一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法技术

技术编号:7117533 阅读:428 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法。该方法是利用红外光谱法检测DNA与烷化剂反应后的红外光谱图,并与空白DNA溶液的红外光谱图进行比较,得到峰位和峰强比发生变化的特征基团,从而确定DNA烷化损伤位点及程度。本发明专利技术方法具有操作方法简单且样品便于回收、专属性强、灵敏度高、检测速度快以及安全环保等突出特点,可直接对DNA损伤进行快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法
技术介绍
DNA损伤是癌症等重大疾病发生的重要原因之一,导致DNA损伤的因素非常复杂, 如体内代谢过程中产生的自由基和其它活泼中间体,DNA复制和重组过程中的自发错误,环境中的紫外线和离子辐射以及内源和外源化学物质等。在诸多 导致DNA损伤的因素中,活泼亲电烷化剂作为一类重要的化学物质能够通过与细胞内靶DNA作用,将单个烷基或复合的烷基基团转移到DNA碱基的特殊位置上,引起碱基烷化损伤,并可进一步导致碱基丢失、 核苷酸结构变异以及DNA链发生断裂、交联,造成基因突变,从而诱发细胞凋亡或癌变。多种致癌物质和临床应用的抗癌药物都能够导致DNA的烷基化损伤。环境中广泛存在的亚硝胺、食品高温加工过程中生成的丙烯酰胺以及汽车尾气和卷烟烟气中存在的1,3-丁二烯, 经过代谢活化后均能够生成烷基正离子与DNA碱基发生反应,导致DNA损伤并最终诱发癌症。临床上常用的烷化剂类抗癌药物也是通过导致DNA碱基的烷基化而发挥抗癌作用,如用于治疗脑瘤等的亚硝基脲类烷化剂、用于治疗恶性淋巴瘤等的氮芥类烷化剂、用于治疗白血病的甲基磺酸酯类烷化剂和用于治本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法,包括以下步骤:(1)称取小牛胸腺DNA,溶于1~20mmol/L Tris-HCl溶液中,配制成浓度为4~10mg/mL的DNA溶液,pH值为7~8,向DNA溶液中加入烷化剂乙醇溶液,烷化剂的摩尔浓度为0.25~15mmol/L,在37℃下反应4~10h;(2)采用液膜法进行红外光谱测定设定扫描范围4000~400cm-1,分辨率2~4cm-1,扫描次数100~500,采用氘化三甘氨硫检测器(DTGS)和KBr分束器,首先将Tris-HCl溶液滴于非水溶性窗片上,干燥后作为背景扫描,再将DNA空白溶液滴于非水溶性窗片上,采用差减法扣除背景后扫描即可...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵丽娇李莉莉郑大威钟儒刚
申请(专利权)人:北京工业大学
类型:发明
国别省市:11

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