制备用于眼外伤时封闭角膜及巩膜伤口的值入物的方法技术

本发明专利技术所述方法在于，将清除过低分子掺杂物的胶原蛋白溶液用一氧化二氮使其饱和，调整其浓度到８０（质量）％以上，并以０. ５～１５千戈瑞剂量的电离辐射进行照射。眼外伤时用于封闭角膜及矾膜伤口的植入物，是由这种生物高聚物制做的，具有一定的形状和规格，以保证能完全封闭这些伤口。其制取方法在于，将装在模子里的浓度为０. ２～１. ３（质量）％的一氧化二氮饱和过的胶原蛋白溶液，用０. ５～１５千戈瑞的电离辐射进行照射。将网状生物高聚物的毛坯干至含水量３０～５０（质量）％，再使其具有植入物的形状和规格。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于眼科学领域，确切地说属于获得网状生物高聚物的方法，属眼外伤情况下用这种生物高聚物制作的用来封闭角膜和巩膜伤口的植入物，以及获取它的方法。按照所提供的方法获得的网状生物高聚物，广泛用于生产各种形式的眼科手术用的隐形眼镜、覆盖层和植入物以及各种病因的角膜营养性疾患的非手术治疗。所提供的这种植入物，应用于治疗眼睛巩膜及角膜的外伤性疾患。对于眼科学领域而言，目前已研制出一系列以胶原蛋白——天然蛋白质为基质的、能与眼睛组织生物学相容且具有低抗原的生物高聚物。为制做这种生物高聚物，曾对胶原蛋白的辐射稳定性进行过仔细研究，从而确定辐照的影响取决于辐照的剂量及其作用条件。当胶原蛋白溶液受到辐照时，既可发生胶原蛋白微纤维的缝合过程，又可发生退化过程。这要取决于胶原蛋白的浓度以及所用缝合促进剂的特性。已知一种胶原蛋白凝胶是用剂量为33千戈瑞的电离辐射对胶原蛋白辐照而得。由电泳图象的改变，以及在酸中溶解度的下降证明在辐照的影响下，胶原蛋白凝胶中已形成新的结构键。还曾发现，对于蛋白水解发作的素质有所提高，即可对这些胶原蛋白凝胶形成的伤口之愈合产生有利的影响。但是，这种方法不可能用来制做诸如Problemytechnikiwmedycynie，t，Ⅻ，№3，1981，Bartelik，WplywsterylizacjiradiacyjuesnaniektoreWlasciwoscifizykochemicznezelukolagenowego所说的具有给定机械强度和膨胀程度，以及发酵稳定性的任意立体形状的移植物，因为当空气中存在氧时，在这种辐照剂量下会发生胶原蛋白微纤维的解体过程。已知一种制做眼科用胶原蛋白覆盖层的方法(参见SU，A，1321420)，它的实质是将农业牲畜眼睛的巩膜做碱——盐处理，把所得到的生物组织用有机酸水溶液(如醋酸水溶液)使之均质化以形成胶原蛋白溶液，针对缓冲液进行渗析，使胶原蛋白溶液除去低分子掺杂物，从而将胶原蛋白的溶液的PH值调整到4.5～7.5，并将得到的胶原蛋白溶液进行干燥，与此同时就用这种胶原蛋白溶液模制成能够重复出人眼睛的前面一块的曲率的球面覆盖层。所得到的这种胶原蛋白覆盖层的特点在于，其机械强度差，膨胀度低，容易被吸收。按照这种方法无法制做任意立体形状的植入物，因为要模制这样形状的植入物只能用干燥的方法。作为本专利技术的基础所提出的任务是，要拟定一种制取眼科用网状生物高聚物的方法，即通过在专门选择的条件下，用电离辐射辐照胶原蛋白溶液，以保证所得到的生物高聚物具有足够的机械强度，很高的膨胀度和发酵稳定性;而且还要用这种生物高聚物制得眼睛外伤时用来封闭角膜和巩膜伤口用的植入物，以及通过优选工艺过程来制取这种植入物的方法。在保持上述植入物的生物高聚物具有最佳性能的前提下，这种方法能保证该植入物具有给定的形状和规格，以对伤口作完全封闭。上述任务是这样解决的。所提出的以胶原蛋白为基质制取眼科用网状生物高聚物的方法，是通过将牲畜眼睛的巩膜进行碱——盐处理，把得到的生物组织用有机酸的水溶液使之均质化，以形成胶原蛋白溶液，随后从中除去低分子掺杂物。按照本专利技术，将清除过掺杂物的胶原蛋白溶液用一氧化二氮使其饱和，并将其浓度调整到不高于80(质量)%，之后将所得到的胶原蛋白溶液用剂量为0.5～15千戈瑞的电离辐射进行辐照，直至形成网状生物高聚物。由予先选好的辐照剂量、胶原蛋白溶液浓度，一氧化二氮作为缝合促进剂，可保证所得到的网状生物高聚物在胶原蛋白的整个体积范围内的缝合均匀性。缝合均匀性及缝合可调整度能够保持生物高聚物的延展性，使其机械强度和膨胀度增高两倍，同时也使发酵稳定性增加。由于该生物高聚物中不存在有害掺杂物，而且又是胶原蛋白基质，因而就能保证它与人眼组织具有良好的生物相容性。为提高网状生物高聚物的质量，以避免其中形成空洞结构，建议在辐照前用离心方法对胶原蛋白溶液进行部分地除气，转速为3～40×103转/分，时间持续10～30分钟。所提出的眼睛外伤时用来封闭角膜及巩膜伤口用的植入物，根据本专利技术是以胶原蛋白为基质由网状生物高聚物制做的。由于这种植入物的生物高聚物具有很高的膨胀度，同时又可调节，还有足够的强度，故可以保证完全封闭眼睛外伤时的伤口，而不必采用会使眼睛受到损伤的工具。为了解决前面提出来的任务，同时提出一种制取上述植入物的方法，它包括对牲畜眼睛巩膜做碱——盐处理，把得到的生物组织用有机酸水溶液使之均质化，以形成胶原蛋白溶液，随之从中除去低分子掺杂物。按照本专利技术，将清除过掺杂物的胶原蛋白溶液的浓度调整到0.2～1.3(质量)%，用一氧化二氮使其饱和，然后将其装进模子里并用剂量为0.5～15千戈瑞的电离辐射照射，将这种以胶原蛋白为基质的由网状生物高聚物作成的当作植入物用的毛坯用水透析24～48小时，将其干燥至网状生物高聚物中的水气含量为30～50(质量)%，尔后使毛坯具有植入物的形状及规格，借以在眼睛外伤时对角膜及巩膜伤口完全封闭。以上的方法保证了植入物中生物高聚物的特性参数能加以调节，同时也可保证植入物的形状及规格，而这就是植入物使用时的必要条件。为了优化植入物的性能参数，将胶原蛋白溶液放入模子以前，最好依次采用冷冻并在20～25℃温度下化冻和离心(转速为1～2×103转/分，持续时间10～60分钟)的方法将其进行部分地除气。为了便于将植入物放在眼睛的伤口处，最好使它具有圆柱形，尖端长为3～5毫米，底径为0.5～4.0毫米。以胶原蛋白为基质获得网状生物高聚物的方法，按照本专利技术是依以下方式实现的。将农业牲畜的眼睛巩膜进行碱——盐处理。把牲畜眼睛巩膜仔细地除去眼睛内膜、剩余的结膜和肌肉，将基质分出来并将其切成小块。将生物组织的称样在蒸馏水中清洗，直至完全去除机械杂质和血液，再将其移入烧瓶并将10%的苛性钠溶液注入饱和的硫酸钠溶液中(按每10克生物组织500毫升计算)，在18～20℃下放置48小时。将溶液倒出并使生物组织中和到PH值为6.0～7.0，使其与2%的硼酸溶液混合，不断更新溶液。用蒸馏水清洗生物组织，直到从清洗液中完全除去硫酸钠离子。把所得到的生物组织放入有机酸(如醋酸、柠檬酸、抗坏血酸)的肌肉注射(IM)液中，使其均质化，估计量须使溶液中蛋白质的浓度为1(质量)%。搅拌上述物质并置入低温冰箱1～3昼夜。使均质物质离心并低温静置若干昼夜。对所得到的胶原蛋白溶液进行过滤。为除去低分子掺杂物，需要把胶原蛋白的醋酸溶液用醋酸稀释，直到蛋白质的浓度为0.7～0.8(质量)%，并在18～20℃温度下针对磷酸或柠檬酸盐缓冲剂进行透析，调整PH值到4.5～7.5。把胶原蛋白溶液装入烧杯并放进真空室中，以便除去随后可成为辐照过程抑制剂的空气中的氧，尔后进行离心。用化学纯的一氧化二氮使所得到的胶原蛋白溶液饱和，而一氧化二氮就是不会氧化的胶原蛋白缝合促进剂。然后将此溶液调整到浓度不高于80(质量)%，而这便是极限浓度，因为接下去得到的网状生物高聚物在膨胀之后会变得疏松。为了提高网状生物高聚物的质量，即为了避免其中形成空洞以及使机械强度降低，建议采用离心的方法进行部分地除气，转速为3～40×103转/分，持续时间10～30分钟。在这种工作状态下，能保障全部除去过量的一氧化二氮，以与胶原蛋白溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备用于眼外伤时封闭角膜及巩膜伤口的植入物的方法，包括对牲畜眼睛巩膜进行碱－－盐处理，再用有机酸水溶液使得到的生物组织均质化，以形成胶原蛋白溶液，随后从中取去低分子掺杂物，其特征在于：将清除过掺杂物的胶原蛋白溶液浓度调整到０. ２－１. ３（质量）％，以一氧化二氮使其饱和，然后将其装在模子里用０. ５－１５千瑞剂量的电离辐射照射，将所形成的胶原蛋白基质网状生物高聚物的植入物毛坯用水透析２４－４８小时，再将其干燥至网状生物高聚物中的水份含量为３０－５０（质量）％，最后再使毛坯具有植入物的形状的规格，以保证眼外伤时能完全封闭角膜及巩膜伤口。

【技术特征摘要】
1.一种制备用于眼外伤时封闭角膜及巩膜伤口的植入物的方法，包括对牲畜眼睛巩膜进行碱--盐处理，再用有机酸水溶液使得到的生物组织均质化，以形成胶原蛋白溶液，随后从中取去低分子掺杂物，其特征在于将清除过掺杂物的胶原蛋白溶液浓度调整到0.2-1.3(质量)%，以一氧化二氮使其饱和，然后将其装在模子里用0.5-15千瑞剂量的电离辐射照射，将所形成的胶原蛋白基质网状生物高聚物的植入物毛坯用水透析24-48小时，再将其干...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯威阿托斯拉夫尼可拉维奇费道罗夫，塞尔盖尼可拉维奇巴格罗夫，符拉狄斯拉夫伊凡洛维奇特洛费莫夫，塔吉安娜斯捷潘诺夫娜安姆斯季斯拉夫斯，亚历克塞瓦伦季诺维奇奥西波夫，
申请(专利权)人：梦兹诺特拉斯列夫科技联合体〃眼科显微技术〃，
类型：发明
国别省市：RU[俄罗斯]