一种分离纯化虎杖中白藜芦醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种分离纯化虎杖中白藜芦醇的方法。本发明专利技术通过构建碱性三元两相液-液萃取系统纯化虎杖中的白藜芦醇，整个过程由提取、一次萃取和一次结晶等简单的操作组成，具有操作简单、成本低廉、纯化周期短等优点，无需繁琐昂贵的色谱分离装置。而且本发明专利技术方法制得的白藜芦醇产品纯度高，不含酸性蒽醌类共存组分，纯化过程中无白藜芦醇损失，提取率较传统方法高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物分离纯化
，具体涉及。
技术介绍
白藜芦醇被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物，有显著的抑制癌细胞、 降低血脂、防治心血管疾病、抗氧化、增强免疫力、延缓衰老等作用。在制药、食品、保健品和化妆品等行业中有及广泛的应用。近年来，以白藜芦醇为活性成分的保健食品层出不穷日本将白藜芦醇作为食品添加剂加到各种酒中，配制出对心血管疾病有良好预防作用的低醇，高白藜芦醇的新型保健佐餐酒；Paradise her Resveratrol及力口拿大的Natrol resveratrol，天津天卿集团的天狮活力康，上海纳贝生物制品有限公司的益生胶囊均为含白藜芦醇的保健品。白藜芦醇分子结构中富含羟基，具有捕获自由基，抗氧化能力，其分子中的二苯烯结构有吸收紫外光的能力，这些特性被化妆品行业充分应用。Lauder的白金级极致赋活精华及世界十五大护肤品AVEDA(肯梦)的新作-晶彩INNER LIGHT新底妆系列美容产品中均含白藜芦醇。白藜芦醇已广泛用于治疗心血管疾病，动脉硬化和高血脂等疾病，在治疗阿尔茨海默病、认知功能损害及其他predementia综合征方面的效果已被医学界证实并得到重视。据统计，现已批准上市的含白藜芦醇高端药物制剂已近1000种，全球使用者约2亿人， 并且以平均每年5000万人的速度增长。白藜芦醇制剂在未来8年内将形成巨大的产业，销售额将达到5-8亿美元。白藜芦醇在许多植物中都有分布，但蓼科植物虎杖中白藜芦醇含量是最高的，达 0. 1-0.4%，是获得天然白藜芦醇的最理想资源。鉴于白藜芦醇在医药，保健品、化妆品市场有越来越广泛的应用，构建操作简单，成本低廉，易于大批量获得白藜芦醇纯品的分离纯化技术，有广泛的应用前景和重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有技术中存在的上述不足，提供一种从虎杖中分离纯化白藜芦醇的方法，该方法操作简单，成本低廉，易于大批量获得白藜芦醇纯品。本专利技术上述目的通过以下技术方案予以实现本专利技术的核心内容是根据虎杖的化学成份及白藜芦醇的溶解特性，设计专利技术了对白藜芦醇具有高选择性的含丙酮-水-亲脂性溶剂组成的碱性三元两相液-液萃取系统，用该系统对虎杖中白藜芦醇进行萃取分离纯化，通过一步萃取操作，可使虎杖中白藜芦醇得到定量富集，与其他非白藜芦醇成分分开，再经结晶操作，得到纯度大于85%白藜芦醇产品。本专利技术分离纯化虎杖中白藜芦醇的方法具体包括如下步骤 (1)提取将干燥虎杖药材粉碎，用丙酮-水作为提取溶剂进行提取；(2)纯化在步骤(1)所得的提取液中加入亲脂性溶剂，构成丙酮-水-亲脂性溶剂组成的三元两相液-液萃取系统，萃取完毕、静置分层后，白藜芦醇在亲脂性溶剂富集相中富集浓缩；(3)结晶将富集了白藜芦醇的亲脂性溶剂减压浓缩，放置析出白藜芦醇。作为一种优选方案，上述方法中，步骤(1)中所述丙酮-水的体积比为1:广7:3;所述虎杖和丙酮-水的用量比为1:10 (g/v);鉴于白藜芦醇的不稳定性，为了加速提取过程， 缩短提取周期，所述提取过程采用超声波辅助完成。作为一种优选方案，上述方法中，步骤(2)中所述亲脂性溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚中的任意一种；所述丙酮-水-亲脂性溶剂的体积比为5:5:3 7:3:6;所述三元两相液-液萃取系统的PH值为弱碱性，为7. 5^9 ；所述静置分层的温度为25 35°C，时间为4(T80min。弱碱性萃取条件的设计有如下优点虎杖中共存的大黄素、大黄酚等蒽醌类化合物的酸性比白藜芦醇的酸性要强，在系统所设的弱碱性条件下，共存蒽醌类成份呈离子状态，不被亲酯性溶剂富集相萃取，只有白藜芦醇被选择性萃取，使选择性大幅度提高。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果(1)本专利技术所述丙酮-水-亲脂性溶剂组成的三元两相碱性溶剂系统对白藜芦醇有很高的萃取选择性，在纯化步骤中白藜芦醇几乎不损失，仅需一次液-液萃取，便可定量萃取虎杖提取液中白藜芦醇，方法的提取产率极高，根据天然虎杖中白藜芦醇的含量(通常为 0. Γ0. 4%)，可得相应的定量提取率，产率最高可达1%(按虎杖药材干重计算)，超过酶解、酸水解技术的提取率。(2)本专利技术所述丙酮-水-亲脂性溶剂组成的三元两相碱性溶剂系统对虎杖中与白藜芦醇共存的酸性蒽醌类及大极性组分没有亲合力，这些组分通过一次萃取几乎可定量除去，萃取系统对虎杖中酸性及大极性的物质具有很强的除杂能力，因此不需柱层析技术， 结合结晶技术，就能获得纯度理想的白藜芦醇产品。所得的白藜芦醇产品用核磁共振氢谱技术测定，不含醌类成分吸收信号。(3)本专利技术所述纯化技术操作极其简单主要为下述几个部分，超声辅助溶剂提取 —碱性条件下三元两相溶剂系统液液萃取进行白藜芦醇分离除杂一富集白藜芦醇后的溶液浓缩至小体积，进行结晶，便可得到产率高，纯度理想的白藜芦醇产品。这些操作易掌握、 无危险、周期短，适合批量制备。(4)本专利技术所述方法成本低廉因操作极其简单，所用的所有试剂耗费极低，实验中的各种损耗极小，且专利技术技术得到的产率极高，故有成本极低廉的优点。具体实施例方式以下结合实施例来进一步解释本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。实施例1将虎杖干燥药材500g粉碎，用丙酮/水为6/4( ν/ν)的溶液作为提取溶剂，提取液用量按料/液为1 10 (g/v)，分2次超声提取，每次35min，过滤，收集滤液，用苛性碱溶液调节滤液PH为弱碱性(pH 7. 5-9)，加入一定体积的乙酸乙酯，使体系中乙酸乙酯/丙酮/水的比例为5/6/4(ν/ν/ν)，充分振摇，35°C下静置分层40min，收集上相溶液，减压浓缩回收溶剂，至小体积(约剩余5ml左右)，静置，析出固体，得白藜芦醇产品；产品采用单标定点法，用薄层扫描技术分析鉴定，白藜芦醇纯度在85%以上；提取率由虎杖中白藜芦醇含量决定，可定量提出虎杖中的白藜芦醇(即，若原料虎杖中白藜芦醇含量在0. 4%，便可得到2g白藜芦醇产品，若原料虎杖中白藜芦醇含量在0. 6%，便可得到3g白藜芦醇产品)。 实施例2将虎杖干燥药材500g粉碎，用丙酮/水为7:3( ν/ν)的溶液作为提取溶剂，提取液用量料/液为1 10 (g/v)，分2次超声提取，每次35min，过滤，收集滤液，用苛性碱溶液调节滤液 PH为弱碱性(pH7. 5-9)，加入一定体积的二氯甲烷，使体系中二氯甲烷/丙酮/水的比例为 5/7/3 (ν/ν/ν)，充分振摇，35°C下静置分层40min，收集下相溶液，减压浓缩回收溶剂至小体积(约剩余5ml左右)，静置，析出固体，得白藜芦醇产品；产品采用单标定点法，用薄层扫描技术分析鉴定，白藜芦醇纯度在85%以上，提取率由虎杖中白藜芦醇含量决定，可定量提出虎杖中的白藜芦醇(即，若原料虎杖中白藜芦醇含量在0. 4%，便可得到2g白藜芦醇产品，若原料虎杖中白藜芦醇含量在0. 6%，便可得到3g白藜芦醇产品)。权利要求1.，其特征在于所述方法包括如下步骤(1)提取将干燥虎杖药材粉碎，用丙酮-水作为提取溶剂进行提取；(2)纯化在步骤(1)所得的提取液中加入亲脂性溶剂，构成丙酮-水-亲脂性溶剂组成的三元两相液-液萃取系统，萃取完毕、静置分层后，白藜芦醇在亲脂性溶剂富集相中富集浓缩；(3)结晶将富集了白藜芦醇的亲脂性溶剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
，萃取完毕、静置分层后，白藜芦醇在亲脂性溶剂富集相中富集浓缩；（３）结晶：将富集了白藜芦醇的亲脂性溶剂减压浓缩，放置吸出白藜芦醇。１．一种分离纯化虎杖中白藜芦醇的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：（１）提取：将干燥虎杖药材粉碎，用丙酮－水作为提取溶剂进行提取；（２）纯化：在步骤（１）所得的提取液中加入亲脂性溶剂，构成丙酮－水－亲脂性溶剂组成的三元两相液－液萃取系统

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王军，向玲丽，尹胜，李春燕，姚美村，杨润潮，兰晶，周少耿，郑晶，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81