本发明专利技术涉及一种中药制备和检测方法，即接骨片及其鉴别和含量测定方法。包括乳香、川芎、当归、没药鉴别，阿魏酸含量测定。通过参数试验筛选，实现色谱条件较好、专属性及重现性良好、快速、经济实用；增加的阿魏酸含量测定方法，使得本方法专属性强，准确度高，作为川芎、当归的质量控制方法，易于控制，从而有效提高接骨片的产品质量，更好的保证接骨片产品的疗效。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种中药制备和检测方法，即。
技术介绍
在现有技术中，接骨片收入于《药品标准中药成方制剂第二册》(WS3-B-0402_90)， 处方。为四号铜粉2.34g，川芎39g，制川乌39g，当归39g，乳香(醋炙)39g，没药(醋炙)39g，自然铜(煅)39g。制法以上七味，四号铜粉、制川乌、乳香、没药、自然铜粉碎成细粉，过筛，混勻；川芎、当归照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，漉液回收乙醇，减压浓成缩膏。加入上述细粉及辅料，混勻，制成颗粒，60°C以下干燥，压制成1000片，包糖衣，即得。鉴别1、取本品3片，除去糖衣，研细，加硝酸5ml，搅勻，再加水5ml，滤过。取滤液Iml加水細1，加亚铁氰化钾1 2滴，即生成蓝色沉淀。另取滤液Iml加水細1，加硫氰酸铵试液1滴，即显血红色。2、取本品2片，除去糖衣，研细，加乙醚6ml浸渍，时加振摇，滤过滤液挥尽乙醚，将残留物与发烟硝酸蒸气接触，即显紫褐色。功能与主治散瘀、活血、止痛。用于跌打损伤、筋伤骨折，瘀血肿痛。缺点是原标准中鉴别项少，缺少含量测定，不利于接骨片药品生产控制和质量监督，药效也就很难保证，不利于患者用药安全。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述不足而提供一种完善鉴别和含量测定、保证质量的接骨片鉴别和含量测定的方法。本专利技术的技术解决方案接骨片的鉴别和含量测定方法接骨片由四号铜粉 2. 34g，川芎39g，制川乌39g，当归39g，醋炙乳香39g，醋炙没药39g，煅自然铜39g原料药制成1000片；制备方法为以上七味，四号铜粉、制川乌、乳香、没药、自然铜粉碎成细粉，过筛混勻；川芎、当归照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，漉液回收乙醇，减压浓缩成膏；加入上述细粉及辅料，混勻，制成颗粒，60°C以下干燥，压制成1000 片，包糖衣，即得；其特征在于鉴别和含量测定方法如下一、鉴别(1)取本品3片，除去糖衣，研细，加硝酸5ml，搅勻，再加水5ml，滤过，取滤液Iml， 加水細1，加亚铁氰化钾试液1-2滴，即生成蓝色沉淀。另取滤液1ml，加水細1，加硫氰酸铵试液1滴，即显血红色(保留了已有技术中鉴别方法)。(2)取本品M片，除去糖衣，研细，加乙醚50ml，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至anl，作为供试品溶液；另取乳香对照药材0. 5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚30 60°C -醋酸乙酯=85 15为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(3)取本品M片，除去糖衣，研细，加甲醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水4浴蒸干，水浴温度80 90°C (温度过高或加热时间过长，成分会发生聚合)，残渣加水30ml 分散，水液转移至分液漏斗中，用三氯甲烷振摇提取2次，弃去三氯甲烷液，水层用乙醚振摇提取2次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0. 5g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液8 10 μ 1及对照药材溶液10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，105°C活化30分钟(将薄层板在 105°C活化使用以保证分离的重现性)，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸=10 1 0.5 1 上层溶液为展开剂(在105°C加热至斑点显色清晰的薄层色谱条件较好)，饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点(上述薄层鉴别方法可行，专属性及重现性良好)；(4)取当归对照药材0. 25g，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇0. 5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及上述 “鉴别⑶”项下的供试品溶液5 8μ 1及对照药材溶液10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上105°C活化30分钟(温度和湿度对实验结果有影响，所以应将薄层板活化)，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸=10 0.5 0.3 0.5上层溶液为展开剂，饱和20分钟(15 20分钟)，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇溶液 (1 — 2)，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点(实现色谱条件较好、专属性及重现性良好)；(5)取本品8片，除去糖衣，研细，加石油醚60 90°C 15ml，超声处理5分钟， 滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取没药对照药材0. Ig, 加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液3μ 1及对照药材溶液10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，105°C活化30分钟，以甲苯-丙酮-甲酸= 8 0.8 1.5上层溶液为展开剂，置层析缸中饱和20分钟，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热约8 10分钟至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；二、含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0. 磷酸溶液=150 850，PH应为2. 6为流动相，检测波长为313nm，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取阿魏酸对照品约Umg，精密称定，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，精密吸取5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制成每Iml含阿魏酸0. 013mg的溶液，摇勻，即得；供试品溶液的制备取本品30片，除去糖衣，精密称定，研细，取约3g，精密称定， 置索氏提取器中，加甲醇80ml，回流提取4小时，回收甲醇至干，残渣加水20ml，用氨试液调 PHlO 11，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去乙醚层，水层用盐酸调pH2 3，用醋酸乙酯提取5次，每次20ml，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取3次，每次30ml，合并提取液，用盐酸调pH2 3，用醋酸乙酯提取4次，每次30ml，合并提取液，蒸干，加甲醇使溶解并稀释至 5ml量瓶中，摇勻，即得；测定分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得；本品每片含川芎、当归以阿魏酸计，化学式为CltlHltlO4计，不得少于3. 0μ g。本专利技术的优点是新增加了乳香、川芎、当归的鉴别方法，改良了没药的鉴别方法， 通过参数试验筛选，实现色谱条件较好、专属性及重现性良好、快速、经济实用；还增加了阿魏酸含量测定方法，使得本方法专属性强，准确度高，作为川芎、当归的质量控制方法，易于控制，从而有效提高接骨片的产品质量，更好的保证接骨片产品的疗效。下面将结合实施例对本专利技术的实施方本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种接骨片的鉴别和含量测定方法，接骨片由四号铜粉２．３４ｇ，川芎３９ｇ，制川乌３９ｇ，当归３９ｇ，醋炙乳香３９ｇ，醋炙没药３９ｇ，煅自然铜３９ｇ原料药制成１０００片；制备方法为：以上七味，四号铜粉、制川乌、乳香、没药、自然铜粉碎成细粉，过筛混匀；川芎、当归照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法用７０％乙醇作溶剂，进行渗漉，漉液回收乙醇，减压浓缩成膏；加入上述细粉及辅料，混匀，制成颗粒，６０℃以下干燥，压制成１０００片，包糖衣，即得；其特征在于鉴别和含量测定方法如下：一、鉴别：（１）取本品３片，除去糖衣，研细，加硝酸５ｍｌ，搅匀，再加水５ｍｌ，滤过，取滤液１ｍｌ，加水４ｍｌ，加亚铁氰化钾试液１－２滴，即生成蓝色沉淀。另取滤液１ｍｌ，加水４ｍｌ，加硫氰酸铵试液１滴，即显血红色；（２）取本品２４片，除去糖衣，研细，加乙醚５０ｍｌ，超声处理１０分钟，滤过，滤液浓缩至２ｍｌ，作为供试品溶液；另取乳香对照药材０．５ｇ，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各２μｌ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以石油醚３０～６０℃－醋酸乙酯＝８５∶１５为展开剂，展开，取出，晾干，喷以５％香草醛硫酸溶液，在１０５℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；（３）取本品２４片，除去糖衣，研细，加甲醇５０ｍｌ，超声处理２０分钟，滤过，滤液置水浴蒸干，水浴温度８０～９０℃，残渣加水３０ｍｌ分散，水液转移至分液漏斗中，用三氯甲烷振摇提取２次，弃去三氯甲烷液，水层用乙醚振摇提取２次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇１ｍｌ使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材０．５ｇ，加甲醇２０ｍｌ，超声处理２０分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇１ｍｌ使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液８～１０μｌ及对照药材溶液１０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，１０５℃活化３０分钟，以甲苯－乙酸乙酯－丙酮－甲酸＝１０∶１∶０．５∶１上层溶液为展开剂，饱和１５分钟，展开，取出，晾干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，在１０５℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（４）取当归对照药材０．２５ｇ，加甲醇１０ｍｌ，超声处理２０分钟，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇０．５ｍｌ使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及上述“鉴别（３）”项下的供试品溶液５～８μｌ及对照药材溶液１０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上１０５℃活化３０分钟，以甲苯－丙酮－乙酸乙酯－甲酸＝１０∶０．５∶０．３∶０．５上层溶液为展开剂，饱和２０分钟，展开，取出，晾干，喷以１％香草醛硫酸乙醇溶液，在１０５℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（５）取本品８片，除去糖衣，研细，加石油醚６０～９０℃ １５ｍｌ，超声处理５分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇２ｍｌ使溶解，作为供试品溶液；另取没药对照药材０．１ｇ，加甲醇１０ｍｌ，超声处理２０分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇１ｍｌ使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液３μｌ及对照药材溶液１０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，１０５℃活化３０分钟，以甲苯－丙酮－甲酸＝８∶０．８∶１．５上层溶液为展开剂，置层析缸中饱和２０分钟，展开，取出，晾干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，在１０５℃加热约８～１０分钟至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；二、含量测定：照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈∶０．１％磷酸溶液＝１５０∶８５０，ｐＨ应为２．６为流动相，检测波长为３１３ｎｍ，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于３０００；对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品约１３ｍｇ，精密称定，置１００ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取５ｍｌ，置５０ｍｌ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制成每１ｍｌ含阿魏酸０．０１３ｍｇ的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备：取本品３０片，除去糖衣，精密称定，研细，取约３ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇８０ｍｌ，回流提取４小时，回收甲醇至干，残渣加水２０ｍｌ，用氨试液调ｐＨ１０～１１，用乙醚提取３次，每次２０ｍｌ，弃去乙醚层，水层用盐酸调ｐＨ２～３，用醋酸乙酯提取５次，每次２０ｍｌ，合并提取液，用２％碳酸钠溶液提取３次，每次３０ｍｌ，合并提取液，用盐酸调ｐＨ２～３，用醋酸乙 酯提取４次，每次３０ｍｌ，合并提取液，蒸干，加甲醇使溶解并稀释至５ｍｌ量瓶中，摇匀，即得；测定：分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各１０μｌ，注入液相色谱仪，测定，即得。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：姜华，
申请(专利权)人：通化正和药业有限公司，
类型：发明
国别省市：22
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