新型抗-α5β1抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供新型抗-α5β1抗体，包括所述抗体的组合物和试剂盒，以及制备和使用所述抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型α 5β工抗体，包括所述抗体的组合物和试剂盒，以及使用所述抗体的方法。
技术介绍
αδβ 整合素是一种细胞膜糖蛋白，其通过其主要配体纤连蛋白介导细胞-ECM 相互作用。α 5β1整合素在细胞迁移、分化和存活中起作用。在肿瘤血管内皮(例如，胃癌、结肠直肠癌、肝细胞癌、子宫宫颈癌、和乳腺癌)和其它血管源性血管中，α 5β1整合素水平升高。在血管发生过程中，α 5β1整合素调节周细胞与内皮细胞的缔合以及内皮胞外基质的装配。因此，α 5 β 1整合素是抑制血管发生和使细胞对VEGF拮抗剂的作用敏感的有效靶标。因此，在本领域中存在对于靶向α 5β 1整合素的组合物和方法的需求。本专利技术满足这一需求和其它的需求。专利技术概述本专利技术提供来源于单克隆抗体18C12的新型抗-Cij1抗体，包括所述新型抗-α 5 β i抗体的试剂盒和组合物，以及制备和/或使用它们的方法。本专利技术的一个实施方案提供一种抗- α 5β工抗体，所述抗体包括VL结构域，其包括含有 TL-S/T-S/P/T-Q/N-H-F/S-T/I-Y-K/T-I-G/D/S(SEQ ID NO :15)的 CDR-Ll ；含有 L/I-N/T-S-D/H/S-G/S-S/L/T-H/Y-N/K/Q/1-K/F-G/A-D/S/V(SEQID NO: 16)的 CDR-L2 ；含有 G/A-S/A/Y-S/Y-Y-S/A/Y-S/Y/T-GY-V/I (SEQ ID NO 17)的 CDR-L3 ；和 VH 结构域，其包括含有 GFTFS-N/A-RW-I/V-Y(SEQ ID NO :18)的 CDH-H1 ；含有 GIKTKP-N/A/T-I/R-YAT-E/ Q-YADSVKG (SEQ ID NO :19)的 CDR-H2 ；和含有 L/V-TG-M/K-R/K-YFDY (SEQ ID NO :20)的 ⑶R-Hl。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β工抗体包括VL结构域和VH结构域，所述VL结构域包括分别含有图3列出的序列的⑶R-L1，⑶R-L2，和⑶R-L3，所述VH结构域包括分别含有图3列出的序列的⑶R-H1，⑶R-H2，和⑶R-H3，即，这样的VL结构域，其包括含有SEQ ID NO 21，22，23，或M列出的序列的CDR-Ll，含有SEQ ID NO 25，洸，27，或沘列出的序列的 CDR-L2，和含有SEQ ID NO 29，30，31，或32列出的序列的CDR-L3 ；和这样的VH结构域，其包括含有SEQ ID NO: 34或35列出的序列的⑶R-Hl，含有SEQ ID NO :36或37列出的序列的CDR-H2，和含有SEQ ID NO :38，39，或40列出的序列的CDR-H3。在一些实施方案中， 所述抗-Qj1抗体包括含有SEQ ID NOS :3_8中任一项的VL结构域和含有SEQ ID NOS II-14中任一项的VH结构域。在一些实施方案中，所述抗-aJ1抗体包括含有SEQ ID NO: 4的VL结构域和含有SEQ ID NO :11的VH结构域。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β i抗体包括含有SEQ ID NO 5的VL结构域和含有SEQ ID NO 12的VH结构域。在一些实施方4案中，所述抗-Qj1抗体包括含有SEQ ID NO 6的VL结构域和含有SEQ ID NO 13的VH 结构域。在一些实施方案中，所述抗-a J1抗体包括含有SEQ ID NO :7的VL结构域和含有SEQ ID NO: 13的VH结构域。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β i抗体包括含有SEQ ID NO :8的VL结构域和含有SEQ ID NO: 14的VH结构域。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β i 抗体是人的、人源化的或嵌合的抗体。在一个实施方案中，所述抗- α 5β工抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，所述抗-Ci5^抗体与18C12抗体竞争结合Ci5^整合素。在一些实施方案中，所述单克隆抗体是嵌合抗体。在一些实施方案中，所述抗- α 5β工抗体是结合Cij1的抗体片段。在一些实施方案中，所述抗-a J1抗体选自Fab，Fab，，F (ab)，2， 单链Fv (scFv)，Fv片段；双抗体和线性抗体。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β工抗体是全长IgGl或全长IgG4。在一些实施方案中，所述抗- α 5β工抗体是双特异性抗体或多特异性抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗体结合VEGF和α J1，并且是VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述抗- α 5β工抗体具有改变的效应子功能。在一些实施方案中，改变所述抗-a J1抗体以减少或防止抗体依赖性细胞毒性(ADCC)或补体依赖性细胞毒性(CDC) 活性(例如，通过改变编码抗体Fc部分的核酸序列)。在一些实施方案中，抗体的Fc部分包括拟97Α置换。在一些实施方案中，所述抗-α 5 β工抗体已被修饰，从而增加或减少其在人中的半衰期(例如，通过改变编码抗体Fc部分的核酸序列)。在一些实施方案中，所述 α J1抗体是与另一种实体(例如，治疗剂或可检测的标记)缀合的免疫缀合物的一部分。 在一些实施方案中，所述治疗实体是细胞毒性剂(例如，放射性同位素，毒素，生长抑制剂， 或化疗剂)。在一些实施方案中，所述可检测的标记是荧光染料、放射性同位素、或酶。本专利技术的其它实施方案提供编码本文所述的任一种抗- α 5β i抗体的核酸分子， 包括所述核酸的表达载体，和包括所述核酸的宿主细胞。本专利技术的另一些其它实施方案提供产生本文所述的任一种抗-α 5 β工抗体的方法，所述方法包括培养所述宿主细胞，从而产生所述抗体。在一些实施方案中，所述方法还包括从所述宿主细胞回收所述抗体。本专利技术的另一些实施方案提供包括本专利技术的α J1抗体和药用载体的药物组合物。在一些实施方案中，所述药物组合物还包括至少一种、两种、三种、四种、或多种附加剂，其包括，例如，VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述附加剂选自细胞毒性剂、化疗剂、 生长抑制剂、或抗血管发生剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗体是贝伐珠单抗(bevacizumab)。本专利技术还提供包括检测Qj1(例如，在已经用VEGF拮抗剂治疗的受试者中)的使用说明的制品(articles α fmanufacture)禾口试剂盒。本专利技术的另一个实施方案提供治疗患有包括异常血管发生、血管通透性或血管渗漏的疾病或病症的受试者的方法。所述方法包括，向受试者施用治疗有效量的本文所述的抗-α 5β i抗体，由此治疗所述疾病或病症(例如，通过部分或完全抑制异常血管发生、血管通透性或血管渗漏)。在一些实施方案中，还向受试者施用VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂和所述抗-α 5 β i抗体同时给药。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂和所述抗-α 5β i抗体相继地给药。在一些实施方案中，所述疾病或病症响应VEGF拮抗剂治疗。在一些实施方案中，所述疾病或病症选自癌症，免疫疾病或眼科疾病。根据一个实施方案，所述疾病或病症选自实体瘤，转移性肿瘤，软组织肿瘤，具有眼睛新血管形成的疾病， 具本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种抗－α５β１抗体，其含有：包含ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３的ＶＬ结构域，和包含ＣＤＨ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ１的ＶＨ结构域，所述ＣＤＲ－Ｌ１含有ＴＬ－Ｓ／Ｔ－Ｓ／Ｐ／Ｔ－Ｑ／Ｎ－Ｈ－Ｆ／Ｓ－Ｔ／Ｉ－Ｙ－Ｋ／Ｔ－Ｉ－Ｇ／Ｄ／Ｓ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５）；所述ＣＤＲ－Ｌ２含有Ｌ／Ｉ－Ｎ／Ｔ－Ｓ－Ｄ／Ｈ／Ｓ－Ｇ／Ｓ－Ｓ／Ｌ／Ｔ－Ｈ／Ｙ－Ｎ／Ｋ／Ｑ／Ｉ－Ｋ／Ｔ－Ｇ／Ａ－Ｄ／Ｓ／Ｖ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６）；所述ＣＤＲ－Ｌ３含有Ｇ／Ａ－Ｓ／Ａ／Ｙ－Ｓ／Ｙ－Ｙ－Ｓ／Ａ／Ｙ－Ｓ／Ｙ／Ｔ－ＧＹ－Ｖ／Ｉ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７）；和所述ＣＤＨ－Ｈ１含有ＧＦＴＦＳ－Ｎ／Ａ－ＲＷ－Ｉ／Ｖ－Ｙ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８）；所述ＣＤＲ－Ｈ２含有Ｇ　ＩＫＴＫＰ－Ｎ／Ａ／Ｔ－Ｉ／Ｒ－ＹＡＴ－Ｅ／Ｑ－ＹＡＤＳＶＫＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９）；和所述ＣＤＲ－Ｈ１含有Ｌ／Ｖ－ＴＧ－Ｍ／Ｋ－Ｒ／Ｋ－ＹＦＤＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁伟庆，格雷戈里·D·普洛曼，吴岩，叶蔚蓝，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH