一种酪氨酸磷酸化肽的纯化方法技术

技术编号:6864590 阅读:328 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术为β-消除和Michael亲核加成方法在磷酸化蛋白质组学研究中的应用。具体地说是一种酪氨酸磷酸化肽的纯化方法,是利用β-消除和Michael亲核加成反应消除掉蛋白酶解液中非酪氨酸磷酸肽上的磷酸修饰基团,然后再用磷酸肽富集材料富集未发生消除反应的酪氨酸磷酸化肽。本发明专利技术利用β-消除和Michael亲核加成反应高特异性,高选择性的从复杂蛋白酶解样品中纯化酪氨酸磷酸肽的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是一种基于β -消除和Michael亲核加成反应的酪氨酸磷酸化肽的纯化方法,是β -消除和Michael亲核加成方法在磷酸化蛋白质组中的应用,β -消除和Michael 亲核加成反应方法对酪氨酸磷酸化肽段显示出高的特异性,高的选择性和高的灵敏度。 β-消除和Michael亲核加成反应可以实现对酪氨酸磷酸肽的纯化,使其能够应用于蛋白质翻译后修饰的磷酸化蛋白质组中。通过β-消除和Michael亲核加成反应方法消除丝氨酸和苏氨酸上的磷酸基团,进而利用磷酸肽富集材料从复杂蛋白酶解样品中纯化出酪氨酸磷酸化肽段,结合生物质谱进行大规模酪氨酸磷酸化蛋白质的鉴定和酪氨酸磷酸化位点的确定。
技术介绍
蛋白质的翻译后修饰是蛋白质组中研究的热点课题。蛋白质磷酸化是最常见、最重要的一种蛋白质的翻译后修饰方式,是目前已知的信号的主要传递方式。蛋白质的磷酸化和去磷酸化几乎调节着生命活动的整个过程,包括细胞的增殖、发育和分化,神经活动, 肌肉收缩,新陈代谢,肿瘤发生等。蛋白质酪氨酸磷酸化在细胞的信号传导中起着非常重要的作用。酪氨酸激酶的异常激活可以产生异常的细胞增殖和存活信号进而导致形成肿瘤或癌症。因本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酪氨酸磷酸化肽的纯化方法,其特征在于:基于β-消除和Michael亲核加成反应不能将酪氨酸磷酸化肽中的磷酸基团消除的特性;具体是利用β-消除和Michael亲核加成反应消除掉蛋白酶解液中非酪氨酸磷酸肽上的磷酸修饰基团,然后再用磷酸肽富集材料富集未发生消除反应的酪氨酸磷酸化肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邹汉法韩广辉叶明亮王春丽
申请(专利权)人:中国科学院大连化学物理研究所
类型:发明
国别省市:91

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