本发明专利技术提供一种miRNA-484的新用途及含有miRNA-484的药物组合物及其用途。所述miRNA-484在制备用于预防或治疗心脏疾病药物中的用途，所述药物组合物，该药物组合物由有效剂量的miRNA-484药学上可接受的载体、病毒或辅料组成。miRNA-484通过抑制心肌细胞凋亡对心脏具有保护作用，miRNA-484对许多心脏疾病具有潜在的预防和治疗价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种内源性的非编码小RNAs的新用途，尤其涉及一种m iRNA-484在预防或治疗心脏疾病中的用途，属于生物制药
技术介绍
心血管疾病是人类健康和生命的主要威胁，是人类健康的头号杀手，全世界范围内每年有一千七百万人死于心血管疾病，其死亡率已接近所有癌症死亡率的总和。在我国， 随着人民生活水平日益提高和饮食结构的改变，心血管疾病死亡率呈明显上升趋势，已超过癌症成为第一大致死原因。根据国家卫生部2004年底公布的最新统计结果表明，我国18 岁及以上居民高血压患病率为18. 8%，估计全国患病人数1. 6亿多，由此造成的心肌肥厚、 心肌梗死、冠心病、以及心力衰竭等凋亡相关心脏疾病的病人达几千万。目前关于心脏疾病发病机理尚不完全清楚，心脏疾病的预防、诊断和治疗尚不能达到让人满意的效果，急需开发新的技术、方法用于心脏病的诊断、防治。miRNA是新近研究发现的一类内源性非编码小RNA分子，许多研究表明miRNA对于维持心脏正常生理功能具有重要作用，心脏中的miRNA异常表达与许多心脏疾病的发生相关。因此，将miRNA作为心脏疾病治疗的靶点，开发相关药物具有潜在的临床应用价值。 单一的miRNA可以同时作用于多个靶基因的mRNA的表达，这样药物作用于一个miRNA可以调节多个参与心脏发病基因的表达，影响多个信号通路，从整体上达到治疗疾病的目的。由于miRNA在心脏病理状态下表达水平不同，因此可以通过检测miRNA的表达水平来预测诊断疾病。细胞凋亡(apoptosis)，又称程序性细胞死亡，是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束生命的过程。它是一个主动的、高度有序的、由基因控制及一系列酶参与的过程，对正常胚胎发育，维持细胞群体及恶性病变过程中均起重要作用，在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。在许多心肌损伤或心脏病理状态下， 如心肌缺血再灌注损伤、心肌肥大、心力衰竭等，心肌细胞会发生凋亡。由于成熟的心肌细胞不能分裂增殖，心肌细胞过度凋亡必然会使心肌细胞数目减少，这一点可能是一些心脏疾病发病的机理。目前研究发现许多miRNA通过调控凋亡相关靶蛋白的表达参与细胞凋亡的发生，这些miRNA有促凋亡的，也有抑凋亡的。寻找心脏中特异表达的、参与心肌细胞凋亡的miRNA，阐明其作用机理，对于开发以miRNA为策略的心脏疾病的诊断、治疗具有及其重要的意义和应用前景。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种miRNA-484及含有 miRNA-484的药物组合物在制备用于预防或治疗心脏疾病药物中的用途。一方面，本专利技术提供一种miRNA-484在制备用于预防或治疗心脏疾病药物中的用途。优选地，所述miRNA-484的核苷酸序列如下述SEQ ID NO 1的序列所示5' -UCAGGCUCA⑶CCCCUCCCGAU-3‘。优选地，所述心脏疾病包括心肌梗死、心肌缺血损伤、心肌肥厚或心肌纤维化。另一方面，本专利技术提供一种药物组合物，该药物组合物由有效剂量的miRNA-484 药学上可接受的载体、病毒或辅料组成。优选地，所述载体为壳聚糖、胆固醇、脂质体或纳米颗粒。又一方面，本专利技术一种药物组合物在制备用于预防或治疗心脏疾病药物中的用途。优选地，所述心脏疾病包括心肌梗死、心肌缺血损伤、心肌肥厚或心肌纤维化。本专利技术通过实验发现miRNA-484在心脏中高表达，在心肌缺血损伤及缺氧诱导的心肌细胞凋亡过程中miRNA-484表达显著下调。通过构建miRNA-484过表达腺病毒或 miRNA-484转基因小鼠加强miRNA-484的表达可以抑制心肌细胞凋亡及心肌缺血损伤，心肌梗死面积减少。心肌缺血再灌注损伤后，过表达miRNA-484可以减轻缺血再灌注损伤所致的凋亡，减小心肌梗死面积，过表达miRNA-484还能改善缺血再灌注损伤所致的心功能的损伤。 而抑制内源性的miRNA-484可加重缺血再灌注损伤。以上实验说明miRNA-484通过抑制心肌细胞凋亡对心脏具有保护作用， miRNA-484对许多心脏疾病具有潜在的预防和治疗价值。而给予miRNA-484反义核苷酸抑制miRNA-484的表达则可以诱导心肌细胞凋亡，心肌缺血损伤会更加严重。具体的，本专利技术发现miRNA-484(5'-UCAGGCUCA⑶CCCCUCCCGAU-3‘)通过抑制心肌细胞凋亡对心脏具有保护作用。心肌细胞缺氧或心肌缺血损伤过程miRNA-484表达显著下调，miRNA-484的下调可能诱导了心肌细胞凋亡的发生。miRNA-484在缺血再灌注动物模型的心肌组织中表达下调，过表达miRNA-484的心脏特异性转基因小鼠，可以抵抗心肌缺血再灌注损伤，心肌梗死面积减少，心功能显著改善。将miRNA-484与适当的载体结合形成药物，导入心脏或体内，对许多心脏疾病将具有预防及治疗作用。通过构建能够过表达 miRNA-484的腺病毒从冠状动脉注射入小鼠心脏，发现心肌缺血损伤程度明显被抑制，在动物模型证明了 miRNA-484对缺血性心脏病的治疗作用。可以考虑将miRNA-484与壳聚糖、 胆固醇、脂质体、纳米颗粒等包装形成药物分子，通过口服、静脉注射、肌肉注射、冠状动脉内注射或直接心肌注射的方式，用于防治心脏疾病、改善心脏功能、阻止心肌纤维化及心肌重构的发生。附图说明以下，结合附图来详细说明本专利技术的实施方案，其中图1为心肌缺血损伤及低氧诱导的心肌细胞凋亡过程中miRNA-484表达水平的变化的试验结果示意图，图中A为原代心肌细胞缺氧处理miRNA-484表达水平的试验结果示意图；B为小鼠心肌缺血miRNA-484表达水平的试验结果示意图；图2为miRNA-484抑制心肌细胞凋亡的实验结果示意图，图中A为原代心肌细胞感染miRNA-484腺病毒miRNA-484过量表达对细胞凋亡的作用实验结果示意图；图中B为原代心肌细胞感染miRNA-484腺病毒miRNA_484过量表达对细胞色素C的释放作用实验结果示意图；图3为miRNA-484过表达抑制心肌缺血损伤实验结果示意图，图中A为小鼠经注射冠动脉miRNA-484病毒后，其心脏的左心室面积(LV)所占的百分比和危险区总面积 (AAR)所占的百分比实验结果示意图；图中B为小鼠经注射冠动脉miRNA-484模拟物病毒后对缺血再灌注手术(I/R)的影响作用的实验结果示意图；图4为小鼠心肌注射miRNA-484模拟物在心脏中表达的效率的实验结果示意图， 图中B为miRNA-484模拟物注射小鼠心肌后的实验结果示意图，图中A为生理盐水注射小鼠心肌后的实验结果示意图；图5为小鼠静脉注射miRNA-484后再进行心肌缺血再灌注后M小时与野生型小鼠再灌M小时后的心功能状况比较，图中A为miRNA-484过量表达对小鼠的左室舒张末内径(LVIDd)的作用实验结果示意图；图中B为miRNA-484过量表达对左室收缩末内径 (LVIDs)的作用实验结果示意图；图中C为miRNA-484过量表达对短轴截短率(FS)的作用实验结果示意图。图6为小鼠静脉注射miRNA-484抑制剂抑制内源性miRNA-484及抑制剂阴性对照后缺血再灌注所致的比较实验结果示意图，图中A为心肌细胞凋亡的比较本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．ｍｉＲＮＡ－４８４在制备用于预防或治疗心脏疾病药物中的用途。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李培峰，王昆，
申请(专利权)人：中国科学院动物研究所，
类型：发明
国别省市：11
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