治疗自体免疫和炎性病症的可溶性多肽制造技术

本发明专利技术涉及用作药物，特别是用于预防或治疗自体免疫和炎性病症如过敏性哮喘和炎性肠病的可溶性ＣＤ４７结合多肽。本发明专利技术更具体地涉及用作药物的可溶性ＣＤ４７结合多肽，其包含ＳＩＲＰα（ＣＤ１７２ａ）的胞外结构域或其结合人ＣＤ４７的功能衍生物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗自体免疫和炎性病症的可溶性多肽本专利技术涉及用作药物，特别是用于预防或治疗自体免疫和炎性病症如过敏性哮喘和炎性肠病的可溶性CD47结合多肽。本专利技术更具体地涉及用作药物的可溶性CD47结合多肽，其包括SIRPa (⑶17 )的胞外结构域或其结合人⑶47的功能衍生物。⑶47是一种细胞表面糖蛋白，其结合相对细胞的SIRP α (又称作SHPS-1)和 SIRP γ。这一相互作用造成对免疫细胞功能的负调控或者可以用于介导细胞粘附和迁移。 提出将⑶47用于治疗自体免疫病症的生物产品(W01999/040940)。相反，对⑶47配体(如 SIRP α )用于相似治疗目的的潜在用途少有证据。一种解释是⑶47的广泛表达将阻止⑶47 结合多肽用作潜在药物。Yu等人，2006(J Invest Dermatol，126，797-807)所示的数据表明通过将SIRP α的胞外结构域融合免疫球蛋白Fc结构域得到的融合蛋白在小鼠中可以防止从源自皮肤的树突细胞(DC)迁移至引流淋巴结，并从而(至少部分地)减弱小鼠的接触性过敏反应。DC的迁移和功能对于免疫或炎性应答是至关重要的。在疾病状况下，DC的这些加剧的应答可以造成疾病的永存。干扰病原性DC从组织迁移到淋巴器官对于停止引起自体免疫或炎性疾病的恶性循环将是很有吸引力的机会。本专利技术首先提供了在疾病动物模型中，511^^呼(构建体适于预防或停止1111/11117以及Th2所引起的疾病的体内证据。这些数据提供了本专利技术的基础并且支持了源自SIRPa的蛋白疗法的可药性。本专利技术部分地基于下述发现对于CD47/SIRPci通路的操作会抑制免疫原性CD103l〗i突细胞推进的Thl/ Thl7引起的疾病(关节炎和结肠炎)以及Th2引起的疾病(过敏性哮喘)的病理。这些新的发现提供了对于之前未知的疾病潜在成因的共同机制并且代表了对于多种自体免疫和炎性病症的治疗前景。此外，在近来发表的报告中的证据表明CD47的配体对于治疗若干种癌症可能是有益的(Majeti等人，Cell 2009)。但是该报告表明了⑶47抗体的应用，而本专利技术涉及源自SIRPa的多肽在治疗这些疾病中的应用。因此，一方面，本专利技术提供用作药物的可溶性CD47结合多肽，包含选自下组的源自SIRPa的多肽a)SIRPa的胞外结构域(SEQ ID NO 3) ；b)SEQ ID NO 1的片段，和c) 与SEQ ID NO :3具有至少75%同一性的SEQID NO 1的变体多肽；其中所述源自SIRP α的多肽结合人CD47 (SEQ IDNO :24)。在某些实施方式中，SEQ ID NO :3的变体多肽与SEQ ID NO 3具有至少80%、85%、90%、95%或99%的同一性。为了便于阅读，下文将本专利技术的可溶性CD47结合多肽称作“本专利技术的可溶性多肽”。在一个实施方式中，所述源自SIRPa的多肽选自⑶47的拮抗剂，即，竞争性抑制 CD47配体与CD47结合的多肽。CD47配体包含但不限于SIRP a、SIRP γ或TSPl。在另一实施方式中，所述源自SIRPa的多肽选自⑶47的激动剂，即能够诱导⑶47 信号活性的多肽。在一个实施方式中，所述可溶性⑶47结合多肽选自以2 μ M或更小的Kd与人⑶47 结合和/或由在免疫复合物刺激的树突细胞细胞因子释放检测中所测量的抑制所诱导的细胞因子分泌的那些。在另一实施方式中，所述源自SIRP α的多肽是包含至少SIRP α的V区的SIRP a胞外结构域(SEQ ID NO 2)。在某些实施方式中，本专利技术的可溶性多肽是一种融合多肽，包含由与第二异源多肽融合的源自SIRPa的多肽组成的第一组分。在一个实施方式中，该可溶性多肽进一步包含在第二异源多肽和源自SIRPa的多肽之间的间隔区。在一个具体实施方式中，源自 SIRPa的多肽与IgG Fc结构域融合。在优选的实施方式中，所述Fc结构域是人IgGl同种型的沉默Fc片段。在一个实施方式中，所述Fc结构域是人IgGl同种型的无糖基化 (aglycosylated)突变变体。在另一相关实施方式中，本专利技术的可溶性多肽用作治疗自体免疫和炎性病症的药物。优选的适应症选自Th2-介导的气道炎症、过敏性病症、哮喘、炎性肠病和缺血性疾病。 此外，本专利技术的可溶性多肽可用作治疗白血病或癌症的药物。为了可以更加容易地理解本专利技术，首先定义某些术语。其他定义在详细说明中提出O术语CD47指人CD47。人CD47包含SEQ ID NO :24，以及人CD47的任何天然多态性，例如包含单核苷酸多态性(SNP)或剪接变体。在人类中发现的CD47核苷酸序列的剪接变体或SNP的实例描述于表1。表1:⑶47蛋白的变体变体类型变体ID说明剪接变体NP_001768.1 NP_942088.1 NP_001020250.1 ENSP00000381308参照；最长变体；序列NO:2 不同的，较短的C-末端不同的，较短的C-末端不同的，较短的C-末端单核苷酸多态性rsl1546646 ENSSNP12389584DNA: C或G;蛋白质A或P (NP_001768.1 的位置 96) DNA: C或G;蛋白质V或L (NP_001768.1 的位置 246)术语SIRPa指显示出与⑶47整联蛋白相关联蛋白粘附的信号调控蛋白α (也称作⑶17 或SHPS-1)。在一些实施方式中，术语SIRP α指如SEQ ID NO :23所限定的人SIRP α。人SIRP α含有氨基酸胞外结构域(SEQ ID NO :3)，具有一个V-型结构域(SEQ ID NO :2)，和两个Cl型Ig结构域以及三个潜在的N-糖基化位点。它具有110个氨基酸胞质序列，具有ITIM模体，当磷酸化时ITIM模体募集酪氨酸磷酸酶SHP-I和SHP-2。术语人 SIRPa还包含但不限于任何天然的多态性，例如包含人SIRP α的单核苷酸多态性(SNP)或剪接变体。在人类中发现的SIRP α核苷酸序列的剪接变体或SNP的实例描述于表2。表2 :SIRPa蛋白的变体权利要求1.一种用作药物的可溶性⑶47结合多肽，包含选自下组的源自SIRP α的多肽a)SIRP α 的胞外结构域(SEQ ID NO 3)；b)SEQID NO 3的片段，和c)与SEQID NO 2具有至少75%同一性的SEQ ID NO 3的变体多肽；其中所述源自SIRPa的多肽结合人CD47(SEQ ID NO :24)。2.根据权利要求1的可溶性CD47结合多肽，其中所述可溶性CD47结合多肽以2μ M或更小的Kd与人CD47结合，并且如由免疫复合物刺激的树突细胞细胞因子释放检测所测量， 抑制所诱导的细胞因子分泌。3.根据权利要求1或2的可溶性CD47结合多肽，其中所述源自SIRPa的多肽是与IgG Fc片段融合的。4.根据权利要求1、2或3的可溶性CD47结合多肽，其中所述IgGFc片段是突变的未糖基化的Fc片段。5.根据前述权利要求中任一项的可溶性CD47结合多肽，其中所述SIRPα的胞外结构域包含至少SIRP α的V区(SEQ ID NO :2)。6.根据前述权利要求中任一项的可溶性CD47结合多肽，用作治疗自身免疫和炎性病症的药物。7.根据权利本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用作药物的可溶性ＣＤ４７结合多肽，包含选自下组的源自ＳＩＲＰα的多肽：ａ）ＳＩＲＰα的胞外结构域（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３）；ｂ）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３的片段，和ｃ）与ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２具有至少７５％同一性的ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３的变体多肽；其中所述源自ＳＩＲＰα的多肽结合人ＣＤ４７（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·雷蒙德，
申请(专利权)人：诺瓦提斯公司，
类型：发明
国别省市：CH