多特异性抗体制造技术

本发明专利技术提供多特异性抗体和制备以及使用此类抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及多特异性抗体，以及制备和使用此类抗体的方法。
技术介绍
抗体是脊椎动物免疫系统应答异源蛋白、糖蛋白、细胞或其它抗原性异物的攻击 产生的特异性免疫球蛋白多肽。这一过程的重要部分是产生特异性结合至特定异物的抗 体。此类多肽对特定抗原的结合特异性是高度精制的，个体脊椎动物能够产生的特异性众 多，在其复杂性和变异性方面是显著的。成千上万的抗原能够激发应答，每种应答几乎唯一 地指向激发该应答的特定抗原。特异性抗原识别对抗体在适应性免疫应答中发挥功能是必需的。重链(HC)和轻 链(LC)的组合联合在所有脊椎动物抗体库的产生中是保守的。然而，在两条链中存在不对 称性。HC可变域(Vh)含有显著更高的序列多样性，并且比LC可变域更经常地贡献抗 原决定簇识别。LC在确定抗原特异性中的作用通过称为受体编辑的过程显示。\基因进行 性重组以编辑B细胞受体，这是纠正自身反应性抗体前体的主要机制，该前体似乎构成初 始库的重要部分( 75%)。证明对轻链的改变将不需要的特异性或多特异性结合清除。抗体和抗体片段对特定抗原或多种抗原的特异性使得抗体成为理想的治疗剂。抗 体和抗体片段可用于靶向特定组织，例如肿瘤，并由此使非特异性靶向的可能副作用最小 化。因此，目前存在并且持续存在鉴定和表征治疗性抗体，特别是在治疗癌症和其它增殖性 病症中有用的抗体、片段及其衍生物的需要。专利技术概述本专利技术提供分离的抗体，其包含高变区(HVR)Ll序列，该(HVR)Ll序列包含序列 NIAKTISGY(SEQ ID NO 1)，其中该抗体特异性结合人表皮生长因子受体2 (HER2)和血管内 皮生长因子(VEGF)。在一个实施方案中，该抗体还包含包含序列WGSFLY(SEQ ID NO 2) 的HVR-L2和/或包含序列HYSSPP (SEQ ID NO :3)的HVR-L3。在另一个实施方案中，该抗 体还包含一条、两条、或三条HVR序列，该HVR序列选自(i) HVR-Hl，其包含序列NIKDTY (SEQ ID NO 4) ； (ii)HVR-H2，其包含序列 RIYPTNGYTR(SEQ ID NO 5)；禾口 (iii) HVR-H3，其包含序 列WGGDGFYAMD (SEQ IDNO 6)。在另一个实施方案中，该抗体还包含一条、两条、或三条HVR 序列，该HVR序列选自(i)HVR-Hl，其包含序列NISGTY(SEQ ID NO 7) ； (ii)HVR-H2，其包含 序列 RIYPSEGYTR(SEQ ID NO 8)；禾口 (iii)HVR_H3，其包含序列 WVGVGFYAMD(SEQ ID NO :9)。另一方面，本专利技术的特征是一种分离的抗体，其包含HVR-Ll序列，该HVR-Ll序 列包含序列& IX3X4X5X6X7X8X9Y (SEQ ID NO 83)，其中&是除天冬氨酸以外的任何氨基 酸，&是除脯氨酸以外的任何氨基酸，&是除精氨酸以外的任何氨基酸，&是除丝氨酸 以外的任何氨基酸，其中该抗体特异性结合HER2和VEGF。在一个实施方案中，包含序列 X1IX3X4X5X6X7X8X9Y (SEQ ID NO 83)的抗体在&具有天冬酰胺，在&具有丙氨酸，在&具有 赖氨酸，在\具有苏氨酸，在X7具有丝氨酸，和/或在\具有甘氨酸，或其任何组合。在本 专利技术这一方面的多种实施方案中，图57中显示的具有大于1、5、或10的F值的任何HVR-Ll 残基是这样的残基，该残基优选地维持为与在M1-44或bHl-81的HVR-Ll (SEQ ID NO 1)中同样的位点发现的残基相同的残基。在另外的实施方案中，表14显示的具有大于1的 Δ八6值的任何浙1 -1^1残基是这样的残基，该残基优选地维持为与在油1-44或油1-81的 HVR-Ll (SEQ ID NO 1)中同样的位点发现的残基相同的残基。在一个实施方案中，该抗体包 含 HVR-H2 序列，该 HVR-H2 序列包含序列 RX2)(3X4X5X6X7)y(9R(SEQ IDNO :84)。在一个实施方 案中，该抗体还包含包含序列WGSFLY (SEQ IDNO 2)的HVR-L2和/或包含序列HYSSPP (SEQ ID NO 3)的HVR-L3。在另一个实施方案中，该抗体还包含一条、两条、或三条HVR序列， 该HVR序列选自(i) HVR-Hl，其包含序列NIKDTY (SEQ ID NO 4) ； (ii) HVR-H2，其包含序列 RIYPTNGYTR(SEQ ID NO 5)；禾口 (iii) HVR-H3，其包含序列 WG⑶GFYAMD (SEQ ID NO :6)。在 另一个实施方案中，该抗体还包含一条、两条、或三条HVR序列，该HVR序列选自(i)HVR-Hl， 其包含序列NISGTY(SEQ ID NO 7) ； (ii)HVR_H2，其包含序列 RIYPSEGYTR(SEQ IDNO 8)；禾口 (iii)HVR-H3，其包含序列 WVGVGFYAMD(SEQ ID NO :9)。另一方面，本专利技术的特征是一种分离的抗体，其包含HVR-H2序列，该HVR-H2序列 包含序列RX2X3X4X5X6X7X8X9R(SEQ ID NO :85)，其中是除苏氨酸以外的任何氨基酸并且& 是除天冬酰胺以外的任何氨基酸，并且其中该抗体特异性结合HER2和VEGF。在另一个实 施方案中，包含序列RX2X3X4X5X6X7X8X9R(SEQ ID NO 84)的抗体在)(8具有酪氨酸。在一个 实施方案中，包含序列RX2X3X4X5X6X7X8X9R (SEQ ID NO 84)的抗体在&具有丝氨酸和/或在 X6具有谷氨酸。在这一方面的另一个实施方案中，该抗体还包含一条、两条、或三条HVR序 列，该HVR序列选自由下述各项组成的组HVR-L1，其包含序列NIAKTISGY(SEQ ID NO 1)， HVR-L2，其包含序列WGSFLY(SEQ ID N0:2)，和/或HVR-L3，其包含序列HYSSPP(SEQ ID NO: 3)。在本文中描述的任何实施方案中，该抗体还包含，一条或两条HVR序列，该HVR序列选自 (i)HVR-Hl，其包含序列NIKDTY(SEQ ID NO :4)和(ii)HVR-H3，其包含序列 WG⑶GFYAMD(SEQ ID NO 6)。在另外一个实施方案中，该抗体还包含，一条或两条HVR序列，该HVR序列选自 (i)HVR-Hl，其包含序列NISGTY(SEQ ID NO 7)和(ii)HVR-H3，其包含序列 WVGVGFYAMD(SEQ ID NO 9)。在本专利技术这一方面的多种实施方案中，图57中显示的具有大于1、5、或10的 F值的任何HVR-H2残基是这样的残基，该残基优选地维持为与在bHl-44或bHl-81的 HVR-H2(分别为SEQ ID NOS :8和5)的同样的位点发现的残基相同的残基。在另外的实施 方案中，表14显示的具有大于1的Δ Δ G值的任何HVR-H2残基是这样的残基，该残基优选 地维持为与在bHl-44或bHl-81的HV本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种分离的抗体，其包含高变区（ＨＶＲ）Ｌ１序列，该（ＨＶＲ）Ｌ１序列包含序列ＮＩＡＫＴＩＳＧＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１），其中所述抗体特异性结合人表皮生长因子受体２（ＨＥＲ２）和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：珍妮·M·博斯特罗姆，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH