用iNOS和相关NOS药剂治疗人体勃起功能障碍制造技术

本发明专利技术提供了一种治疗勃起机能障碍的方法，该方法包括对患者施用诱导型氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）药剂，该药剂包括阴茎ｉＮＯＳ、阴茎ｉＮＯＳ的诱导物、ｉＮＯＳ ｃＤＮＡ或具有ｉＮＯＳ ｃＤＮＡ的阴茎平滑肌细胞或阴茎海绵体。典型的体内治疗包括通过持续或间断值入的或外输注泵输注、小丸输尿管内给药，注射或其它相关的方法将这些药剂运送到患者的阴茎组织中。把来自超量表达ｉＮＯＳ的患者的遗传工程细胞或阴茎组织植入微胶囊中或小丸中、或者通过其它方法，或者经手术直接接种到阴茎海绵体中。在某些情况下，口服给药或全身注射给药途径是可行的。本发明专利技术也提供了另一种治疗方法，该方法包括在培养的平滑肌细胞中体外诱导ｉＮＯＳ，然后运送纯化的或重组的ｉＮＯＳ酶，产生ｉＮＯＳ cＤＮＡ并用ｉＮＯＳ ｃＤＮＡ遗传转化，之后将其运送到患者的阴茎。本发明专利技术的方法包括其它内源和外源ＮＯＳ同工型在阴茎中的超量表达和／或生物学调节，以治疗勃起机能障碍。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

Treatment of erectile dysfunction with iNOS and related NOS agents

The invention provides a method for the treatment of erectile dysfunction, the method includes administering to the patient by inducible nitric oxide synthase (iNOS) agents, the agents including iNOS, iNOS of the penis penis inducer, iNOScDNA or iNOScDNA with the penile smooth muscle cells or penis. A typical in vivo treatment consists of continuous or intermittent infusion or intravenous infusion, intravenous administration of pellets, injection, or other related methods to deliver the drug to the patient's penis. The genetic engineering cells or penile tissue from patients with overexpression of iNOS were implanted into the microcapsules or pellets, or by other means, or directly injected into the penis. In some cases, oral administration or systemic administration is feasible. The invention also provides another treatment method, the method includes in vitro induced by iNOS in cultured smooth muscle cells, iNOS enzyme and then transported purified or recombinant iNOScDNA, produced by iNOScDNA genetic transformation, after its delivery to the patient's penis. The method of the present invention includes overexpression and / or biological regulation of other endogenous and exogenous NOS isoforms in the penis to treat erectile dysfunction.

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种治疗勃起功能障碍的方法，特别是涉及经采用诱导型氧化氮合酶(iNOS)药剂治疗勃起功能障碍的方法，所说药剂包括iNOS、NOS同工型(isoform)、iNOS诱导物、iNOS cDNA和重组iNOS cDNA转化的阴茎平滑肌细胞(iNOS工程细胞)，该方法的目的是改善阴茎勃起血管原性(vasculogenic)功能障碍，特别是血管原性功能障碍。在体内例如阴茎海绵体中诱导iNOS以产生改善病人症状的高水平的iNOS的阴茎组织特异性表达。iNOS也可以在切除的和培养的海绵体细胞中体外诱导、提取和纯化，其后以多种运送系统提供给病人。或者，可以在体外合成重组iNOS，并运送至病人进行治疗。也可以将cDNA iNOS植入病人的阴茎组织以体内产生重组iNOS。另一种替换性方法是用阴茎iNOS和/或NOS同工型cDNA转化来自体内的培养细胞，将所形成的工程细胞引入到体内的海绵体。可以用与有关iNOS所描述的相同的方法使用其它NOS同工型或它们的相应的cDNA和重组蛋白质，以及由NOS cDNA转染的阴茎细胞。
技术介绍
在美国有超过12,000,000的男性患有阳痿，不能达到或维持足以性交的阴茎勃起。它与年龄增大有关，65岁的男性有25％患有此病，75岁的男性有55％患有此病，尽管这些患者中大多数人的性欲相对而言并未受到影响。在美国每年有超过400,000的门诊病人因此就诊，有30,000的病人因此住院。假阴茎的外科移植从1980年的19,000增加到1989年的32,000。1989年用于治疗阳痿的经费保守估计为250,000,000美元。在病人方面，尽管阳痿通常不威胁到生命，但是对病人及其配偶来说，在心理方面的后果却是非常严重的。与文献中的早期设想不同，多达90％的阳痿是由于器官而非心理原因引起的。尽管年龄增大的确是一个具有倾向性的因素，但是在某些病人中器官性阳痿可以早在青春期就出现。导致阴茎勃起功能障碍的血管原性和神经化改变药剂大多数器官性阳痿综合征的根源，因为男性激素紊乱和其它可能导致性欲丧失的身体原因在这些问题上处于一个次要地位。许多起因性血管疾病将最终导致阴茎勃起障碍。因而，动脉粥样硬化、某些类型的高血压、糖尿病、严重的吸烟和酒精中毒均被认为是有可能引起勃起功能障碍的危险因素。糖尿病患者作为一个群体最容易患有血管原性阳痿，在美国约2,500,000人口中发病率超过50％。本专利技术基于下列发现通过诱导氧化氮合酶(NOS)的阴茎组织的特异性表达或者在体内表达重组NOS，可以进行有效的改善性治疗。氧化氮合酶合成化合物氧化氮(NOS)，其是充当阴茎勃起的一种主要介质。正常勃起的生理过程分为三个相互协调的不同阶段(a)动脉流入增加；(b)静脉流出减少；(c)海绵体平滑肌松弛。后者似乎是关键，但是阴茎血管的血液动力学通过动脉干的平滑肌也进行了参与。因而，阴茎动脉和窦中的平滑肌松弛被认为是引起正常勃起的关键性步骤。阴茎平滑肌功能异常可能是勃起功能异常的关键。在一个正常的勃起过程中，刺激通过勃起神经(骨盆自律神经纤维)传递给阴茎。神经递质从三个系统释放(a)去甲肾上腺素从交感去甲肾上腺素能纤维中释放；(b)乙酰胆碱从副交感胆碱能纤维中释放；(c)一种物质从非肾上腺素能-非胆碱能(NANC)纤维中释放。已经表明NANC神经递质是氧化氮(NO)，它作用于平滑肌引起平滑肌松弛。环绕海绵体腔隙空间的小梁平滑肌的松弛具有三大作用(a)通过降低通常情况的对动脉流的持续(柔和)阻力增加从螺烯动脉进入与内皮相连的腔隙空间的流量；(b)调节阴茎内的血储使阴茎充血；(c)将接近80％的收缩血压传递给海绵体空间。后者压缩与扩张的平滑肌和硬的无弹性的巩膜并行的排出静脉，使静脉流出受到限制。消肿的发生是与此主要受交感控制的过程正相反，即增加两个腔隙中平滑肌的紧张性，导致动脉流入的减少和腔隙空间的减小，从而使静脉变瘪。NO被证实是源于内皮松弛因子(EDRF)中的作用于血管的化合物，它似乎在不同的生物反应中发挥多种作用。从于内皮相连的血管中释放出的EDRF，在缺氧、血管性疾病、败血病性休克和炎症情况下发挥不同作用。NO在通过局部诱导平滑肌细胞松弛维持血管紧张性方面具有非常重要的生理作用。研究表明在阴茎海绵体中，NO是引起勃起的主要化合物，并且它似乎是阴茎中的NANC神经递质。以阴茎为例，我们已经通过电场刺激(EFS)，药物治疗和特异性NOS抑制剂应用证实NO是人、狗、鼠和家兔阴茎勃起的主要介质。此发现通过应用了(a)松弛器官浴中的海绵体条(b)动物模型的勃起反应两种必需方法的其它大量实验，得到进一步证实和扩大。近来，我们已经清楚地揭示出男性阳痿危险因素相关鼠模型勃起功能障碍与阴茎NOS含量减少之间的相互关系。阴茎释放NOD的位点之一，似乎在海绵体非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经的末端，NO从那里弥散，之后与相邻细胞中的鸟苷酸环化酶结合，并主要在平滑肌靶组织中刺激cGMP生成。cGMP的合成导致细胞内Ca2+的减少，以及细胞内Ca2+减少后的平滑肌松弛和阴茎血管舒张。本领域普通技术人员已知氧化氮合酶是在内皮细胞、巨噬细胞、大脑、肝脏和另外几个细胞类型和组织中催化NO生成的酶。NOS有两型组成型NOS(cNOS)，其含量似乎不随不同的实验条件而改变；诱导型NOS(iNOS)，细菌毒素和某些生长因子可刺激其合成。一般来讲，cNOS分为几组第一组存在于大脑中(其中的一种同工型称作神经元NOS，nNOS或I型NOS)，第二组cNOS存在于内皮细胞(内皮NOS，eNOS或III型NOS)。已知iNOS(II型NOS)在巨噬细胞、肺、肝、大动脉平滑肌细胞中诱导表达，也可以在内皮细胞中诱导表达。从不同组织中分离的cNOS和iNOS表明几种同工型的存在，其中每组具有特异性辅助因子要求、mRNA大小和免疫特性。在相同的细胞类型中可以同时表达不只一种同工型(不同型名称显示于下列的圆括号中)。cNOS组(特征在于它们对Ca2+的依赖性)中有三种不同的胞质同工酶A，存在于大脑、小脑和成神经细胞瘤细胞；B，存在于内皮细胞中；C，存在于噬中性白细胞中。前两种是钙调蛋白质依赖性的，第三种是非钙调蛋白质依赖性的。Ib无BH4和FDA作辅助因子，唯有一种Ia另外用FMN作辅助因子。还有一种特殊的Ca2+/钙调蛋白质依赖性同工型，它在内皮细胞cNOS中的比例超过90％。在iNOS组中，一种溶解型iNOS可以通过巨噬细胞、肝细胞、枯氏细胞、成纤维细胞、内皮细胞、多种动物的肺和肝诱导产生。一种不同的特殊型iNOS存在于巨噬细胞中并且仅仅依赖NADPH。从它们各自不同的运动学和和对底物/辅助因子的要求中，可以进一步明显看出cNOS、nNOS和iNOS之间的显著区别。L-精氨酸和NADPH分别是常用的底物和辅助因子。如上所述，cNOS和iNOS的区别在于cNOS对Ca2+/钙调蛋白质依赖，而iNOS对Ca2+/钙调蛋白质不依赖或仅仅部分依赖。NOS催化的反应是将L-精氨酸转化为瓜氨酸，其中的产物为NO。通过一系列的竞争性抑制剂如NG-氮-L-精氨酸和NG-甲基-L-精氨酸，或NO螯合剂如血红蛋白质可抑制NO的活性。通过N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和谷氨酸可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在患者中治疗勃起机能障碍的方法，该方法包括下列步骤：ａ）提供一种能使体内组织中ｉＮＯＳ水平增加的药剂；ｂ）向阴茎组织引入有效量的所说的ｉＮＯＳ药剂。

【技术特征摘要】
US 1994-11-10 08/337,3571.一种在患者中治疗勃起机能障碍的方法，该方法包括下列步骤a)提供一种能使体内组织中iNOS水平增加的药剂；b)向阴茎组织引入有效量的所说的iNOS药剂。2.如权利要求1的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂选自实质上由iNOS诱导物、iNOS蛋白质、iNOS cDNA以及iNOS cDNA转化的阴茎细胞或iNOS cDNA转化的组织组成的组。3.如权利要求2的治疗勃起机能障碍的方法，其中所说的iNOS诱导物是一种阴茎iNOS诱导物，所说的iNOS蛋白质是一种阴茎iNOS蛋白质，所说的iNOS cDNA是一种阴茎iNOS cDNA，并且所说的iNOS cDNA转化的细胞或组织是阴茎细胞或组织。4.如权利要求1的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的引入步骤包括以间断的、连续的或随时间释放的方式直接把iNOS诱导物引入阴茎组织中。5.如权利要求2的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的诱导物选自实质上由细菌脂多糖、干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和它们的混和物组成的组。6.如权利要求2的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂是体外产生的iNOS蛋白质。7.如权利要求6的治疗勃起机能障碍的方法，其中所说的iNOS蛋白质是阴茎iNOS蛋白质。8.如权利要求6的治疗勃起机能障碍的方法，其中所说的iNOS蛋白质经连续输注或反复注射、局部表面涂敷、输尿管内给药、微胶囊给药或相关的方法局部施用。9.如权利要术3的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂是阴茎或其它iNOS cDNA，其经连续输注或反复注射、表面涂敷、输尿管内给药、微胶囊给药或相关的方法局部施用以及经全身途径施用。10.如权利要求3的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂是iNOScDNA转化的阴茎海绵体细胞或组织，其被直接植入到阴茎海绵体或组织中，后者被直接植入到阴茎海绵体或组织中，或者保留在微胶囊、小丸或意在限制细胞释放到全身循环中的其它材料(procedures)中。11.如权利要求2的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂是阴茎的或其它的iNOS或e NOS cDNAs，其经连续输注或反复注射、表面涂敷、输尿管内给药、微胶囊给药或相关方法局部施用。12.如权利要求2的治疗勃起机能障碍的方法，其中a)所说的药剂是iN...

【专利技术属性】
技术研发人员：NF冈萨雷斯卡德维德，J拉吉弗，
申请(专利权)人：尼里克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]