【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物材料
，具体涉及一种。
技术介绍
年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration, AMD)已经成为危害全世界人类眼部健康的一种不容忽视的疾病。世界卫生组织的研究报告表明，AMD致盲者约占全球盲人的8. 7%，全球约有3000万AMD患者，每年约有50万人因为AMD而致盲。美国2004年报告约有175万AMD患者，AMD的患病率为1. 47%，而到2020年，推测将有高达 300万的AMD患者。我国邹海东等人的一项调查结果显示，50岁以上人群的AMD患病率为 15.5%。按照联合国的人口数据资料，我国在2005年50岁以上的人口数接近3亿，按照这个比例，我国50岁以上AMD患者总数应该接近400万，在新加坡这个以华人为主的国家， AMD也逐渐成为主要的致盲原因，60岁以上人群患病率为27%，由此可见，随着人口的老龄化，AMD的患病率将逐年增高，随之而带来的公共卫生问题亦不能忽视。研究结果表明AMD的发病与视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE) 细胞的萎缩和变性...
【技术保护点】
１．一种促视网膜色素上皮细胞扩增的水凝胶细胞支架的制备方法，其特征在于，步骤如下：步骤１：首先制备电解质高分子单体溶液，即将电解质高分子单体和溶剂按质量比范围１∶１０～１∶２００混合而得电解质高分子单体溶液，溶剂为去离子水或ｐＨ值为５．７～８．０的磷酸盐缓冲溶液，电解质高分子单体包括带负电荷的丙烯酸、甲基丙烯酸、苯乙烯磺酸钠、２－丙烯酰胺基－２－甲基丙磺酸、带正电荷的丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵、甲基丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵或者丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵；步骤２：制备中性高分子单体溶液，即将中性高分子单体和溶剂按质量比范围１∶１０～１∶２００...
【技术特征摘要】
1.一种促视网膜色素上皮细胞扩增的水凝胶细胞支架的制备方法，其特征在于，步骤如下步骤1 首先制备电解质高分子单体溶液，即将电解质高分子单体和溶剂按质量比范围1 10 1 200混合而得电解质高分子单体溶液，溶剂为去离子水或PH值为5. 7 8. 0的磷酸盐缓冲溶液，电解质高分子单体包括带负电荷的丙烯酸、甲基丙烯酸、苯乙烯磺酸钠、2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸、带正电荷的丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵、甲基丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵或者丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵；步骤2:制备中性高分子单体溶液，即将中性高分子单体和溶剂按质量比范围 1 10 1 200混合而得中性高分子单体溶液，溶剂为去离子水或pH值为5. 7 8.0的磷酸盐缓冲溶液，中性高分子单体包括甲基丙烯酸羟乙脂、甲基丙烯酸甲酯、N-乙烯基吡喏烷酮、二甲基丙烯酸乙二醇酯、丙烯酰胺或者N，N' 二甲基丙烯酰胺；步骤3 制备高分子水凝胶，即将制备而得的电解质高分子单体溶液与中性高分子单体溶液按电解质高分子单体与中性高分子单体的摩尔比范围为1 0.05 1 1.0混合均勻后，加入质量浓度为1 10%的N，N'-亚甲基双丙酰胺交联剂和质量浓度为0. 1% 的2-氧代-1，5-戊二酸引发剂，其中电解质高分子单体和所述的N，N'-亚甲基双丙酰胺的摩尔比范围为1 0. 1 1 0.5，而中性高分子单体和所述的N，N'-亚甲基双丙酰胺的摩尔比范围为1 0.2 1 0.5，再次混合均勻后将该混合溶液在避光条件下利用氮气脱氧30分钟后加入板状合成模具中，再用365nm的紫外灯对板状合成模具内氮气脱氧后的混合溶液在室温下照射6小时后，再单体聚合为高分子水凝胶；步骤4 进行高分子水凝胶pH值和离子强度的调节，即将所得的高分子水凝胶在去离子水中浸泡，除去高分子水凝胶中微量的未反应单体、交联剂及引发剂，然后将高分子水凝月交用 4-(-2-hydroxyethyl) -piperazine-l-ethansulfonic acid 的 HEPES 缓冲溶液浸泡， 该 HEPES 缓冲溶液还包括 5X IO^3M 的 HEPESU. 55X IO^2M 的 NaHC03、0. 14M 的 NaCl 以及 2. 5 X IOVl的苯酚红，另外该HEPES缓冲溶液的离子强度I为0. 15M以及pH值为7. 4，并且每经过12小时更新一次所述的HEPES缓冲溶液，直到高分子水凝胶达到溶胀平衡，此时高分子水凝胶的离子强度和PH值与细胞培养液一致；步骤5 将达到溶胀平衡的高分子水凝胶切成直径为15mm且厚度范围为1. 5mm-2mm的圆柱状，在温度为120°C条件下，经过20分钟高压灭菌之后转移至培养板的孔中，这样培养板和其上的高分子水凝胶就形成了促视网膜色素上皮细胞扩增的水凝胶细胞支架。2.根据权利要求1所述的促视网膜色素上皮细胞扩增的水凝胶细胞支架的制备方法， 其特征在于所述的板状合成模具是由玻璃板围成的框架结构构成的容器，且该框架结构内设置有硅胶垫，其长宽高尺寸分别为10cm、IOcm以及0. Icm03.根据权利要求2所述的促视网膜色素上皮细胞扩增的水凝胶细胞支架的制备方法， 其特征在于，步骤如下步骤1 首先制备电解质高分子单体溶液，即将电解质高分子单体和溶剂按质量比范围1 10混合而得电解质高分子单体溶液，溶剂为PH值为5. 7的磷酸盐缓冲溶液，电解质高分子单体包括带负电荷的丙烯酸；步骤2:制备中性高分子单体溶液，即将中性高分子单体和溶剂按质量比范围1 10混合而得中性高分子单体溶液，溶剂为PH值为5. 7的磷酸盐缓冲溶液，中性高分子单体包括甲基丙烯酸羟乙脂；步骤3 制备高分子水凝胶，即将制备而得的电解质高分子单体溶液与中性高分子单体溶液按电解质高分子单体与中性高分子单体的摩尔比范围为1 0.05混合均勻后，加入质量浓度为1的N，N'-亚甲基双丙酰胺交联剂和质量浓度为0. 1%的2-氧代-1，5-戊二酸引发剂，其中电解质高分子单体和所述的N，N'-亚甲基双丙酰胺的摩尔比范围为 1 0. 1，而中性高分子单体和所述的N，N'-亚甲基双丙酰胺的摩尔比范围为1 0.2，再次混合均勻后将该混合溶液在避光条件下利用氮气脱氧30分钟后加入板状合成模具中， 再用365nm的紫外灯对板状合成模具内氮气脱氧后的混合溶液在室温下照射6小时后，再单体聚合为高分子水凝胶；步骤4 进行高分子水凝胶pH值和离子强度的调节，即将所得的高分子水凝胶在去离子水中浸泡，除去高分子水凝胶中微量的未反应单体、交联剂及引发剂，然后将高分子水凝月交用 4-(-2-hydroxyethyl) -piperazine-l-ethansulfonic acid 的 HEPES 缓7中溶液浸泡， 该 HEPES 缓冲溶液还包括 5X KT3M 的 HEPESU. 55X KT2M 的 NaHC03、0. 14M 的 NaCl 以及 2. 5 X IOVl的苯酚红，另外该HEPES缓冲溶液的离子强度I为0. 15M以及pH值为7. 4，并且每经过12小时更新一次所述的HEPES缓冲溶液，直到高分子水凝胶达到...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈咏梅，刘健康，冯智辉，刘振齐，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：87
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