，都有成味”，故有五味子之名。古医书称它莖藉、玄及、会及，最早列于神农本草经上品，中药功效在于滋补强壮之力，药用价值极高，临床主要用于久咳虚喘、津伤口渴、阴虚消渴、自汗、盗汗、遗精、久泻不止、心悸、失眠、多梦等，是我国中医应用最广泛的滋补中药之一。李时珍曾谓“五味今有南北之分，南产者色红，北产者色黑，人滋补药必用北产者良”。中国药典2000年版将北五味子和南五味子分别收载为两个品种，五味子只特指北五味子的干燥成熟果实，而南五味子特指华中五味子的干燥成熟果实。北五味子是著名的药用植物，自然分布黑龙江省小兴安岭、完达山、张广才岭、老爷岭等山区。主产于东北和河北等地的五味子果实干品，商品习惯称为“北五味子”。新鲜的北五味子果为鲜艳红色的浆果，多汁、味酸而微涩，有花椒气味。鲜果汁是加工天然保健饮品的原料；干果黑紫红色，有绉皱，是传统的中药材，对人体的中枢神经系统、呼吸系统有兴奋作用，对心脏、肝脏、血压有调节作用，对人的视力、听力有强化功能；促进胆汁分泌，提高抗菌能力。北五味子主要成分是木脂素、挥发油、三萜、有机酸、维生素和多糖等。其中木脂素类化合物主要是联苯环辛烯类化合物，现代医学表明，木脂素类为五味子中最主要的药效活性成分，对中枢神经系统、心血管系统、消化系统等具有多种药理作用。目前，对于木脂素的生理活性研究较多的是对肝脏有作用的成分。对五味子7种有效成分药理研究和临床证明，均有降低肝炎患者血清谷丙转氨酶水平的作用，其中五味子酯乙作用最强，其次是醇乙、丙素、乙素、甲素、酯甲和醇甲。其化学结构式分别如下所示(I)五味子酯乙权利要求1.一种同时定量测定五味子原料和/或五味子浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的方法，包括如下步骤(1)供试样品溶液制备供试样品溶液I 选择50% 100%的低碳醇为提取溶剂，将北五味子粉碎，干燥后加入所述提取溶剂，进行超声提取，经微孔膜过滤获得样品溶液I ；或供试样品溶液II 经醇提，减压干燥后的浸膏用低碳醇溶解，经微孔膜过滤获得样品溶液II ；(2)五味子木脂素含量的测定高效液相色谱实验条件ZORBAX Extend-C18液相色谱柱(150 X 4. 6mm，5 μ m)；柱温 25°C 45°C;流动相低碳醇和0. 05% 0. 2%三氟乙酸水溶液；洗脱时间30 60min ；流速0. 7 1. 5ml/min ；检测波长210 ^Onm ；样品进样量10 50 μ 1 ；木脂素含量的测定(I)准确称取减压干燥后的五味子醇甲5mg，五味子酯甲1. %ig，五味子甲素ang，五味子乙素3. 6mg，用色谱级低碳醇溶解，定容至10ml，经过微孔膜过滤，制备标准对照品溶液；(II)然后对步骤(I)的标准对照品溶液进行色谱分析，分别进样2 μ 1， 5μ 1,15μ 1,25μ 1,35μ 1,45μ 1,以进样25 μ 1计算所得浓度为横坐标，出峰面积为纵坐标绘制标准曲线；(III)对步骤(1)制备的所述供试样品溶液进行色谱分析；(IV)根据标准曲线计算供试样品中四种五味子木脂素的含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，供试样品溶液I所述的干燥，其干燥温度优选为40-70°C，进一步优选50-60°C，最优选55°C ；其干燥时间优选6_48h，进一步优选12 24h ；供试样品溶液I所述的干燥后的五味子粉碎物，优选紧接着过30 80目筛；所述五味子粉末与低碳醇的混合比为(0. 25 0. 5g)五味子粉末/(25 50mL)低碳所述超声提取时间为10 90min，优选30 60min，超声提取温度优选室温 60°C，进一步优选20 40°C。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述浸膏用低碳醇溶解后，优选按 (150 250mg)浸膏/IOml的比例定容，定容后过滤。4.如权利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，所述低碳醇优选1-5个碳原子的低碳醇，如甲醇、乙醇、丙醇或其混合物，更优选采用甲醇。5.如权利要求1-4之一所述的方法，其特征在于，所述过滤优选采用孔径小于0.60 μ m 的微孔膜滤膜，更优选采用孔径小于0. 45 μ m的微孔膜滤膜。6.如权利要求1-5之一所述的方法，其特征在于，述步骤(1)中，提取溶剂为80%甲醇，超声时间为40min。7.如权利要求1-6之一所述的方法，其特征在于，所述步骤⑵中，柱温为35°C，流动相为甲醇和0. 三氟乙酸水溶液。8.如权利要求1-7之一所述的方法，其特征在于，所述步骤O)中，所述低碳醇和三氟乙酸水溶液的体积比为50 50 100 0，优选50 50 80 20。9.如权利要求1-8之一所述的方法，其特征在于，将多次测量结果中含量在下述范围之外的数据舍弃五味子原料中各木脂素含量范围分别为五味子醇甲4 8mg/g、五味子酯甲0. 2 0. 5mg/g、五味子甲素0. 5 lmg/g、五味子乙素2. 5 :3mg/g，或五味子浸膏中各木脂素含量分别为五味子醇甲9 iaiig/g、五味子酯甲0. 6 lmg/g、五味子甲素1 ^iig/ g、五味子乙素4 6mg/g，并将其余测量结果平均，获得五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的平均值。全文摘要本专利技术公开了一种同时测定五味子原料或五味子浸膏中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素含量的方法，所述方法采用粉碎、过筛、甲醇超声提取、定容、过滤等手段处理北五味子或五味子浸膏后得到供试样品溶液，利用高效液相色谱法同时测定四种五味子木脂素的含量。该方法在柱温25～45℃，流动相为甲醇和0.05～0.2％三氟乙酸水溶液(甲醇和三氟乙酸水溶液体积比为50∶50～100∶0)，洗脱时间30～60min，流速0.7～1.5ml/min、检测波长210～280nm条件下，利用反向分配层析原理，通过梯度洗脱对样品进行分析。该质量检测方法简便、快速、灵敏、准确。文档编号G01N30/06GK102419350SQ201110227740公开日2012年4月18日 申请日期2011年8月9日 优先权日2011年8月9日专利技术者周玲, 孙玉良, 张懿, 徐红彬, 王学魁, 肖清贵 申请人:中国科学院过程工程研究所, 抚松县果丰药用植物有限责任公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：肖清贵，周玲，徐红彬，孙玉良，王学魁，张懿，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，抚松县果丰药用植物有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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