本发明专利技术公开了一种鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其是通过用70-95％的乙醇提取，挥去乙醇的浓缩液放置于4℃冷库中，静置过夜，析出的沉淀部分取出后冷冻干燥制备得到。制备得到的总黄酮具有很强的对超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢自由基、DPPH自由基的清除作用，因而可用于制备抗辐射、抗氧化、抗衰老的保健产品或药品，还可用于心脑血管疾病的预防及治疗等，应用前景广泛。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药用真菌提取领域，具体地说涉及。背景资料鲍氏层孔菌(Phellinusbaummii Pilat)，隶属担子菌亚门(Basidiomyeotina)， 层菌纲(Hymenomycetes)、多孑L菌目(polyporales)、 秀革孑L菌禾斗(Hymenochaetacae), 7KM 孔菌属(Phellinus)，俗名桑黄，是继灵芝之后又一具有较高生物活性的药用真菌，韩国市场非常热销，也受到国内食用菌栽培农户的极大关注。但由于桑黄与灵芝一样不能作为餐桌食品食用，促进其栽培发展和产业化进程必须要开发出相应的功能性食品或药品。上海市农科院食用菌研究所在“桑黄的人工驯化及生物活性物质的开发利用”项目研究中发现， 鲍氏层孔菌子实体中含有大量的黄酮类物质，这类物质具有较好的抗氧化、修复神经细胞 PC12氧化损伤的作用；而在其它食药用真菌中少有黄酮类化合物的报道。国内外目前尚无对鲍氏层孔菌子实体黄酮的开发利用报道，市场上也未见有相关产品。抗氧化活性是诸多生物活性中最重要的活性之一，酶和非酶的抗氧化物质在保护机体免受氧化应激损伤方面起着至关重要的作用。随着人们生活方式、饮食结构以及外界环境的变化，心血管、肿瘤等疾病已经呈现出逐年上升的趋势。心血管疾病在发展中国家被列为五大致死的首要因素，而在发达国家中，则成为导致死亡的最主要因素。常见的心血管疾病大都与氧化应激有着紧密的联系。因此，清除体内自由基的抗氧化反应对人类的生活健康有着重要的意义。对于黄酮类化合物的提取分离，已有很多相关的文献报道，但制备纯度高的黄酮类物质通常也只限于实验室水平。在实验室分离制备较高纯度的黄酮类物质通常需要采用多种分离材料，如大孔树脂、聚酰胺、硅胶等，可获得较高纯度或单一的黄酮化合物。但是，如果将上述生产方法应用于工业化生产过程，则使用诸多的分离材料不仅成本高，操作繁琐，而且还会有很多填料的残留(如大孔吸附树脂)难以去除，制备的产品也存在安全性的问题。因此，在工业化制备过程中要避免使用较多的分离材料，还需要开发出能大量制备鲍氏层孔菌子实体较高纯度总黄酮的工艺技术。
技术实现思路
本专利技术首先提供了一种鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其是通过如下方法制备得到的用70-95 %的乙醇提取。优选的为用70-95%的乙醇60_80°C加热回流提取的方法得到。具体的为用70-95%的乙醇60-80°C加热回流提取，提取液除去乙醇后，再加水浓缩，浓缩液放置于4°C冷库中，静置过夜，抽去上清液；析出的沉淀部分取出后冷冻干燥得到进一步优选的乙醇浓度为80%，优选的加热回流温度为70°C。本专利技术还提供了一种制备上述鲍氏层孔菌子实体总黄酮的方法，该方法为用70-95%的乙醇提取。优选的方法为用70-95%的乙醇60_80°C加热回流提取。具体地说该方法为用70-95%的乙醇60-80°C加热回流提取，提取液除去乙醇后，再加水浓缩，浓缩液放置于4°C冷库中，静置过夜，抽去上清液；析出的沉淀部分取出后冷冻干燥得到。进一步优选的乙醇浓度为80%，优选的加热回流温度为70°C。静置过夜的温度为 4°C。具体的制备方法见附图1。具体的步骤为将鲍氏层孔菌子实体粉碎，用70-95%的食用级乙醇室温下浸泡1小时，料液比 1 12(重量公斤比体积升)，60-80°C加热回流提取2小时，过滤，储存滤液；残渣再用80% 乙醇60-80°C热回流提取1小时，料液比1 6(重量公斤比体积升)，过滤，合并两次提取滤液；于40°C下减压浓缩，待蒸去大部分乙醇后，再加50L水继续减压浓缩，浓缩至比重 0. 96-0. 97(50°C热测)，放出浓缩液；浓缩液放置于4°C冷库中，静置过夜，抽去上清液；析出的沉淀部分取出后冷冻干燥，得到鲍氏层孔菌子实体总黄酮提取物。本专利技术的创新之处1、本专利技术开发的鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其制备工艺流程简单，制备得到的桑黄总黄酮含量达70 %以上；得率达到5 %以上。2、制备得到的黄酮具有很强的对超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢自由基、DPPH 自由基的清除作用，因而可用于制备抗辐射、抗氧化、抗衰老的保健产品或药品，还可用于心脑血管疾病的预防及治疗等，应用前景广泛。附图说明图1 鲍氏层孔菌子实体总黄酮制备方法路线2 实施例1的鲍氏层孔菌子实体总黄酮对超氧阴离子的清除作用图3 实施例1的鲍氏层孔菌子实体总黄酮对羟基自由基的清除作用图4 实施例1的鲍氏层孔菌子实体总黄酮对过氧化氢自由基的清除作用图5 实施例1的鲍氏层孔菌子实体总黄酮对DPPH自由基的清除作用图6 实施例1的鲍氏层孔菌子实体总黄酮还原力测定实验具体实施例方式下面的实施例中所用的鲍氏层孔菌子实体菌种(Phellinus baummii Pilat)来自中国微生物菌种保藏中心上海食用菌分中心，编号为Phellinus baumii Pilat 32490实施例1 1、鲍氏层孔菌子实体去杂质清洗将鲍氏层孔菌子实体原料加水清洗，去除杂质后晒干，再用粉碎机粉碎成小块状备用。2、乙醇热回流提取及浓缩称取上述粉碎后的子实体50kg，加入80%食用级乙醇 600L，室温下浸泡lh，再70°C加热回流提取池，过滤，储存滤液；残渣中再加入300L 80%乙醇，70°C热回流提取lh，过滤，合并两次提取滤液；于40°C下减压浓缩，待蒸去大部分乙醇后，再加50L水继续减压浓缩，浓缩至比重为0. 96(50°C条件下测定)，放出浓缩液。3、浓缩液冷藏静置将上述浓缩液置于桶中，放于4°C冷库中，静置过夜，抽去上清液。4、干燥析出的沉淀部分取出后冷冻干燥，得到鲍氏层孔菌总黄酮提取物2. 6kgo经化学比色法测定，制备得到的鲍氏层孔菌总黄酮提取物中黄酮含量达到 73. 5%。实施例2 1、鲍氏层孔菌子实体去杂质清洗将鲍氏层孔菌子实体原料加水清洗，去除杂质后晒干，再用粉碎机粉碎成小块状备用。2、乙醇热回流提取及浓缩称取上述粉碎后的子实体50kg，加入80%食用级乙醇 600L，室温下浸泡lh，再70°C加热回流提取池，过滤，储存滤液；残渣中再加入300L 80%乙醇，70°C热回流提取lh，过滤，合并两次提取滤液；于40°C下减压浓缩，待蒸去大部分乙醇后，再加50L水继续减压浓缩，浓缩至比重为0. 97(50°C条件下测定)，放出浓缩液。3、浓缩液冷藏静置将上述浓缩液置于桶中，放于4°C冷库中，静置过夜，抽去上清液。4、干燥析出的沉淀部分取出后冷冻干燥，得到鲍氏层孔菌总黄酮提取物2. Skgo经化学比色法测定，制备得到的鲍氏层孔菌总黄酮提取物中黄酮含量达到 71. 8%。实施例3将实施例1中得到的总黄酮应用于如下实验1.清除超氧阴离子实验采用化学发光法，Clarity PC化学发光仪进行测定。用70%乙醇将中试黄酮样品配制成不同浓度(20 μ g/mL、50 μ g/mLU00 μ g/mL、200 μ g/mL、500 μ g/mLUOOO μ g/mL)。 使用鲁米诺-邻苯三酚-CBS体系的化学发光法，用70%乙醇作为空白，分别取IOyL样品液和空白液加入96孔板，由泵1注入10 μ L6. 25 X lO^mol/L邻苯三酚溶液，再由泵2注入 150 μ L鲁米诺-CBS溶液(ρΗΙΟ. 2)，在20°C启动本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其特征在于其是通过如下方法制备得到的：用７０－９５％的乙醇提取。
【技术特征摘要】
1.一种鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其特征在于其是通过如下方法制备得到的 用70-95%的乙醇提取。2.根据权利要求1所述的鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其特征在于所述的方法为 用70-95%的乙醇60-80°C加热回流提取。3.根据权利要求1或2所述的鲍氏层孔菌子实体总黄酮，其特征在于所述的乙醇为 80%，所述的加热回流温度为70°C。4.一种制备权利要求1-3任一项所述鲍氏层孔菌子实体总黄酮的方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨焱，刘艳芳，王晨光，王钦博，唐庆九，张劲松，汪文瀚，周帅，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：31
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