一种猪TLR4基因T611A碱基突变的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种猪TLR4基因T611A碱基突变的检测方法，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪TLR4基因序列设计特异引物，对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物，获得特异核酸；对分离纯化的扩增产物进行序列测定，比对分析后确定扩增序列是否存在T611A单核苷酸碱基突变。本发明专利技术可用于猪TLR4基因单核苷酸碱基突变的检测，对判定机体免疫模式识别改变有很大帮助，为猪疫病防控及抗病育种提供依据，同时，为猪抗病育种研究提供基因工程技术帮助。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种猪TLR4基因T611A碱基突变的检测方法，属基因工程
用此方法，能快速检测到猪TLR4基因的单核苷酸碱基突变，为猪免疫防御系统受体基因分子结构、功能研究提供帮助。
技术介绍
Toll样受体(TLRs)作为重要的模式识别受体，通过对病原体相关分子模式 (PAMPs)的识别及信号级联反应，介导机体的天然免疫和获得性免疫，是机体抵抗感染的第一道屏障；TLRs基因变异导致宿主对革兰阳性菌、阴性菌的反应能力丧失，改变机体对病原的抗性或易感性。TLR4在病原微生物跨膜信号传导具重要作用，研究已证实TLR4是机体对LPS免疫应答的主要受体，敲除该基因的小鼠对细菌性病原的刺激应答明显减弱，TLR4基因缺陷小鼠对病毒的抵抗能力降低。目前有关猪TLR4基因的SNP检测偶见报道，但基本局限在个别外显子的单个碱基突变。本专利技术根据GenBank数据库猪TLR4基因序列设计引物，对中外不同品种猪TLR4基因整个编码区进行特异性PCR扩增，找寻可能存在的单核苷酸碱基突变，并分析碱基突变导致的编码氨基酸及蛋白活性、基因功能的改变，为猪Toll样受体与机体免疫力的关系研究奠定基础，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：方晓敏，刘筱，任守文，孟翠，李碧侠，王学敏，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：