一种屎肠球菌制剂及其生产工艺制造技术

技术编号:7234684 阅读:260 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种屎肠球菌制剂及其生产工艺。本发明专利技术提供的制剂,其活性成分为屎肠球菌(Enterococcus?Faecium)康80?CGMCC?No.5058。本发明专利技术的实验证明,本发明专利技术通过分离、鉴定、筛选,得到屎肠球菌康80,其抗逆性强、抗杂菌能力强、具有益生特性,本发明专利技术将其进行乳化制备得到屎肠球菌制剂,可以作为添加剂用于制备动物饲料,其中的动物包括但不限于猪、牛、羊、鸡等各种动物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种屎肠球菌制剂及其生产工艺
技术介绍
饲料中添加抗生素对集约化畜牧业发展做出重大贡献的同时,其产生的副作用如内源性感染和二重感染、耐药性的产生、肠道正常菌群的破坏和畜产品及环境中的残留等对养殖业、动物以及人类食品安全带来严重威胁。益生素就是以活的微生物为主,动物摄入一定量后,在胃肠道特定部位有一定数量的菌株能够粘附、定植和生长,主要通过调节肠道微生物菌群结构和平衡,对动物生长和健康起到有益作用的制剂,是一种良好的的替代抗生素的新型绿色安全添加剂。屎肠球菌(Enterococcus Faecium)广泛存在于自然界和畜禽胃肠道内,是一种有益微生物,普通的屎肠球菌因其耐酸、耐高温等特性较差,未能在饲料添加剂中广泛应用。 因此,根据目前畜牧业的需求,筛选一株耐酸耐高温具有益生特性的屎肠球菌具有广阔的发展前景。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种屎肠球菌制剂。本专利技术提供的制剂,其活性成分为屎肠球菌(Enterococcus Faecium)康80CGMCC No.5058。本专利技术的另一个目的是提供一种制备上述制剂的方法。本专利技术提供的方法,包括如下步骤1)发酵屎肠球菌(Enterococcus Faecium)康 80 CGMCC No. 5058,离心收集沉淀, 得到菌泥;2)将步骤1)得到的菌泥、麦芽糊精、海藻糖、阿拉伯树胶、无菌水混勻乳化,即得到屎肠球菌制剂。在上述方法中,步骤1)中,所述发酵的温度为所述发酵的温度为15°C -45°c,所述发酵的时间为10小时-18小时,所述发酵所需的PH值为4. 5-8. 6,所述发酵的压力为 0.OlMpa-O. 03Mpa ;上述发酵的温度具体为15°C、37°C或45°C,所述发酵的时间为10小时、12小时或 18小时,所述发酵所需的pH值具体为6. 4-6. 6 ;上述发酵的搅拌速度为80rpm/min-120rpm/min,具体可为 80rpm/min、IOOrpm/ min 或 120rpm/min ;在上述方法中,步骤2)中,所述菌泥、麦芽糊精、海藻糖、阿拉伯树胶、水的配比为 3X10ncfu-8X10ncfu 0. 5g_2. 5g 0. Ig-Ig 0. Ig-Ig IOg ;上述菌泥、麦芽糊精、海藻糖、阿拉伯树胶、水的配比具体为3 X IO11Cfu, 5X IO11Cfu 或 8X IO11Cfu 0.58、18或2.58 0. lg、0.5g 或 Ig 0. lg、0.3g 或 Ig IOgo在上述方法中,步骤1)中,所述发酵采用的培养基按照如下方法制备将蔗糖、蛋白胨、酵母粉、K2HPO4, KH2PO4 · 3H20、MnSO4, MgSO4 · 7H20和水混勻,得到培养基,所述蔗糖在所述发酵培养基中的浓度为35g/L-45g/L,所述蛋白胨在所述发酵培养基中的浓度为5g/ L-15g/L,所述酵母粉在所述发酵培养基中的浓度为15g/L-25g/L,所述K2HPO4在所述发酵培养基中的浓度为lg/L-5g/L,所述KH2PO4 · 3H20在所述发酵培养基中的浓度为0. 5g/ L-1. 5g/L,所述MnSO4在所述发酵培养基中的浓度为0. 01g/L-0. 03g/L,所述MgSO4 ·7Η20在所述发酵培养基中的浓度为0. lg/L-0. 6g/L。在本专利技术的实施例中,上述蔗糖在所述发酵培养基中的浓度具体为35g/L、40g/L 或45g/L,所述蛋白胨在所述发酵培养基中的浓度具体为5g/L、10g/L或15g/L,所述酵母粉在所述发酵培养基中的浓度具体为15g/L、20g/L或25g/L,所述K2HPO4在所述发酵培养基中的浓度具体为lg/L、4g/L或5g/L,所述KH2PO4 · 3H20在所述发酵培养基中的浓度具体为 0. 5g/L、lg/L或1. 5g/L,所述MnSO4在所述发酵培养基中的浓度具体为0. 01g/L、0. 02g/L或 0. 03g/L,所述MgSO4 · 7H20在所述发酵培养基中的浓度具体为0. Ig/L、0. 4g/L或0. 6g/L ;上述方法中,所述离心力为1800g_2200g,所述离心力具体为1800g、2000g或 2200g ;所述离心的时间为5min-10min,所述离心的时间具体为5min、8min或IOmin ;在上述方法中,步骤2)中,所述乳化的温度为25°C 48°C,所述乳化的时间为 25min_45min ;在上述方法中,所述乳化的温度具体为251、271或观1,所述乳化的时间为 25min、30min 或 45min。在上述方法中,在所述步骤2~)后,在所述乳化后还包括将乳化产物干燥得到屎肠球菌制剂的步骤,其中干燥采用低温真空干燥箱在低温温度27-50°C,真空度-0. 096Mpa条件下进行。由上述的方法制备的屎肠球菌制剂也是本专利技术保护的范围。上述的屎肠球菌制剂在作为动物饲料添加物中的应用也是本专利技术保护的范围。上述的屎肠球菌制剂在制备动物饲料中的应用也是本专利技术保护的范围。上述的屎肠球菌制剂在促进动物生长中的应用也是本专利技术保护的范围。在上述应用中,所述促进动物生长为如下1)或2)1)提高猪平均日增重、提高猪平均日采食量、提高猪皮毛指数、降低猪料肉比和/ 或降低猪腹泻率;2)提高鸡平均日增重和/或提高平均日采食量;在上述应用中,所述动物为猪或鸡。本专利技术的实验证明,本专利技术通过分离、鉴定、筛选,得到屎肠球菌康80,其抗逆性强、抗杂菌能力强、具有益生特性,本专利技术将其进行乳化制备得到屎肠球菌制剂,可以作为添加剂用于制备动物饲料,其中的动物包括但不限于猪、牛、羊、鸡等各种动物。该饲料具有与抗生素饲料类似的功能,但无抗生素饲料的副作用。本专利技术的屎肠球菌主要作为动物饲料的添加剂,可替代现有动物日粮中的抗生素,调节动物肠内微生态平衡,从而具有增强非特异性免疫功能来预防疾病的作用,同时还可以提供营养因子、促进营养物的消化吸收、降低腹泻、促进动物生长和提高饲料转化率、提高断奶仔猪以及生长育肥猪的生产性能。本专利技术的屎肠球菌对防治动物消化系统疾病起到保健作用,同时对幼年动物可刺激其胃肠道发育,所以将之作为饲料添加剂应用在饲料中能起到抗病促生长的作用。同时, 本专利技术的屎肠球菌无耐药性和药物在动物产品中残留,不会对人类的健康产生潜在的危害,是一种有前途的绿色饲料添加剂。上述提到的菌株康80于2011年7月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCCJia 北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101),保藏号为CGMCC No. 5058,其分类命名为屎肠球菌(Enterococcus Faecium)。附图说明图1为屎肠球菌(Enterococcus Faecium)康80的生长曲线图2为饲料样品中乳酸菌16S rRNA基因序列系统发育树图3为屎肠球菌发酵生产流程图具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。下述实施例中所用的培养基如无特殊说明配方如下1、MRS肉汤培养基蛋白胨10g,牛本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:谯仕彦丁修良王劲松宋青龙
申请(专利权)人:北京龙科方舟生物工程技术中心
类型:发明
国别省市:

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