本发明专利技术公开了一种耧斗菜组培培养基，包括不定芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基。还公开了一种耧斗菜快速繁殖方法，该方法为：将灭菌的耧斗菜幼嫩茎端切割后做为外植体，在无菌条件下将外植体接种于不定芽诱导培养基上，培养20天时诱导出不定芽，继续培养10天；然后在无菌条件下将不定芽切割后接种于增殖培养基上培养30天；再在无菌条件下将增殖培养后的不定芽转接于生根培养基上培养20天，获得耧斗菜组培苗；待组培苗长至2cm～3cm高，开瓶练苗3天～5天，再移栽到素沙与草炭的栽培介质中，得到耧斗菜再生植株。采用本发明专利技术培养基和方法生产的耧斗菜组培苗的移栽成活率达100％，耧斗菜组培苗移栽当年即能开花。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种。
技术介绍
耧斗菜花色鲜艳，花形大，花期较长，因其花瓣上端开展，而5个花瓣末端形成的5 个距向中心集中，形似漏斗而得名。耧斗菜因其奇特的花形，艳丽的花色而受到人们喜爱， 具有较高的观赏价值。目前耧斗菜繁殖方法主要为播种繁殖和分株繁殖。播种繁殖对发芽温度要求严格，一般为15°C 20°C，温度过高则不易发芽，并且播种苗2年后才可以开花。分株繁殖不仅对植株大小有一定要求，而且需要大量人力和时间。现有的两种繁殖方法不仅繁殖周期较长，要求大量的种子和植株，并且耧斗菜栽培3年后植物易退化，这就需要寻找一种快速高效的耧斗菜繁殖方法，满足该花卉的大规模工厂化生产需求。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供了一种适用于耧斗菜组织培养的培养基以及利用该培养基快速繁殖耧斗菜的方法。采用本专利技术的组培培养基和方法，增殖培养15天后，芽增殖率达95%以上，增殖频率不低于2. 0，生根培养10天左右，部分幼苗基部产生白色根，培养20天后，大部分幼苗均长出根，生根率达92 %以上，移栽成活率达100%，组培苗移栽当年即能开花。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是一种耧斗菜组培培养基，其特征在于，各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0. 5mg 3. Omg(优选1. Omg 2. Omg,进一步优选1. Omg)、萘乙酸0. Img 0. 5mg(优选0. 2mg 0. 3mg,进一步优选 0. 3mg) ,2,4- 二氯苯氧乙酸 0. 2mg 0. 4mg(优选 0. 25mg 0. 35mg,进一步优选0. 3mg)、蔗糖20g 40g (优选25g 35g，进一步优选30g)和琼脂4g 8g (优选5g 6g，进一步优选6g)；所述不定芽诱导培养基的pH值为5. 8 6. 0 ；增殖培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0. 5mg 3. Omg (优选 1. Omg 2. Omg，进一步优选 2. Omg)、萘乙酸 0. Img 0. 5mg (优选 0. 2mg 0. :3mg，进一步优选0. 2mg)、蔗糖20g 40g (优选25g 35g，进一步优选30g)和琼脂4g 8g (优选 5g 6g，进一步优选6g)；所述增殖培养基的pH值为5. 8 6. 0 ；生根培养基每升MS常规基本培养基中添加活性炭0. Ig Ig(优选0. 2g 0. 8g，进一步优选0. 5g)、蔗糖IOg 40g (优选20g 30g，进一步优选20g)和琼脂4g 8g (优选5g 6g，进一步优选6g)；所述生根培养基的pH值为5. 8 6. 0。本专利技术还提供了一种耧斗菜的快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括以下具体步骤(1)将灭菌的耧斗菜幼嫩茎端切割后做为外植体，在无菌条件下将外植体接种于不定芽诱导培养基上，培养20天时诱导出不定芽，继续培养10天；然后在无菌条件下将不定芽切割后接种于增殖培养基上培养30天；再在无菌条件下将增殖培养后的不定芽转接于生根培养基上培养20天，获得耧斗菜组培苗；以上培养条件均为温度25士2°C，l i光照与12h黑暗交替培养，光照强度为35 μ mol · mY1 40 μ mol · mY1 ；(2)待步骤(1)中所述组培苗长至2cm 3cm高，开瓶练苗3天 5天，再移栽到素沙与草炭的质量比为2 1的栽培介质中，得到耧斗菜再生植株。本专利技术与现有技术相比具有以下优点1、本专利技术的组培培养基针对性强、适用性好，外植体经不定芽诱导培养基培养20 天时即诱导出不定芽，30天后可见分化出的芽增大长高，芽的诱导率达到70%以上，增殖培养15天后，芽增殖率达95%以上，增殖频率不低于2. 0，生根培养10天左右，部分幼苗基部产生白色根，培养20天后，大部分幼苗均长出根，生根率达92 %以上，移栽成活率达 100%，组培苗移栽当年即能开花。2、本专利技术的方法不受季节限制，可常年生产耧斗菜组培苗，并可实现耧斗菜组培苗的规模化生产。下面通过实施例，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。具体实施例方式实施例1本实施例中各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0.5mg、萘乙酸 0. lmg、2，4- 二氯苯氧乙酸0. ang、蔗糖20g和琼脂4g ；所述不定芽诱导培养基的pH值为 5. 8 ；增殖培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0. 5mg、萘乙酸0. Img, 蔗糖20g和琼脂4g ；所述增殖培养基的pH值为6. 0 ；生根培养基每升MS常规基本培养基中添加活性炭0. lg、蔗糖IOg和琼脂4g ；所述生根培养基的PH值为6.0。本实施例的耧斗菜快速繁殖方法为(1)将耧斗菜幼嫩茎端依次经自来水粗洗，洗洁精水溶液漂洗5min，自来水冲洗 60min，75%乙醇浸泡IOs 30s，无菌水冲洗1次，2%次氯酸钠消毒5min，无菌水冲洗4 6次后切割成0. 5cm大小的外植体，在无菌条件下将外植体接种于不定芽诱导培养基上，培养20天时诱导出不定芽，继续培养10天；然后在无菌条件下将不定芽切割后接种于增殖培养基上培养30天；再在无菌条件下将增殖培养后的不定芽转接于生根培养基上培养20天， 获得耧斗菜组培苗；以上培养条件均为温度27°C，l i光照与12h黑暗交替培养，光照强度 35 μ mol · HTiV1 ；(2)待组培苗长至2cm 3cm高，开瓶练苗3天 5天，再移栽到素沙与草炭的质量比为2 1的栽培介质中，得到耧斗菜再生植株。本实施例的外植体经不定芽诱导培养基培养20天时即诱导出不定芽，30天后可见分化出的芽增大长高，芽的诱导率达到70%以上，增殖培养15天后，芽增殖率达95 %以上，增殖频率不低于2. 0，生根培养10天左右，部分幼苗基部产生白色根，培养20天后，大部分幼苗均长出根，生根率达92%以上，移栽成活率达100%，组培苗移栽当年即能开花。实施例2本实施例中各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤3. Omg、萘乙酸 0. 5mg、2，4- 二氯苯氧乙酸0. %ig、蔗糖40g和琼脂8g ；所述不定芽诱导培养基的pH值为 6. O ；增殖培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤3. Omg、萘乙酸0. 5mg、 蔗糖40g和琼脂8g ；所述增殖培养基的pH值为5. 8 ；生根培养基每升MS常规基本培养基中添加活性炭lg、蔗糖40g和琼脂8g ；所述生根培养基的PH值为5.8。本实施例的耧斗菜快速繁殖方法同实施例1。本实施例的外植体经不定芽诱导培养基培养20天时即诱导出不定芽，30天后可见分化出的芽增大长高，芽的诱导率达到70%以上，增殖培养15天后，芽增殖率达95 %以上，增殖频率不低于2. 0，生根培养10天左右，部分幼苗基部产生白色根，培养20天后，大部分幼苗均长出根，生根率达92%以上，移栽成活率达100%，组培苗移栽当年即能开花。实施例3本实施例中各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种耧斗菜组培培养基，其特征在于，各阶段培养基添加物含量分别为：不定芽诱导培养基：每升ＭＳ常规基本培养基中添加６－苄氨基嘌呤０．５ｍｇ～３．０ｍｇ、萘乙酸０．１ｍｇ～０．５ｍｇ、２，４－二氯苯氧乙酸０．２ｍｇ～０．４ｍｇ、蔗糖２０ｇ～４０ｇ和琼脂４ｇ～８ｇ；所述不定芽诱导培养基的ｐＨ值为５．８～６．０；增殖培养基：每升ＭＳ常规基本培养基中添加６－苄氨基嘌呤０．５ｍｇ～３．０ｍｇ、萘乙酸０．１ｍｇ～０．５ｍｇ、蔗糖２０ｇ～４０ｇ和琼脂４ｇ～８ｇ；所述增殖培养基的ｐＨ值为５．８～６．０；生根培养基：每升ＭＳ常规基本培养基中添加活性炭０．１ｇ～１ｇ、蔗糖１０ｇ～４０ｇ和琼脂４ｇ～８ｇ；所述生根培养基的ｐＨ值为５．８～６．０。
【技术特征摘要】
1.一种耧斗菜组培培养基，其特征在于，各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0. 5mg 3. Omg、萘乙酸0. Img 0. 5mg、2，4- 二氯苯氧乙酸0. 2mg 0. 4mg、蔗糖20g 40g和琼脂4g 8g ； 所述不定芽诱导培养基的PH值为5. 8 6. O ；增殖培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤0. 5mg 3. Omg、萘乙酸 0. Img 0. 5mg、蔗糖20g 40g和琼脂4g 8g ；所述增殖培养基的pH值为5. 8 6. O ；生根培养基每升MS常规基本培养基中添加活性炭0. Ig lg、蔗糖IOg 40g和琼脂4g 8g ；所述生根培养基的pH值为5. 8 6. O。2.根据权利要求1所述的耧斗菜组培培养基，其特征在于，所述各阶段培养基添加物含量分别为不定芽诱导培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤1. Omg 2. Omg、萘乙酸0. 2mg 0. 3mg,2,4- 二氯苯氧乙酸0. 25mg 0. !35mg、蔗糖25g 35g和琼脂5g 6g ；增殖培养基每升MS常规基本培养基中添加6-苄氨基嘌呤1. Omg 2. Omg、萘乙酸 0. 2mg 0. 3mg、蔗糖25g 35g和琼脂5g 6g ；生根培养基每升MS常规基本培养基...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵银萍，杜喜春，付洪冰，孟长军，王丹，仲莎，
申请(专利权)人：西安文理学院，
类型：发明
国别省市：87
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