荧光素酶活性片段及其应用制造技术

本发明专利技术通过将Gaussia荧光素酶(Gaussia?Luciferase，GLuc)的N端37个氨基酸缺失的方法，获得了一种GLuc的活性片段，命名为GLuc?148。与野生型Gluc一样，GLuc?148发光活性高、不需要辅因子、生化性质稳定，但GLuc?148分子量更小、在真核细胞中非分泌型表达，更适合作为报告因子和荧光能量供体，应用于细胞和活体成像、高通量筛选、微生物检测等技术领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物化学和细胞生物学研究领域，具体涉及Gaussia荧光素酶活性核 心片段GLuc 148的改造和应用。
技术介绍
荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总 称。由于其独特的发光特点和检测简便、灵敏、快速，荧光素酶基因在基因工程方面已成 为广泛使用的报告基因(reporter)；其在发光免疫分析、活体成像、活细胞共振能量转移 (BRET)及环境监测、微生物检测等方面的应用也愈来愈受到关注。目前研究最多且常用的荧光素酶主要是细菌荧光素酶(Bacterial Luciferase, 简称BLuc)、萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase, FLuc)和海肾荧光素酶(Renilla Luciferase, RLuc)。相比而言，这些荧光素酶分子量相对较大，酶蛋白在溶液中的稳定性较 差，有的在使用时需要共激活因子如ATP、Mg2+离子或Ca2+离子等，这在很大程度上限制了 它们的应用范围。Gaussia荧光素酶(Gaussia Luciferase，简称GLuc)是从海洋桡脚类动物中分离 出的一种新型荧光素酶，目前关于它的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光素酶活性片段，其特征在于，所述活性片段的序列是Ｇａｕｓｓｉａ荧光素酶缺失Ｎ端３７个氨基酸残基所形成的序列，并且所述活性片段具有与野生型Ｇａｕｓｓｉａ荧光素酶一致的荧光素酶活性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡红雨，李海音，郑学明，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：31