【技术实现步骤摘要】
专利技术涉及一种高效表达且易于纯化β -甘露聚糖酶的基因工程菌株的构建方法， 属于分子生物学和基因工程领域。
技术介绍
β -甘露聚糖酶(β -mannanase EC3. 2. 1. 78)是一种半纤维素水解酶，以内切方式降解β _1，4糖苷键，降解产物的非还原末端为甘露糖，其作用底物包括葡萄甘露聚糖， 半乳甘露聚糖及甘露聚糖等，甘露聚糖酶的来源非常广泛，包括植物、细菌、真菌、 放线菌甚至软体动物。β-甘露聚糖酶可消除食料中甘露聚糖的抗营养作用，改善饲料的营养价值，以及配合其他的酶(木聚糖酶、蛋白酶)进一步提高家畜的生产性能。是一种很有开发前景的新型饲料添加剂。此外，甘露聚糖酶在食品、保健、医药、造纸、纺织、石油开采和生物技术等方面有很大的应用价值。利用产酶的微生物，采用基因工程技术进行酶基因的克隆并使其高效表达，然后采用发酵技术大规模生产是国内外酶制剂研究的热点领域，但高效表达的产物在分离纯化的过程中依然存在困难，传统的分离纯化过于复杂，给工业化带来额外的成本支出。枯草芽孢杆菌作为一种外源表达的宿主菌被广泛的应用到基因的克隆及过量的表达，本专利技术是根据NC...
【技术保护点】
１．一种高效表达且易于纯化β－甘露聚糖酶的基因工程菌株的构建方法，其特征是根据已知基因序列设计引物，并在引物下游添加组氨酸标签序列，从本实验室筛选菌株枯草芽孢杆菌ＪＮＡ（保藏号ＣＴＣＣ Ｍ ２００９２００）染色体中克隆得到的含信号肽同时含有组氨酸标签的β－甘露聚糖酶基因ｍａｎＡ２ａ，获得重组质粒ｐＭＡ５－ｍａｎＡ２ａ，将该重组质粒转入到枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ １６８菌株中，获得一株高效表达且易于纯化β－甘露聚糖酶的基因工程菌株；
【技术特征摘要】
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