ＴＰＢ盐用于分离生物分子的用途制造技术

用于将含有至少一种阳离子基团的生物分子从含有所述生物分子的一种液体介质中分离出的方法，该方法包括使用一种四苯基硼酸盐（ＴＰＢ）的盐。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TPB盐用于分离生物分子的用途本专利技术涉及一种用于分离含有至少一种阳离子基团的生物分子的方法并且涉及 用于制造一种生物分子的方法涉及其用途。本专利技术的方法例如可以用来制造依替巴肽(SEQ ID NO :5)，它选择性地阻滞了血 小板糖蛋白Ilb/IIIa受体。它可逆地结合到血小板上并且具有短的半衰期。已经证明了它 在冠状血管成形术、心肌梗塞和心绞痛过程中在治疗病人中作为一种静脉内溶液的疗效。本专利技术的方法还可以用来制造奥米加南。奥米加南是对于H-Ile-Leu-Arg-Trp-P ro-Trp-Trp-Pro-Trp-Arg-Arg-Lys-NH2(SEQ ID NO 1)肽的通用国际名称(CID)，它主要以 其五盐酸盐(5HC1)的盐形式来使用。奥米加南是一种阳离子的抗微生物的肽。最近的研 究还显示了它在炎症应答中起作用。在体外测定中，奥米加南显示出对微生物的迅速的杀 菌的活性，这些微生物聚居到皮肤上并且可能在炎性疾病的发病机理中起作用。美国专利号5，262，567披露了使用包括一个胍基团以及一种未取代的四苯基硼 酸盐离子的一种化合物作为肽的合成中的中间体。作为一个例子，披露了通过精氨酸以及 四苯基硼酸盐(TPB)形成的这种化合物的合成以及其在肽Boc-Leu-Arg-OH的合成中的用 途。现在已经出人意料地发现了，将一种生物分子(特别是含有至少一种阳离子基团 的生物分子通过使用一种四苯基硼酸盐(TPB)盐)从一种液体介质出的改进的分离，这种 分离使之能够以高产量和高纯度获得所希望的生物分子。本专利技术因此涉及用于将含有至少一种阳离子基团的生物分子从含有所述生物分 子的一种液体介质中分离出的一种方法，该方法包括使用一种四苯基硼酸盐(TPB)的盐。为了本专利技术的目的，术语“阳离子基团”是指该生物分子的一个带正电荷的官能 团。在本专利技术中该阳离子的基团经常是选自一种胍基团或一种氨基基团。当该阳离子基团 是一种氨基基团时，它经常是选择质子化的伯、仲以及优选地叔氨基基团。更优选地，该氨 基基团是一种季的(铵)基团，例如一种四烷基铵基团。胍(guadinine)基团是另一个优 选的阳离子基团。为了本专利技术的目的，术语“TPB”表示四苯基硼酸盐。这种TPB阴离子可以是在苯 环上被取代的或者它可以是未取代的。优选地，TPB阴离子是未取代的。合适的取代的TPB阴离子的例子包括例如四硼酸盐。在本专利技术中，所使用的TPB盐总体上能够形成一种水性溶液。在该TPB盐中的阳 离子经常是一种无机的阳离子。例如合适的无机离子是钠(Na+)和锂(Li+)。优选LiTPB 和NaTPB。最优选使用的四苯基硼酸盐的盐是NaTPB。在根据本专利技术的方法中，四苯基硼酸盐的量总体上是从1至10当量的四苯基硼酸 盐的盐/在该生物分子中存在的阳离子的基团，优选地该量值是从1至2当量，更优选是从 1至1. 1当量。在根据本专利技术的方法中，该TPB盐优选地与一种碱剂一起使用。这种碱剂可以具 体是选自无机的碱类，例如NaHC03和Na2C03。总的来讲，碱剂的选择取决于待纯化的生物 分子对碱性条件的敏感性。为了本专利技术的目的，术语“生物分子-TPB盐”是指生物分子四苯基硼酸盐(TPB)的Τττ . ο为了本专利技术的目的，“含有该生物分子的一种液体介质”应理解为具体表示该生物 分子在一种溶剂中的一种溶液，该溶剂选自一种水性溶剂(“水性溶液”)、一种有机溶剂 (“有机溶液”)或它们的混合物。为了本专利技术的目的，术语“水性溶剂”具体是指水以及水溶性化合物在水中的溶 液，例如盐水或任何其他水性矿物盐溶液。“与水不混溶的化合物”应理解为具体是表示一种化合物，当与一种水性溶液相接 触时它允许将一种水相从一种有机相中通过倾析分离出。在本专利技术中，该生物分子总体上是选自下组，该组的构成为一种肽、一种肽衍生 物、一种寡核苷酸、一种寡核苷酸衍生物以及一种多糖。为了本专利技术的目的，术语“肽”指一个聚合物其中单体是通过酰胺键共价连接在一 起的氨基酸。肽具有两个或通常更多的氨基酸单体长度。另外，在此所有具体的肽序列通 过化学式表示，它从左至右的方向是氨基端到羧基端的常规的方向。为了本专利技术的目的，术语“氨基酸，，旨在表示任何含有至少一个NR1R2基团，优选 地是NH2基团，和至少一个羧基基团的化合物。本专利技术的氨基酸可以是天然存在的或合成 的。天然的氨基酸，除了甘氨酸外，含有一个手性碳原子。除非另外特别地说明，含有具有 L-构型的天然氨基酸的化合物是优选的。在本申请从始至终，氨基酸残基简写如下精氨 酸是Arg或R ；赖氨酸是Lys或K ；脯氨酸是Pro或P ；色氨酸是Trp或W，天冬氨酸是Asp或 D ；半胱氨酸是Cys或C。为了本专利技术的目的，术语肽的“羧基-端”是用游离的羧基基团(-C00H)结束的氨 基酸序列的末端。另一方面，术语“氨基端-端“指用具有游离的氨基基团(-NH2)的氨基酸 结束的氨基酸序列的每个末端。如在此所使用的，术语“肽衍生物“包括一种类似物，其中一个或多个氨基酸残基 被对应的D-异构体或被一个非天然的氨基酸残基或其化学衍生物代替。一种肽的化学衍 生物包括但不限于含有另外的至少一个化学部分(该化学部分通常不是一种肽的一部分) 的一种衍生物。此类衍生物的例子是(a)该氨基端或另一种游离氨基基团的N-酰基衍生 物，其中该酰基基团可以是一种链烷酰基基团，例如乙酰基、己酰基、辛酰基以及一种芳酰 基基团，例如苯甲酰基或生物素基；(b)该末端羧基基团或另一种游离羧基或羟基基团的 酯以及(c)通过与氨或与一种合适的胺反应产生的该末端羧基基团或另一种游离羧基基 团的酰胺。在本专利技术的框架中，术语“寡核苷酸“具体表示含有连接到核碱基上的糖单元的一 种核苷单体单元的低聚物，所述核苷单体单元通过核苷酸间的键相连接。一个“核苷酸间的 键”具体是指在两个核苷部分之间的一种化学连接，例如典型地在天然的核酸中存在的磷 酸二酯连接，或在合成的核酸以及核酸类似物中典型存在的其他连接。这种核苷酸间的键 可以，例如，包括一个磷酸(phospho)或亚磷酸酯基团，并且可能包括一些连接，在这些连 接中磷酸或亚磷酸基团的一个或多个氧原子或被一个取代基修饰、或被另一种原子取代， 例如硫原子或者单或二烷基氨基中的氮原子。典型的核苷酸间的键是磷酸的二酯类或其衍 生物，例如磷酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酰胺酯以及硫代磷酰胺酯。在本专利技术中，5这种核苷酸间的键总体上被一种合适的保护基团保护。一个氰基乙基基团是一种合适 的保护基团的例子。术语“核苷”应理解为具体表示由连接到一个糖上的核碱基构成的一种化合物。糖 类包括但不限于呋喃糖环，如核糖以及2’ -脱氧核糖，以及非呋喃糖环，如环己烯基、脱水 己糖醇以及吗啉基。在核苷中所包括的糖中，在下文中指出的修饰、取代以及位置是参考呋 喃糖而讨论的，但是相同的修饰和位置也适用于其他糖环的类似的位置。该糖可以被进一 步修饰。作为糖的修饰的非限制性例子，值得注意地可以提及例如在2’ -或3’ -位置的修 饰，特别是在一个呋喃糖环的2’ -位置的修饰，包括例如氢；羟基；烷氧基，如甲氧基、乙氧 基、烯丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、甲氧乙基、烷氧基、苯氧基；叠氮基；氨基；烷氨 基；氟、氯和溴本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于将含有至少一种阳离子基团的生物分子从含有所述生物分子的液体介质中分离出的方法，该方法包括使用四苯基硼酸盐（ＴＰＢ）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗兰·卡伦斯，
申请(专利权)人：索尔维公司，
类型：发明
国别省市：BE