抗－ＮＯＴＣＨ２抗体和使用方法技术

本发明专利技术提供抗－Ｎｏｔｃｈ抗体，并且具体地，结合Ｎｏｔｃｈ２ＮＲＲ的抗体，以及使用所述抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般涉及分子生物学领域。更具体地，本专利技术涉及抗-Notch抗体，包括抗-Notch2负调节区(NRR)抗体，及其应用。还提供了抗-NotchlNRR抗体和使用方法。背景Notch受体家族是一类进化上保守的跨膜受体，其传递影响广至海胆和人的生物的发育的信号。Notch受体和它们的配体，δ和krrate(在哺乳动物中已知为Jagged) 是跨膜蛋白，其具有包含表皮生长因子(EGF)样重复序列的大的细胞外结构域。Notch同源物(paralogue)的数目在不同的物种之间不同。例如，在哺乳动物中存在四种Notch受体(Notchl-Notch4)，在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)中存在两种(LIN-12 和 GLP-1)，并且在黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中存在一种(Notch)。Notch 受体在运输到细胞表面的过程中，通过弗林蛋白酶样蛋白酶在跨膜结构域的N端侧的位点Sl进行蛋白水解处理，产生细胞外Notch(ECN)亚基和Notch跨膜亚基(NTM)。这两个亚基保持非共价缔合并且构成成熟的异二聚体细胞表面受体。Notch受体和Notch信号传导途径的综述例如见于 Aster 等，Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 3 :587_613，2008，和 Bolos 等，内分泌学综述(Endocrine Reviews) 28 :339_363，2007。Notch2ECN亚基包含36个N-端EGF-样重复序列，后接三个在Sl位点之前的串联重复的Lin 12/Notch重复序列(LNI )组件。每个LNR组件包含三个二硫键和一组预期与钙离子配位的保守的酸性和极性残基。在EGF重复序列区域中，存在关于激活配体的结合位点。Notch2NTM包含细胞外区域(其携有S2裂解位点)，跨膜区段(其携有S3裂解位点)，和包含RAM23结构域，6个锚蛋白重复序列，反式激活结构域和羧基端PEST序列的较大细胞内部分。ECN和NTM亚基的稳定的缔合取决于异二聚体结构域(HD)，所述异二聚体结构域包含ECN的羧基端末端(术语HD-N)和NTM的细胞外氨基端末端(术语HD-C)。在配体诱导的激活前，Notch通过负调节区(NRR)以休眠构象维持，所述负调节区(NRR)包含三个LNRs和HD结构域。Notch2NRR的晶体结构在Gordon等，(2007)自然结构分子生物学 (Nature Structural&Molecular Biology) 14 :295_300，2007 中进行报道。Notch配体与ECN亚基的结合起始两个通过调节的膜内蛋白水解发生的连续的蛋白水解裂解。在位点S2由金属蛋白酶(ADAM17)进行的第一次裂解使Notch跨膜亚基对接近于质膜的内小叶(inner leaflet)的位点S3的第二次裂解敏感。位点S3的裂解，由包含早老蛋白和呆蛋白并促进Y-分泌酶活性的多蛋白复合物催化，释放Notch跨膜亚基的细胞内部分，使其移动到细胞核并激活靶基因的转录(关于Notch的蛋白水解裂解的综述， 见例如 Sisodia 等，神经科学的自然综述(Nat. Rev. Neurosci.) 3 :281-290, 2002.)。已经在人中鉴定了 5种Jagged和δ -样类Notch配体(Jaggedl (也称为 Serratel)，Jagged2 (也称为 Serrate2)，δ -样 1 (也称为 DLL1)，δ -样 3 (也称为 DLL3)， 和δ-样4(也称为DLL4))。每种配体是一种单向(single-pass)跨膜蛋白，其具有对于结合Notch是必需的保守N-端δ，Serrate, LAG-2 (DSL)基序。在DSL基序C端的一系列 EGF样组件在跨膜区段之前。不象Notch受体，配体在C端具有70-215个氨基酸的短细胞质尾。此外，已经报道了其它类型的配体(例如，DNER，NB3，和F3/接触蛋白)。关于Notch配体和配体介导的Notch激活的综述例如见D，Souza等，癌基因(Oncogene) 27 :5148-5167, 2008)Notch途径在两翼昆虫(flies)和脊椎动物中的包括影响神经发生的那些的广泛发育和生理过程中发挥功能。一般地，Notch信号传导涉及侧抑制、谱系确定以及在细胞的组之间建立边界(见，例如Bray，分子细胞生物学(Molecular Cell Biology) 7 :678-679, 2006)。已经显示多种人疾病，包括癌症和神经变性疾病，由编码Notch受体或其配体的基因中的突变导致(见，例如，Nam等，Curr. Opin. Chem. Biol. 6 =501-509, 2002) 当在人急性淋巴母细胞白血病(acute lymphoblastic leukemias) (T-ALL)的子集中鉴定产生人 Notchl的截短的，组成性活性的变体的复发的t (7 ；9) (q34 ；q34. 3)染色体易位时，首次识别在不可抑制的Notch信号传导和恶性肿瘤之间的关联(见，例如，Aster等，Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 3 :587-613,2008)。在小鼠模型中，已经显示Notchl信号传导对于T细胞发育是必需的并且Notchl-介导的信号在损害B细胞发育的情况下促进T细胞发育(见， 例如，Wilson 等，J. Exp. Med. 194 1003-1012，2001)。Notch2还涉及某些癌症。特别地，Notch2在B-细胞慢性淋巴细胞性白血病 (chronic lymphocytic leukemia) (B-CLL)中过量表达，这又导致了 CD23，即一种 B-CLL 细胞标记的过量表达。(见Hubmann等，血液(Blood) 99 :3742-3747, 2002.)。两种Notchl和 Notch2在多发性骨髓瘤(multiple myeloma)细胞(癌性血浆B细胞)中高度表达，并且用配体的刺激强烈增加肿瘤细胞生长(见Jundt等，血液(Blood) 103 :3511-3515，2004.)。 Notch2和下游效应物在黑素瘤中过量表达(见Hoek等，癌症研究(Cancer Res). 64 5270-5沘2，2004 ;Seykora 等，Am J Dermatopathol 25 :6_11，2003)，和 Notch2 基因座重复地在黑素瘤细胞系中扩增(Jonsson等，癌基因(Oncogene), 26 =4738-4748, 2007) 此外， 许多研究将异常的Notch2信号传导与乳腺癌和其它实体瘤相关联(由Leong和Karsay， 血液(Blood) 107 =2223-2233, 2006综述)。Notch2对于边缘区B细胞发育也是需要的(见 Pillai 等，Annu. Rev. Immunol. 23 :161-196,2005.)。考虑到Notch信号传导涉及多种多样的人类疾病，因此显然继续存在对于调节 Notch信号传导和具有有利于发育的临床品质的作为治疗剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种单克隆抗体，其结合Ｎｏｔｃｈ２ＮＲＲ并抑制Ｎｏｔｃｈ２活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯蒂安·W·西贝尔，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH