抗禽流感病毒剂及含有抗禽流感病毒剂的产品制造技术

一种抗禽流感病毒剂，含有作为活性成分的组分，所述组分使用主要由水和亲水性有机溶剂的至少一种的组成的萃取溶剂从番石榴中萃取的番石榴提取物经过高效液相色谱（ＨＰＬＣ）在特定条件下分离而获得。所述特定条件包括使用ＯＤＳ柱，所述番石榴提取物施加至ＯＤＳ柱后的１５分钟内以甲醇的浓度为２０％的水－甲醇混合物作为流动相洗脱，随后的１５到３０分钟期间使用甲醇浓度为４０％的水－甲醇混合物作为流动相。供选地，特定条件还包括所述番石榴提取物施加至ＯＤＳ柱后的第３０到４５分钟时间内使用甲醇浓度为６０％的水－甲醇混合物作为流动相。包含在抗禽流感病毒剂中的组分在番石榴提取物施加到ＯＤＳ柱后第２０分钟内或在随后的第２０到３５分钟期间内从该柱洗脱。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗禽流感病毒剂和含有抗禽流感病毒剂的产品。
技术介绍
禽流感病毒为流感病毒A的通用名，主要感染鸟类，野生水鸟为其天然的宿主。一些禽流感病毒感染家禽，例如鸡、鹌鹑和火鸡，导致高致病性感染。养鸡业正面临着来自这些高致病性禽流感病毒的全球性威胁。尽管已经开展了对预防禽流感病毒感染的疫苗的开发和研究(见例如，专利文献 1)，目前尚没有能完全预防禽流感病毒感染的疫苗。所以当禽流感病毒感染实际爆发时，实际采取的措施是立即消灭爆发点几公里半径内家禽。H5m亚型病毒是一种禽流感病毒的亚型，已经有报导人在与大量病毒接触或由于宿主的易感染的体质而出现H5m亚型病毒的感染。现有技术文献专利文献1 日本国家阶段专利特许公开号2008-515906
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题本专利技术的专利技术人进行了多项研究，结果发现得自番石榴提取物的组分具有抗禽流感病毒作用。本专利技术基于该发现完成。本专利技术的目的是提供具有良好的抗禽流感病毒作用的抗禽流感病毒剂和含有该抗禽流感病毒剂的产品。解决该技术问题的手段为实现上述目的，本专利技术的一个方面提供了抗禽流感病毒剂，其含有作为活性成分的组分，所述组分使用主要由水和亲水性有机溶剂的至少一种的组成的萃取溶剂从番石榴中提取的番石榴提取物经过高效液相色谱(HPLC)在特定条件下分离而获得。特定条件包括使用内径20mm和长度250mm的ODS柱，在番石榴提取物施加至ODS柱后的15分钟内以甲醇浓度为20%的水-甲醇混合物作为流动相，随后的15到30分钟使用甲醇浓度为40% 的水和甲醇混合物为流动相，流动相的流速为lOmL/min。包含在抗禽流感病毒剂中的该组分在番石榴提取物施加至ODS柱后的第20分钟内从ODS柱中洗脱。本专利技术的另一方面提供了抗禽流感病毒剂，其含有作为活性成分的组分，所述组分在番石榴提取物施加至ODS柱后的第20到35分钟时间内从ODS柱洗脱，其中特定条件还包括在番石榴提取物施加至ODS柱后的第30到45分钟使用含有甲醇浓度为60%的水-甲醇混合物作为流动相。本专利技术的又一方面提供了包含抗禽流感病毒剂的产品，该产品含有上述抗禽流感病毒剂。本专利技术的技术效果本专利技术提供具有良好的抗禽流感病毒作用的抗禽流感病毒剂和含有抗禽流感病毒剂的产品。 附图说明图1 (a)显示用于分离番石榴提取物的高效液相色谱的流动相的梯度曲线图；图1 (b)为番石榴提取物的高效液相色谱分离获得的HPLC图谱；图2(a)为用于样品A到F和样品Mx的高效液相色谱分析中的流动相的梯度曲线图；图2 (b)为样品Mx的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图2 (c)为样品A的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图2 (d)为样品B的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图3 (a)为样品C的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图3 (b)为样品D的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图3 (c)为样品E的高效液相色谱分析获得的HPLC图；图3 (d)为样品F的高效液相色谱分析获得的HPLC图；和图4(a)和4(b)为显示病毒样品混合物中番石榴提取物的组分浓度与测量的荧光强度之间的关系的图。具体实施例方式将在下文中详细描述本专利技术的一个实施方式。根据该实施方式的抗禽流感病毒剂含有作为活性成分的组分，使用特定的萃取溶剂从番石榴(Psidium Guajava Linn)提取的番石榴提取物在特定的条件下通过高效液相色谱分离时，经特定的洗脱时间而获得该组分。番石榴，在日本也称banjiro或banzakuro，是一种原产于热带地区的桃金娘科的番石榴属常绿小乔木。番石榴自然生长在，例如，加勒比海沿岸、中美洲、南美洲北部和东南亚，种植在温暖的地方，例如日本的冲绳岛。可使用番石榴的任何器官或任何器官的组分作为用于番石榴提取物的提取原料。 提取原料可以是番石榴的单个器官或其组分或番石榴的两种或更多种器官或其组分的组合物。为获得具有良好的抗禽流感病毒作用的番石榴提取物，提取原料优选至少含有番石榴的叶或茎。用于提取的原料在如下状态时进行提取操作收获后状态，收获后破碎、粉碎、或研磨状态，收获后干燥状态，收获干燥后破碎、粉碎、或研磨状态，收获后破碎、粉碎、或研磨再干燥的状态。为有效进行萃取，用于提取的原料优选是破碎的。为获得具有良好的抗禽流感病毒作用的番石榴提取物，用于提取的原料优选为原叶。用于从原材料中提取番石榴提取物的萃取溶剂主要由水和亲水性有机溶剂的至少一种组成。即萃取溶剂中的水和亲水性有机溶剂的至少一种以最高比例存在(体积％)。 萃取溶剂中水或亲水性有机溶剂的含量优选为50体积％或更高，更优选为70体积％或更高。当萃取溶剂同时含有水和亲水性有机溶剂时，水和亲水性有机溶剂的总含量优选为50 体积％或更高，更优选为70体积％或更高。萃取溶剂中亲水性有机溶剂的实例包括低级醇(例如甲醇和乙醇)、丙酮和乙酸乙酯。萃取溶剂可仅含有一种亲水性有机溶剂或两种或更多种亲水性有机溶剂。萃取溶剂可包含少量的除了水和亲水性有机溶剂外的溶剂。可在萃取溶剂中溶解有，例如，有机盐、 无机盐、缓冲剂或乳化剂。通过将用于提取的原料浸入到萃取溶剂中预定的时间进行番石榴提取物的萃取。 此时若有必要，可搅拌、加热或加压提取溶剂。总的说来，当提取温度升高，萃取需要的时间就减少。例如，当在室温、1到2个大气压下，萃取时间长达10天，在50到130°C下萃取仅需0. 05到2小时或者0. 1到0. 3小时。萃取条件可根据用于提取的原料的状况或萃取溶剂的种类做适当改变。从原料萃取的番石榴提取物经过固-液分离以分离和除去提取用的原料的残余物。例如，可通过已知的方法例如过滤或离心进行固-液分离。通过固-液分离除去固体，随后番石榴提取物经过高效液相色谱在特定条件下分离。在高效液相色谱分离中使用内径为20mm和长度为250mm的ODS柱。ODS柱用固相填充，例如，表面用含有18个碳原子的十八烷基硅烷基团修饰的化学键合多孔球形硅胶。ODS 柱可为，例如，YMC Co. ,Ltd.生产的SH-343-5(硅胶颗粒大小为5μπι，缝直径为12nm)。使用水和甲醇的混合溶剂作为流动相。当番石榴提取物施加至ODS柱后，混合溶剂中的甲醇浓度随着预定时间按照图1(a)所示的梯度曲线分步改变。具体地，在番石榴提取物施加至ODS柱后15分钟时间内(0到15分钟)混合溶剂的甲醇浓度为20%，接下来的15到30 分钟时间内为40%，再接下来的30到45分钟时间内为60%。流动相的流速设定为IOmL/ min，柱温优选为室温(25°C )。本实施方式的抗禽流感病毒剂含有作为活性成分的组分，该组分在番石榴提取物施加至ODS柱后20分钟(0到20分钟)的第一个时间段内从ODS柱洗脱的组分，或在接下来的20到35分钟的第二个时间段内从ODS柱洗脱的组分。抗禽流感病毒剂可以是在第一个时间段或第二个时间段从ODS柱洗脱的洗脱液，或是通过已知的干燥处理例如冷冻干燥将洗脱液粉末化获得的产物。粉末化第一个时间段的洗脱液获得的产物为棕红色，微粘，而粉末化第二个时间段的洗脱液获得的产物为棕红色，粉末状。抗禽流感病毒剂可施加到用于抗禽流感病毒作用的产品中。这种包含抗禽流感病毒剂的产品的实例包括医疗剂(包括药品)、清洁剂、化妆品、医疗器械、本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种抗禽流感病毒剂，其特征为含有作为活性成分的组分，所述组分是将使用主要由水和亲水性有机溶剂中的至少一种组成的萃取溶剂从番石榴中提取的番石榴提取物经过高效液相色谱在特定条件下分离而获得的，其中所述特定条件包括使用内径２０ｍｍ和长度２５０ｍｍ的ＯＤＳ柱，所述番石榴提取物施加至ＯＤＳ柱后的１５分钟内使用甲醇浓度为２０％的水－甲醇混合物作为流动相，随后的１５到３０分钟期间使用甲醇浓度为４０％的水－甲醇混合物作为流动相，所述流动相的流速为１０ｍＬ／分钟，其中包含在所述抗禽流感病毒剂中的所述组分在所述番石榴提取物施加至ＯＤＳ柱后至第２０分钟的时期内从ＯＤＳ柱中洗脱。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】JP2008-2621992008年10月8日1.一种抗禽流感病毒剂，其特征为含有作为活性成分的组分，所述组分是将使用主要由水和亲水性有机溶剂中的至少一种组成的萃取溶剂从番石榴中提取的番石榴提取物经过高效液相色谱在特定条件下分离而获得的，其中所述特定条件包括使用内径20mm和长度250mm的ODS柱，所述番石榴提取物施加至ODS柱后的15分钟内使用甲醇浓度为20%的水-甲醇混合物作为流动相，随后的15到30分钟期间使用甲醇浓度为40%的水-甲醇混合物作为流动相，所述流动相的流速为IOmL/分钟，其中包含在所述抗禽流感病毒剂中的所述组分在所述番石榴提取物施加至ODS柱后至第20分钟的时期内从ODS柱中洗脱。2.根据权利要求1所述的抗禽流感病毒剂，其中在所述番石榴提取物施加至ODS柱后至第20分钟的时期内从ODS柱洗脱的包含在所述抗禽流感病毒剂中的所述组分是经聚乙烯聚吡咯烷酮处理的。3.一种抗禽流感病毒剂，其特征为含有作为活性成分的组分，所述组分是将使用主要由水和亲水性有机溶剂中的至少一种组成的萃取溶剂从番石榴中提取的番石榴提取物经过高效液...

【专利技术属性】
技术研发人员：福本修一，
申请(专利权)人：百佳株式会社，
类型：发明
国别省市：JP