固定化全细胞催化剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及制药工业生物技术领域，公开了一种固定化全细胞催化剂的制备及在普利中间体（R）-2-羟基-4-苯基-丁酸合成中的应用。建立含有D型乳酸脱氢酶基因和甲酸脱氢酶基因的重组细胞，并固定，制备得到固定化全细胞催化剂。用这种催化剂合成赖诺普利的中间体（R）-2-羟基-4-苯基-丁酸，反应条件温和，作用专一，无副产物，在医药及食品等行业中均有应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于制药工业生物
，涉及一种固定化全细胞催化剂的制备及在普利中间体(R) -2"羟基-4-苯基-丁酸合成中的应用。
技术介绍
赖诺普利(Lisinopril)是一种抗高血压病药，具强力血管紧张素转换酶抑制作用。传统的合成方式是利用有机化学合成的路线(US 2007/0093664 Al，CN 1053437 C)，污染大，成本高。生物催化法中使用的辅酶NAD+可用于底物转化，但不可再生，需要补充入新的辅酶。因此，若能使反应过程中辅酶再生，则可以大大降低成本。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种固定化全细胞催化剂及制备方法。本专利技术还提供了应用上述固定化全细胞催化剂制备中间体(R)-2-羟基-4-苯基-丁酸的方法。本专利技术技术方案为，建立含有D型乳酸脱氢酶基因和甲酸脱氢酶基因的重组细胞，并固定，制备得到固定化全细胞催化剂。用这种催化剂合成赖诺普利的中间体 (R)-2-羟基-4-苯基-丁酸。—种固定化全细胞催化剂的制备方法，包括以下步骤(1)将含有D型乳酸脱氢酶基因和甲酸脱氢酶基因的重组质粒转入大肠杆菌宿主菌，得到重组细胞；(2)将重组细胞与固定剂溶液混合，铺于平面上本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．　一种固定化全细胞催化剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（１）　　将含有Ｄ型乳酸脱氢酶基因和甲酸脱氢酶基因的重组质粒转入大肠杆菌宿主菌，得到重组细胞；（２）　　将重组细胞与固定剂溶液混合，铺于平面上，２５～３５℃下保温１～１．５小时，并用盐溶液稳定后洗涤；固定剂为聚乙二醇与聚丙烯酰胺、聚乙烯醇或海藻酸钙中至少一种的混合物；聚乙二醇的浓度为０．０８～０．１ｇ／ｍｌ；聚丙烯酰胺、聚乙烯醇或海藻酸钙浓度为０．１～０．２　ｇ／ｍｌ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁晓亮，王娟，王波，曾聪明，孙勇，文军，
申请(专利权)人：尚科生物医药上海有限公司，
类型：发明
国别省市：31