总血浆ＦＶＩＩ／ＦＶＩＩＡ水平作为妊娠女性的先兆子痫的指标制造技术

与正常妊娠中总血浆ＦＶＩＩ蛋白相比，妊娠女性中升高的总血浆ＦＶＩＩ蛋白，包括活化的ＦＶＩＩ（ＦＶＩＩａ）已经被发现是先兆子痫妊娠并发症的指标。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及血浆因子VII (FVII)在妊娠女性中作为先兆子痫(P-EC)的诊断标志 物的用途。更具体地，本专利技术涉及确定总血浆FVII蛋白，包括活性FVII(FVIIa)的检测与 正常妊娠中发现的相比是否升高。利用检测FVII和FVIIa是否与组织因子复合的简单免 疫测定法已经发现了来自患有P-EC的女性的血浆样品中的这种升高的FVII。
技术介绍
充分确定在正常妊娠过程中，局部高凝固状态对胎盘止血非常重要。然而，这在 先兆子痫并发症，即一种未知病因的复杂多系统病症的发生中更加意义重大。患有P-EC 的女性中经常观察到小胎盘血栓，这提示除胎盘脉管系统的血栓形成性质外，血栓形成的 患病因素可以导致或促成该病症的发展(Bremme和BlombSck (1996)Gynecol. Obstet. Invest.(妇科和产科研究)11，20- )。血栓形成可以危害胎盘灌注和胎儿生长发育，从而 可能导致胎宫内死亡。因此，在解释P-EC的许多特性方面存在对血管内凝固不断增长的兴 趣(参见例如 Howie 等(1976)Lancet(柳叶刀)2,323-325 ;Howie，(1977)Clin. Obstet. Gynaecol.(临床妇产科学)4，595Hl ；Schjetlin 等(I999)Acta Obstet. Gynecol. Scand. 78,191-197).然而，P_EC的诊断目前通常基于高血压、蛋白尿和其他相关症状的临 床观察，尽管这样的诊断具有缺陷并且不总对分娩时机提供可靠的指导以确保胎儿成活的 最佳机会。虽然其他人以前已经针对P-EC的发展观察了凝固因子，但是0ian等利用一期凝固测定发现在妊娠末三个月中患有严重P-EC的妊娠女性中的因子VII活性显著低于正常 妊娠组(Br. J. Obstet. Gynaecol.(英国妇产科杂志)(1985)92,511-517)并且严重P-EC和 降低的因子VII活性之间的这些关系已经由Sandset等提出(Ilirombosis Res.(血栓形 成研究)(1989)迪，665-670)。其他人报告了在患有P-EC的妊娠女性中的因子VII水平与 正常妊娠对照相比存在较低的差别或无显著差别(功6丨111这等(1997)C0ll.Antr0p0l.l， 127-137 ；Schjetlein等(1999)同前)。然而，尽管Schjetlin等为其研究使用了 FVII ELISA测定，但是这与本专利技术人的FVII/FVIIa测定不同；其使用多克隆抗体以进行抗原捕 获和检测二者。而且，较低的FVII仅存在于来自患有P-EC和胎儿生长迟缓的女性的血浆 样品中。Djelmi§等使用Radonja诊断剂。然而，该试剂的灵敏性和精确特异性本专利技术人不 得而知，并且可能同样与他们使用的FVII ELISA技术不同，所述FVII ELISA技术如上所示 无论是否与组织因子相复合，均主要检测FVII和FVIIa抗原两者。相反，Bremme和Blomback (Gynecol. Obstet. Invest.(妇产科学研究)同前) 报告在生育后6-15个月时具有P-EC早期诊断并在哺乳期结束后至少1个月时进行血液 采样的女性中的血浆因子VII水平升高，但是由ELISA测定检测的特别高水平的FVII仅 存在于来自具有严重P-EC早期诊断的女性的通过该测定测试的13份血浆“剩余”样品 中的3份中，其作为主要用于理解P-EC后发生原发性高血压的危险因素的更广泛研究 的一部分，并且在妊娠过程中没有进行FVII水平的测量。此外，用于被研究的中度和严重P-EC组二者的排除标准不包括这样的病症，如肾病(kidneydisease)、葡萄糖耐受不 良(glucose intolerance)、遗传性高血糖症(hereditaryhyerglycemia)、遗传性高血压 (hereditary Hypertension)禾口临界性高血压(borderline Hypertension),或吸烟(尽管 已知吸烟和凝固激活之间存在联系)。此外，已知在正常妊娠和P-EC女性两者中，止血标志 物在产后5-6周正常化。例如，已经报告了 von Willebrand因子在患有中度和严重P_EC 的女性中增加，但是在产后5周时恢复正常(Deng等(1994)Obstet. Gynecol.(妇产科医 学)M，941-945)。根据来自英国皇家妇产科学院(Royal Collegeof Obstetricians and Gynaecologists,UK)的信息，大多数患有P-EC的女性在分娩后6周内恢复正常。因此，由 Bremme和BlombSck在分娩后更长时间点获得的FVII结果不能推断出关于P-EC发展的临 床相关性。因子VII在血管壁损伤后结合组织因子(TF)并且受蛋白酶裂解活化为FVIIa。在 Ca2+和脂质存在下，TF:FVII FVIIa复合物活化FIX和FX，从而最终导致凝血酶生成和纤维 蛋白凝块形成。TF受到组织因子途径抑制剂(TFPI)的抑制。通过使用结合FVII的抗体从而捕获并检测FVII和FVIIa两者(单独地或与TF 复合)以确定血浆样品中的总FVII蛋白，本专利技术人现在已经发现在患有P-EC的妊娠末三 个月的妊娠女性的血液中总血浆FVII蛋白与正常妊娠对照中和健康非妊娠的年龄相一致 女性中的总血浆FVII蛋白相比，显著升高。相反，没有观察到FVIIa，TF或TFPI的相似的 变化。因此，升高的总FVII蛋白水平，其高于在正常妊娠中所预期的水平，现在被提议作为 P-EC的有效标志物。专利技术概述本专利技术因此提供了一种诊断妊娠女性中P-EC的方法，所述方法包括确定来自所 述女性的血液或血浆样品中的总FVII蛋白(因子VII和因子Vila)与来自无P_EC的年龄 相一致的妊娠女性的可比较样品中的总FVII蛋白水平相比，是否升高。利用血浆样品，发 现妊娠末三个月中的总FVII蛋白的这种测量对通过高血压和蛋白尿诊断的严重P-EC个体 提供高度灵敏性和特异性。严重P-EC被定义为入院时心脏舒张血压> IlOmmHg,或在相隔 4小时的两个或更多个连续时刻> 90mmHg ；和在妊娠第20周后出现的蛋白尿(> 300mg蛋 白/日或尿蛋白/肌酸酐比> 30mg/mmol)。相反，作为对照使用的正常妊娠女性的心脏收 缩/心脏舒张血压低于120/80mmHg且无高血压或蛋白尿史。附图简述附图说明图1 研究的组中的总血浆FVII水平(ng/ml)的分布组1 常规诊断为患有严重 P-EC的妊娠女性；组2 年龄相一致的正常妊娠女性(正常妊娠)和组3 年龄相一致的非 妊娠健康女性(非妊娠)。水平线表示各组的中位数。图2 患有P-EC的女性vs健康非妊娠女性中血浆FVII水平的相对操作特征(ROC) 曲线的曲线下面积(AUC)。图3 患有P-EC的女性vs正常妊娠女性中血浆FVII水平的ROC曲线的AUC。专利技术详述如上所述，本专利技术依赖于测量妊娠女性血浆样品中的总FVII蛋白(FVII和 FVIIa)。该测量可以优选采用使用关于结合的抗原的捕获抗体和检测系统的免疫测定形本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断妊娠女性中先兆子痫（Ｐ－ＥＣ）的方法，所述方法包括确定来自所述女性的血液或血浆样品中的总ＦⅦ蛋白（因子Ⅶ和因子Ⅶａ）与来自无Ｐ－ＥＣ的年龄相一致的妊娠女性的可比较样品中的总ＦⅦ蛋白水平相比是否升高。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：巴希尔·A·卢瓦里德，
申请(专利权)人：南安普敦大学，
类型：发明
国别省市：GB